一种模拟移动色谱纯化槐耳小分子活性物质的方法技术

本发明专利技术公开了一种模拟移动色谱纯化槐耳小分子活性物质的方法，涉及食品工业领域。所述方法包括以下步骤：(1)对槐耳进行浸提，得到槐耳小分子活性物质提取液；(2)利用模拟移动色谱对所述槐耳小分子活性物质提取液进行纯化，得到纯化液；(3)所述纯化液浓缩后干燥，即得精制槐耳小分子活性物质。本发明专利技术提供的模拟移动色谱纯化槐耳小分子活性物质的方法，运行成本低，进料浓度高，纯化得到的产品纯度和收率均较高，生物活性得到很大的提高，抗氧化活性提高20

【技术实现步骤摘要】
一种模拟移动色谱纯化槐耳小分子活性物质的方法


[0001]本专利技术涉及食品工业领域，特别是涉及一种模拟移动色谱纯化槐耳小分子活性物质的方法。

技术介绍

[0002]槐耳，槐树菌也，多孔菌科多年卧孔菌属，具有增强人体免疫功能、抗肿瘤和抗病毒等多种功效。有研究表明槐耳中小分活性物质主要有多酚、黄酮、黄酮醇、黄烷醇、酚酸等物质，主要功能有强化血管壁、促进肠胃消化、增加身体抵抗力、防止动脉硬化、血栓形成的作用、还能利尿、降血压、抑制细菌与癌细胞生长，及帮助消化；防治心脑血管疾病、防治老年高血压、脑溢血、冠心病、心绞痛、扩张冠状血管，增加冠脉流量；还具有止咳、祛痰、平喘及抗菌的活性，同时具有护肝、解肝毒、抗真菌、治疗急、慢性肝炎和肝硬化的作用。槐耳小分子活性物质提取纯化方法的研究较多，常用的方法有热水提取法、超声波法、表面活性剂—超声波协同提取法、超临界CO2萃取法、大孔树脂柱层析法、高速逆流色谱等方法。但现有的方法存在成本高，效率低，纯度不稳定，操作复杂等问题，不能进行产业化生产。
[0003]中国专利201811420403.6公布了一种模拟移动色谱纯化苦荞麦壳黄酮的方法，该专利利用的是20根色谱柱分五个区进行分离，虽然得到的黄酮纯度和得率很高，但利用了大量的乙醇再生剂，同时色谱柱的长度过长，影响分离纯化的效率；中国专利201810086539.1公布了一种利用模拟移动床从银杏叶提取物中分离黄酮类化合物的方法，该专利采用的是老式模拟移动床8根色谱柱，不仅浪费大量的洗脱剂，得到黄酮类化合物的纯度和得率都很低；中国专利201110034524.9公布了一种槐耳菌质提取物的鉴定及检测方法，该专利的是阴离子交换色谱柱进行分离，苯乙烯基二乙烯基苯为填充剂的色谱柱。该方法采用的是单柱色谱，为间歇式的操作工艺，溶剂消耗大、树脂利用率低、生产效率低下，已不适宜目前市场竞争的需要。
[0004]模拟移动床色谱(SMB)纯化技术是一种高效的纯化手段，相对于单柱色谱，模拟移动床色谱纯化技术的树脂利用率高，进料量大、洗脱剂用量小，可连续化生产，生产效率较高。目前，未见模拟移动床色谱纯化槐耳小分子活性物质技术研究的报道。模拟移动床色谱纯化技术已经应用于部分黄酮、花色苷的纯化中，但是不同原料的组成不同，纯化的方式及方法各不相同，分区的方式，流动相的选择等等都存在差异。在此背景下，本专利技术旨在研究模拟移动色谱纯化槐耳小分子活性物质的技术，通过建立一种工业化纯化槐耳小分子活性物质的方法，来简化操作步骤，降低生产损耗，实现连续化生产，提升生产效率和产品品种。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种模拟移动色谱纯化槐耳小分子活性物质的方法，以解决上述现有技术存在的问题，利用本专利技术的方法可以使槐耳小分子活性物质的产品纯度、收率和生物活性得到有效提高。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0007]本专利技术提供一种模拟移动色谱纯化槐耳小分子活性物质的方法，包括以下步骤：
[0008](1)对槐耳进行浸提，得到槐耳小分子活性物质提取液；
[0009](2)利用模拟移动色谱对所述槐耳小分子活性物质提取液进行纯化，得到纯化液；
[0010](3)所述纯化液浓缩后干燥，即得精制槐耳小分子活性物质；
[0011]在步骤(2)中，所述模拟移动色谱由20根色谱柱组成，通过旋转阀控制进料和出料；所述20根色谱柱，分为吸附区、除杂区、洗脱区和再生区四个区域，四个区域的色谱柱数量分别为10根、3根、4根、3根，各区之间均采用串联的连接方式，均具有进料口1个，出料口1个，所述吸附区、所述除杂区、所述洗脱区和所述再生区的进料口为该区域的第一根色谱柱；纯化时，各区同时工作，当运行时间到达切换时间后，每根色谱柱顺时针移动一个柱位。
[0012]进一步地，在步骤(2)中，所述切换时间为600
‑
1200s。
[0013]进一步地，所述模拟移动色谱的色谱柱的固定相为大孔树脂H
‑
60、XDA
‑
1B、HPD400、D101或D101B。
[0014]进一步地，所述色谱柱的工作温度为20
‑
30℃。
[0015]进一步地，在步骤(2)中，所述吸附区、所述除杂区、所述洗脱区和所述再生区的进料液分别为所述槐耳小分子活性物质提取液、体积分数为20
‑
40％的乙醇水溶液、体积分数为70
‑
90％的乙醇水溶液和去离子水；所述槐耳小分子活性物质提取液的浓度为20
‑
25mg/mL。
[0016]进一步地，在步骤(2)中，所述吸附区、所述除杂区、所述洗脱区和所述再生区的流速分别为2
‑
4mL/min、5
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7mL/min、4
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6mL/min和5
‑
7mL/min。
[0017]本专利技术还提供一种根据上述方法制备得到的槐耳小分子活性物质。
[0018]本专利技术还提供上述的槐耳小分子活性物质在制备抗氧化的产品中的应用。
[0019]本专利技术还提供上述的槐耳小分子活性物质在制备降血脂的产品中的应用。
[0020]本专利技术还提供上述的槐耳小分子活性物质在制备降血糖的产品中的应用。
[0021]本专利技术公开了以下技术效果：
[0022]本专利技术提供的模拟移动色谱纯化槐耳小分子活性物质的方法，运行成本低，进料浓度高，纯化得到的产品纯度和收率均较高，生物活性也得到很大的提高，其中，抗氧化活性提高20
‑
30％，体外降血脂活性提高20
‑
25％，体外降血糖活性提高25
‑
30％。节约乙醇用量70％
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110％、节约用水量140％
‑
180％，降低后续浓缩成本，简化操作步骤，设备20根色谱柱，增加树脂利用率，能够连续化生产，提升生产效率。
附图说明
[0023]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0024]图1为本专利技术模拟移动色谱纯化槐耳小分子活性物质的工艺流程图。
具体实施方式
[0025]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限
制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0026]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值，以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种模拟移动色谱纯化槐耳小分子活性物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对槐耳进行浸提，得到槐耳小分子活性物质提取液；(2)利用模拟移动色谱对所述槐耳小分子活性物质提取液进行纯化，得到纯化液；(3)所述纯化液浓缩后干燥，即得精制槐耳小分子活性物质；在步骤(2)中，所述模拟移动色谱由20根色谱柱组成，通过旋转阀控制进料和出料；所述20根色谱柱，分为吸附区、除杂区、洗脱区和再生区四个区域，四个区域的色谱柱数量分别为10根、3根、4根、3根，各区之间均采用串联的连接方式，均具有进料口1个，出料口1个，所述吸附区、所述除杂区、所述洗脱区和所述再生区的进料口为该区域的第一根色谱柱；纯化时，各区同时工作，当运行时间到达切换时间后，每根色谱柱顺时针移动一个柱位。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述切换时间为600
‑
1200s。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述模拟移动色谱的色谱柱的固定相为大孔树脂H
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60、XDA
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1B、HPD400、D101或D101B。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述色谱柱的工作温度为2...

【专利技术属性】
技术研发人员：李朝阳，王志辉，李良玉，王元开，林欣梅，包荣鹏，曹荣安，
申请(专利权)人：黑龙江八一农垦大学牡丹江食品与生物技术创新研究院，
类型：发明
国别省市：