一种Jurkat效应细胞及其构建方法和用途技术

本发明专利技术提供了一种Jurkat效应细胞及其构建方法和用途。该效应细胞的构建是通过在Jurkat细胞中，对Nur77基因终止密码子区域进行基因编辑的同时，将两个报告基因GFP和luciferase定点敲入Nur77基因的编码框后，以保证报告基因的表达调控同内源性Nur77基因的表达一致。该效应细胞可通过Nur77信号强弱来反应和评估CAR和TCR分子的特异性功能，包括抗原依赖信号和非抗原依赖Tonic信号的强弱。本发明专利技术方法高效、经济、便捷且结果稳定准确。便捷且结果稳定准确。便捷且结果稳定准确。

【技术实现步骤摘要】
一种Jurkat效应细胞及其构建方法和用途


[0001]本专利技术涉及一种效应细胞及其构建方法和用途，具体涉及一种Jurkat效应细胞及其构建方法和用途。

技术介绍

[0002]肿瘤免疫治疗是通过调动机体的免疫系统，增强肿瘤微环境抗肿瘤免疫力，从而控制和杀伤肿瘤细胞。近几年，随着CAR
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T和TCR
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T技术的发展，使得肿瘤免疫治疗焕发新春，并进入大爆发阶段。其中，CAR
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T已经在血液肿瘤上显示出治愈肿瘤的潜力。嵌合抗原受体(CAR)和T细胞受体(TCR)修饰的T细胞是当前过继性细胞治疗技术中最新和最富有成效的技术，实现了从基础免疫学机制研究到临床肿瘤免疫治疗应用的转变。因其能够表达人工合成受体并能特异性识别靶细胞，CAR
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T和TCR
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T正成为振奋人心的肿瘤治疗方法。
[0003]CAR和TCR特异性分子序列设计和筛选，以及结构优化和评价是目前各大公司和学术结构在开发CAR
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T和TCR
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种构建Jurkat效应细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：通过在Jurkat细胞中对Nur77基因终止密码子区域进行基因编辑的同时，将报告基因定点并同框敲入Nur77基因的编码框后，以保证报告基因的表达调控同内源性基因Nur77的表达一致。2.根据权利要求1所述的一种构建Jurkat效应细胞的方法，其特征在于，使用选自ZFN、TALEN或/和CRISPR
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Cas9的基因编辑方法递送基因编辑物质。3.根据权利要求1或2所述的一种构建Jurkat效应细胞的方法，其特征在于，基因编辑物质为同源修复模板dsDNA，其核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。4.根据权利要求1或2所述的一种构建Jurkat效应细胞的方法，其特征在于，使用Cas9蛋白和sgRNA形成的RNP复合体进行电转。5.根据权利要求4所述的一种构建Jurkat效应细胞的方法，其特征在于，所述sgRNA的靶向核苷酸序列如SEQ ID NO:1～7中至少一项...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘平磊，刘达春，张盼，郑勇，
申请(专利权)人：上海药明生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：