一种提高克氏原螯虾抗高温能力的SNP标记引物组合及其应用制造技术

本发明专利技术属于水产动物养殖分子标记筛选与应用领域。具体涉及一种提高克氏原螯虾抗高温能力的SNP标记引物组合及其应用。发明专利技术特征为：提取克氏原螯虾血淋巴RNA，反转录为cDNA，根据已知克氏原螯虾抗高温基因HSP70和HSP90基因组序列设计标记引物，以cDNA为模板进行PCR扩增，PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测后送测，比对序列信息，确认HSP70基因和HSP90基因的SNP位点及基因型，通过比较不同基因型的抗高温能力(以35℃的死亡时间为标准)，筛选得到抗高温能力最强的基因型及其组合，如HSP70

【技术实现步骤摘要】
一种提高克氏原螯虾抗高温能力的SNP标记引物组合及其应用


[0001]本专利技术属于水产养殖分子生物学领域，具体涉及一种提高克氏原螯虾抗高温能力的SNP标记引物组合及其应用。本专利技术适用于克氏原螯虾养殖和抗高温育种的辅助筛选，应用本专利技术可以提高克氏原螯虾种苗抗高温能力，对克氏原螯虾的抗高温品种(系)选育具有重要意义。
技术背景
[0002]克氏原螯虾(Procambarus clarkii)，又名红色沼泽螯虾(red swamp crayfish)，俗称小龙虾，在动物分类学上隶属于节肢动物门、甲壳纲、十足目、螯虾科、原螯虾属。克氏原螯虾并非我国本土物种，其原产于墨西哥北部和美国南部，20世纪30年代经日本传入我国南京，之后沿着长江中下游进行扩散，目前我国大部分地区的湖泊、河流、池塘、水田等都有克氏原螯虾的分布。
[0003]克氏原螯虾营养丰富(高蛋白、低脂肪、富含钙、磷、铁、维生素)，肉质鲜美，深受广大人民群众的喜爱，目前已成为我国重要的淡水养殖品种之一。据《中国小龙虾产业发展报告(2022)》报道，2021年我国克氏原螯虾养殖面本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种筛选克氏原螯虾HSP70基因SNP位点的标记引物组合，其特征在于所述引物标记组合的核苷酸序列如下：HSP70
‑
L
‑
F 5
’‑
ACTGTAAAGAAAGCCTGGTGAAT
‑3’
、HSP70
‑
L
‑
R5
’‑
CGCCTCGTCTGGGTTGAT
‑3’
、HSP70
‑
R
‑
F 5
’‑
AGATACTCACTTGGGCGG
‑3’
、HSP70
‑
R
‑
R5
’‑
TTTTTTTATGCTTCGGC
‑3’
；RCR体系如下：10uL2
×
PCR Mix、上下游引物各1uL、cDNA1uL、ddH2O7uL；PCR程序如下：95℃预变性5min，95℃变性30s、58℃退火30s、72℃延伸1min、共循环35次，72℃延伸10min；将PCR产物送测，经过序列比对后确认克氏原螯虾HSP70基因存在3个SNP位点，分别位于以起始密码子ATG为初始编号序列的第212、606和679位的碱基。2.一种筛选克氏原螯虾HSP90基因SNP位点的引物标记组合，其特征在于所述引物标记组合的核苷酸序列如下：HSP90
‑
L
‑
F 5
’‑
TCAGTGATTTATTAGCCAAC
‑3’
、HSP90
‑
L
‑
R5
’‑
CTGCTTACCGTCATATTCC
‑3’
、HSP90
‑
R
‑
F 5
’‑
ATCTTCCCCTCAACATCT...

【专利技术属性】
技术研发人员：白旭峰，朱玺，熊礼静，任鑫，邢永忠，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：