一种提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率的诱导剂、方法以及应用技术

本发明专利技术公开一种提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率的诱导剂、方法以及应用，属于基因工程技术领域。为了提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率以及多基因编辑的效率的技术问题。本发明专利技术公开一种提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率的诱导剂，所述诱导剂为Nedisertib或/和ssODN

【技术实现步骤摘要】
一种提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率的诱导剂、方法以及应用


[0001]本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率的诱导剂、方法以及应用。

技术介绍

[0002]猪作为一种常见的大型实验动物，用于许多生物医学研究，特别是在转化研究领域。猪适合用于生物医学研究，因为(1)猪的的繁殖力高，很容易繁殖后代，(2)猪的生理结构、器官大小、基因组都与人具有极大的相似性，是一种非常适合用来模拟人生理特征和表型的模式动物，可以作为医学模型来研究疾病的发生与治疗，(3)猪具有经济价值，对于农业生产和遗传育种都有一定的价值。生产基因修饰猪模型可以快速的构建疾病模型猪和遗传育种优良的品质猪，这对于医学研究和农业发展都有重要的实际意义。
[0003]1985年，研究人员首次将DNA显微注射到受精卵中并产生出世界上第一头转基因猪，自此以后生产基因修饰猪的方法也随着基因工程技术的进步不断革新。猪的基因修饰技术通常涉及到外源基因的引入，包括使用逆转录病毒和慢病毒的策略，以及使用精子作为外源基因载体的方法。利本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高CRISPR/Cas9的同源重组修复效率的诱导剂，其特征在于，所述诱导剂为M3814。2.权利要求1所述的诱导剂在提高CRISPR/Cas9介导的编辑猪成纤维细胞的同源重组修复效率中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述M3814的有效浓度为0.1
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2μM。4.一种提高CRISPR/Cas9介导的同源重组修复效率的方法，其特征在于，所述方法的步骤如下：将GenCrispr NLS
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Cas9
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NLS Nuclease，sgRNA和ssODN共转染到猪细胞中，添加M3814处理共转染后的猪细胞，培养至少72小时。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述M3814的浓度为0.1
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2μM。6.根据根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述猪细胞为猪成纤维细胞；所述ssODN为经过硫代修饰。7.权利要求4
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6任一项所述的方法在编辑IN...

【专利技术属性】
技术研发人员：牟彦双，刘忠华，郭晓晨，耿立爽，姜超前，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：