一种提升芽孢杆菌储存活菌量的制剂、复合保护剂及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种提升芽孢杆菌储存活菌量的制剂，采用该制剂的复合保护剂及该复合保护剂的应用；本发明专利技术中提升芽孢杆菌储存活菌量的制剂由以下质量份的组份组成：脱脂乳粉，4

【技术实现步骤摘要】
一种提升芽孢杆菌储存活菌量的制剂、复合保护剂及其应用


[0001]本专利技术涉及一种提升芽孢杆菌储存活菌量的制剂、复合保护剂及其应用，属于益生菌储存


技术介绍

[0002]保护剂是影响微生态制剂中益生菌活力最重要的外部因素，具有无免疫原性、无毒副作用、易溶解、能充分保持生物活性等特点，在微生态制剂储存过程中可充分发挥其良好的保护效果。例如，为了防止益生菌在冷冻干燥过程(预冷冻2h后冷冻干燥10
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20h)中有效活菌的变性，许多研究人员在益生菌中添加保护剂，有效减轻或防止冷冻干燥对菌体细胞的损害，使益生菌保持原有的理化特性和生物活性，因此保护剂有效利用已成为提高菌种存活率的关键技术(Carvalho A S,Silva J,Ho P,et al.Survival of freeze
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dried Lactobacillus plantarum and Lactobacillus ramnosus during storage in the presence of protectants.Biotechnology Letter,2002,24:1587
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1591.)。目前，相关学者已经对酵母菌(李真，姬生鑫，梁静静，等.以燕麦β
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葡聚糖为主的酵母冻干保护剂优化.现代食品科技，2022，7：.李真，等.一种复合酵母冻干保护剂.专利申请号CN202110920034.2)、乳酸菌(袁亚宏，等.冻干高活力乳酸菌粉保护剂的研究.西北农林科技大学学报：自然科学版，2003,31(10):82
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84.)、狄氏副拟杆菌(翟齐啸，等.一种提高狄氏副拟杆菌冻干存活率的方法及应用.专利申请号CN201910500753.1)等益生菌的冷冻干燥的保护剂进行了研制，但益生菌在冷冻干燥过程中虽然添加了保护剂，在冷冻干燥后仍存在大量活菌的损失。例如，唐尔明研究发现酿酒酵母在冻干前后的活菌量发生了显著变化，从冻干前的28
×
105CFU/ml下降到冻干后的28
×
103CFU/ml(唐尔明.微生物在冷冻干燥保藏中的成活情况.食品与发酵工业，1993，3:80
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80.)，由此说明益生菌单一菌种最佳抗冷保护剂的研制非常重要。一般来说，单一保护剂不能满足菌体抵抗外界恶劣环境的条件，而复合保护剂中各保护剂在冷冻干燥中则发挥着各自的作用，同时相互间又具有协同作用。因此，复合保护剂的研制是提高菌种存活率的主要研究方向(袁亚宏，等.冻干高活力乳酸菌粉保护剂的研究.西北农林科技大学学报：自然科学版，2003,31(10):82
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84.)。
[0003]枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)等益生芽孢杆菌是我国农业农村部公布允许使用的微生态制剂菌种，其液体制剂已经成为我国常见的商品化微生态制剂，已经展示了巨大的经济、社会效益和生态效益，具有广阔的应用前景，对农业、水产养殖业、畜牧业和饲料行业的绿色高质量发展具有重要的作用。然而，现有益生芽孢杆菌液体制剂在储存过程中容易发生菌体死亡导致有效活菌存活率低，导致货架期短，严重影响了产品质量。如何提升益生芽孢杆菌液体制剂的储存活菌量是延长其货架期、保障产品质量所面临的瓶颈问题。目前，芽孢杆菌通常采用脱脂牛奶作为抗冷保护剂进行冷冻干燥以提高其储存活菌量(王平诸，等.芽孢杆菌冷冻真空干燥法和砂管法保藏过程中存活率的变化.工业微生物，1995，25(3)：)，但该方法需要专用设备，操作过程复杂，操作难度大(李笑平，等.菌种保存方法及其优缺点的比较.卫生职业教育，2009，27
(20)：134
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135.)。
[0004]因此，开发提升益生芽孢杆菌储存活菌量的保护剂，对于农业、水产养殖业、畜牧业和饲料行业具有重要意义。

技术实现思路

[0005]鉴于相关技术的上述问题和/或其他问题，本专利技术提供了一种基于复合保护剂的冷冻法来提升益生芽孢杆菌制剂储存活菌量的方法，操作简便，不需要特殊专用设备，不需要花费很长时间，而且储存过程中活菌不容易发生死亡。
[0006]为了达到上述专利技术目的，本专利技术首先提出一种提升芽孢杆菌储存活菌量的制剂，所述制剂由以下质量份的组份组成：脱脂乳粉，4
‑
6份；山梨醇，3
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5份；谷氨酸钠，2
‑
4份。
[0007]前述的制剂，优选的质量份组成为：脱脂乳粉，5份；山梨醇，5份；谷氨酸钠，2份。
[0008]前述的制剂，优选的质量份组成为：脱脂乳粉，5份；山梨醇，4份；谷氨酸钠，4份。
[0009]前述的制剂，优选的质量份组成为：脱脂乳粉，5份；山梨醇，4份；谷氨酸钠，4份。
[0010]其次，本专利技术提供了一种提升芽孢杆菌储存活菌量的复合保护剂，所述复合保护剂为如上所述的提升芽孢杆菌储存活菌量的制剂的水溶液，其质量体积浓度为10％
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20％。
[0011]优选的，前述的复合保护剂的质量体积浓度为20％。
[0012]最后，本专利技术提供了一种提升芽孢杆菌储存活菌量的复合保护剂的应用：在芽孢杆菌菌液中添加前述的复合保护剂进行储存，储存温度为
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20℃；复合保护剂与菌液的体积比为1:3
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3:1；所述菌液中含3
×
10
10
CFU/mL芽孢杆菌。
[0013]优选的，所述复合保护剂与菌液的体积比为1:2
‑
2:1。
[0014]进一步优选的，所述复合保护剂与菌液的体积比为2:1。
[0015]前述的芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌A4、地衣芽孢杆菌C1、枯草芽孢杆菌JK
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2或地衣芽孢杆菌AQ19
‑
11。
[0016]本专利技术提供了一种基于复合保护剂的冷冻法来提升益生芽孢杆菌制剂储存活菌量的制剂、复合保护剂及其应用，采用脱脂乳粉、山梨醇和谷氨酸钠联用以协同增效，能够有效提高益生芽孢杆菌液体制剂在储存过程中的有效活菌存活率。而且该制剂和复合保护剂的操作简便，不需要特殊专用设备，不需要花费很长时间。
具体实施方式
[0017]以下通过具体实施方式对本专利技术作进一步的说明，但本专利技术并不限于这些具体实施方式。
[0018]下面具体实施方式中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。其中：枯草芽孢杆菌A4(中国典型培养物保藏中心保藏编号CCTCC No.M20221167)，由本实验室分离自池塘底泥[安健2022]；地衣芽孢杆菌C1(中国典型培养物保藏中心保藏编号CCTCC No.M2020680)、枯草芽孢杆菌JK
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2(中国典型培养物保藏中心保藏编号CCTCC No.M20221568)、地衣芽孢杆菌AQ19
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11(本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提升芽孢杆菌储存活菌量的制剂，其特征在于，所述制剂由以下质量份的组份组成：脱脂乳粉，4
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6份；山梨醇，3
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5份；谷氨酸钠，2
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4份。2.如权利要求1所述的制剂，其特征在于，所述制剂的质量份组成为：脱脂乳粉，5份；山梨醇，5份；谷氨酸钠，2份。3.一种提升芽孢杆菌储存活菌量的复合保护剂，其特征在于：所述复合保护剂为权利要求1或2所述的提升芽孢杆菌储存活菌量的制剂的水溶液，其质量体积浓度为10％
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20％。4.如权利要求3所述的一种提升芽孢杆菌储存活菌量的复合保护剂,其特征在于：所述复合保护剂的质量体积浓度为20％。5.如权利要求4所述的一种提升芽孢杆菌储存活菌量的复合保护剂的应用，其特征在于：在芽孢杆菌菌液中添加如权利要求4所述的复合保护剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：安健，曹海鹏，顾颖，王会聪，李家胜，
申请(专利权)人：连云港市海洋与渔业发展促进中心绿奥环保科技上海有限公司江苏农林职业技术学院，
类型：发明
国别省市：