本发明专利技术适用于洗脱装置技术领域，提供了一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置，包括承胶模块、透析膜模块和固定模块，所述承胶模块和透析膜模块均安装于固定模块中，通过固定模块将承胶模块和透析膜模块的组装体固定在水平电泳槽内；所述承胶模块用于装载凝胶电泳分离后切取的胶块，所述承胶模块的一端插入透析膜模块中，所述承胶模块位于透析膜模块中的一端上设置有分隔胶块，用于构建承胶模块和透析膜模块之间的洗脱空间；所述透析膜模块上设置有透析膜，所述透析膜通过卡环固定于透析膜模块上，通过透析膜截取和收集待洗脱目标分子。该装置的操作简单，条件温和，且成本低廉，可以循环使用，经济性高，同时实际洗脱回收率高，适用性广。性广。性广。
【技术实现步骤摘要】
一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置及方法
[0001]本专利技术属于洗脱装置
，尤其涉及一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置及方法。
技术介绍
[0002]核酸和蛋白质的凝胶分离在分子生物学及生物
中至关重要，而凝胶分离后的抽提是对制备纯化产物、后续分析和功能化研究等的一项关键技术环节，制备的规模和效率直接影响到研发的进展，也是科研工作者经常涉及和关注的问题。从凝胶中回收目标分子的方法大致分为扩散、溶解胶和电洗脱三种。
[0003]目前，核酸和蛋白质凝胶回收试剂盒已经国产化。核酸试剂盒从琼脂糖凝胶中回收DNA时，需要使用化学试剂将胶溶解，借助滤膜离心或者磁珠回收。另外，市面上的某些核酸试剂盒可能对单链DNA不具备回收能力。从聚丙烯酰胺PAGE凝胶中回收蛋白质或者DNA时，需要采用剧烈的条件进行胶溶解，会破坏目标物，或者将胶碾碎，利用扩散回收到溶液中，效率通常不高。目前市场上相关的试剂盒，根据产品的质量，价格不均(3～30元/次)，实验重复性和抽提效率得不到保证，而且试剂污染环境，对操作人员不友好。
[0004]除了溶解胶和扩散方法，还有电洗脱回收方法，原理基本一致，均是在凝胶两端施加一定电压，在电场力的作用下，将带有(负)电荷的核酸/蛋白质洗脱到缓冲液中。目前国内市场上的电洗脱装置主要包括G
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Capsule(Geno Technology、Model 422Electro
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Eluter(BioRad)、D
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tube(Merck)、E
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Gel(Thermo Fisher)。
[0005]目前电洗脱装置虽然有国产化的个别设计专利，但是相对复杂，应用和市场仍然是空白，在特殊需要的时候，仍然需要通过代理从国外购买，程序复杂冗长，价格较高(约200元/次～约4万元/套)，装置经济性低，而且实际使用中，操作繁琐，承胶量或者洗脱规模非常受限。
技术实现思路
[0006]本专利技术实施例的目的在于提供一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置及方法，旨在解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0007]本专利技术实施例是这样实现的，一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置，包括承胶模块、透析膜模块和固定模块，所述承胶模块和透析膜模块均安装于固定模块中，通过固定模块将承胶模块和透析膜模块的组装体固定在水平电泳槽内；
[0008]所述承胶模块用于装载凝胶电泳分离后切取的胶块，所述承胶模块的一端插入透析膜模块中，所述承胶模块位于透析膜模块中的一端上设置有分隔胶块，用于构建承胶模块和透析膜模块之间的洗脱空间；
[0009]所述透析膜模块上设置有透析膜，所述透析膜通过卡环固定于透析膜模块上，通过透析膜截取和收集待洗脱目标分子。
[0010]进一步的技术方案，所述承胶模块、透析膜模块和固定模块的材质均为聚丙烯PP
材料。
[0011]进一步的技术方案，所述承胶模块、透析膜模块和固定模块均采用3D打印成型或注塑的方式进行制造。
[0012]本专利技术实施例的另一目的在于，一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱方法，包括以下步骤：
[0013]步骤1、组装透析膜模块：将透析膜在二次水中煮沸10分钟后，自然冷却到室温，修剪合适的大小，借助回形圆柱固定并用卡环固定于透析膜模块上(回形圆柱可以选择性使用)；
[0014]步骤2、制备凝胶分离核酸/蛋白质的同时，将承胶模块的顶端卡入固定模块上端的回型槽内，加入200
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500微升胶溶液，制备分隔凝胶，以用于分隔承胶模块和透析膜模块，构建洗脱空间；
[0015]步骤3、组装承胶模块和透析膜模块，其相对位置可以调节，以控制洗脱液体积(建议300微升左右)，从透析膜模块的回型口加入洗脱液后，进一步调节、缩小两模块之间的洗脱液空间，尽量减少其中未被洗脱液占据的空间；
[0016]步骤4、将承胶模块和透析膜模块的组装体通过固定模块固定在水平电泳槽内，加入缓冲液，液面至承胶模块内部设置的回型通道的上端，利用核酸/蛋白质的电负性，施加电压进行电泳，洗脱目标至洗脱液空间；
[0017]步骤5、洗脱完成后，将电洗脱装置从电泳槽中取出，将承胶模块和透析膜模块小心拆开，用移液枪将洗脱液小心吹打透析膜后，收集洗脱液。
[0018]进一步的技术方案，所述方法还包括：步骤6、回收的DNA进行沉淀浓缩，或将洗脱液透析后进行冻干。
[0019]本专利技术实施例提供的一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置，其有益效果如下：
[0020](1)操作简单，条件温和，不需要使用任何化学试剂，环境友好；
[0021](2)与水平电泳槽兼容，不需要单独的电源装置，适用性广；
[0022](3)实际洗脱回收率高，对201、486、1485bp双链DNA和486nt单链DNA回收率均高于90％，性能优越，优于SanPrep试剂盒和G
‑
Capsule电洗脱装置，对5、15、25微克的牛血清白蛋白BSA的平均回收效率也高于90％；
[0023](4)成本低廉，可以循环使用，经济性高，便于推广。
附图说明
[0024]图1为本专利技术实施例提供的一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置的结构示意图；
[0025]图2为本专利技术实施例提供的一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置中的固定模块的结构示意图；
[0026]图3为本专利技术实施例提供的一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置中的承胶模块的结构示意图；
[0027]图4为本专利技术实施例提供的一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置中的透析膜模块的结构示意图；
[0028]图5为本专利技术实施例提供的一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置中的卡环的结构示意图；
[0029]图6为本专利技术实施例提供的一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置中的回形圆柱的结构示意图；
[0030]图7为双链DNA电洗脱效果凝胶表征图(2％琼脂糖凝胶)；
[0031]图8为BSA蛋白质洗脱效果凝胶表征图(6％变性PAGE胶)；
[0032]图9为CDR1as
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201、CDR1as
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486、CDR1as dsDNA的BSA回收效率图；
[0033]图10为5、15、25微克牛血清白蛋白的BSA回收效率图；
[0034]图11为2％琼脂糖凝胶电泳速度参考图；
[0035]图12为6％变性聚丙烯酰胺PAGE凝胶电泳速度参考图；
[0036]图13为本专利技术实施例提供的一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置中的循环使用性图。
[0037]附图中：承胶模块1；分隔胶块11；透析膜模块2；卡环21；透析膜22；回形圆柱23；固定模块3。
具体实施方式
[0038]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置，其特征在于，包括承胶模块、透析膜模块和固定模块，所述承胶模块和透析膜模块均安装于固定模块中，通过固定模块将承胶模块和透析膜模块的组装体固定在水平电泳槽内；所述承胶模块用于装载凝胶电泳分离后切取的胶块，所述承胶模块的一端插入透析膜模块中，所述承胶模块位于透析膜模块中的一端上设置有分隔胶块，用于构建承胶模块和透析膜模块之间的洗脱空间；所述透析膜模块上设置有透析膜，所述透析膜通过卡环固定于透析膜模块上。2.根据权利要求1所述的低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置，其特征在于，所述承胶模块、透析膜模块和固定模块的材质均为聚丙烯PP材料。3.根据权利要求2所述的低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置，其特征在于，所述承胶模块、透析膜模块和固定模块均采用3D打印成型或注塑的方式进行制造。4.一种如权利要求1
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3任一项所述的低成本的核酸/蛋白质电洗脱装置的电洗脱方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、组装透析膜模块：将透析膜在二次水中煮沸10分钟后，自然冷却到室温，...
【专利技术属性】
技术研发人员：李海龙，苏琳涵，蔺新丽，龚雪婷，周菊，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：
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