【技术实现步骤摘要】
用于检测CP4
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EPSPS的胶体金免疫层析试纸
[0001]本专利技术属于检测领域,具体涉及用于检测CP4
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EPSPS的胶体金免疫层析试纸。
技术介绍
[0002]目前,全球种植转基因农作物的面积一直快速增长,在大豆中植入CP4
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EPSPS基因,可以有效提高大豆抗草甘膦除草剂的抗性。
[0003]目前对于检测转基因成分CP4
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EPSPS的检测方法主要基于核酸的PCR、LAMP等检测方法为主,这些方法虽然具有准确性好、灵敏度高等优点,但设备昂贵,且操作人员需要进行专业的培训,不能够满足现场快速检测的需求,难以在企业及作物种植现场进行检测。而免疫层析检测方法成本低廉、操作简便、特别适用于现场初步筛查判断、与仪器检测方法相得益彰。
[0004]然而现有的胶体金免疫层析方法,灵敏度相对较差,检测结果的可靠性相对较低,难以满足需要。如何优化反应条件,制备得到的灵敏度更佳的CP4
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EPSPS胶体金免疫层析试纸,对于得到高质 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.用于检测CP4
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EPSPS的胶体金免疫层析试纸,所述胶体金免疫层析试纸包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和底板,所述结合垫上吸附固定有CP4
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EPSPS金标抗体,所述硝酸纤维素膜设有检测线和质控线,所述检测线固定有CP4
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EPSPS包被抗体,其特征在于,其中:CP4
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EPSPS金标抗体的制备方法包括:在离心管内加入胶体金溶液,使用0.1 M 的K2CO3溶液调节胶体金溶液的pH,胶体金溶液与K2CO3溶液的体积比为1 mL:(5~7)μL,混匀,得到标记液;在标记液中加入CP4
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EPSPS标记抗体,混匀后20~30℃反应 3~7 min;反应完毕后,加入BSA,封闭;封闭完成后,离心使胶体金标记的抗体沉淀,弃去上清,加入重悬液,超声混匀,得到CP4
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EPSPS金标抗体溶液;CP4
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EPSPS包被抗体的包被液组成为:PBS+1.8~2.2 wt%蔗糖+0.01%~0.03wt% NaN3。2.根据权利要求1所述的胶体金免疫层析试纸,其特征在于,所述胶体金溶液中,胶体金的浓度为(2~3)
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4 g/mL。3.根据权利要求2所...
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