裂殖壶菌产EPA合成途径的鉴定方法技术

本发明专利技术公开了一种裂殖壶菌产EPA合成途径的鉴定方法，其是将裂殖壶菌种子液接种至发酵培养基中，摇床培养24h后添加碘乙酰胺，继续培养，分析添加碘乙酰胺的发酵液与未添加碘乙酰胺的发酵液中饱和脂肪酸、EPA和DHA+DPA的含量变化。本发明专利技术通过添加特异性地抑制PKS合成途径的外源抑制剂碘乙酰胺，实现了准确鉴定裂殖壶菌产EPA的具体合成途径，为裂殖壶菌EPA合成的基因改造策略提供参考。的基因改造策略提供参考。的基因改造策略提供参考。

【技术实现步骤摘要】
裂殖壶菌产EPA合成途径的鉴定方法


[0001]本专利技术属于酶工程
，具体地说，本专利技术涉及一种鉴定裂殖壶菌产EPA合成途径的方法。

技术介绍

[0002]二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid，EPA)因具有预防心血管疾病、动脉硬化及改善糖代谢紊乱等生理功能，被广泛应用于食品、医疗、饲料添加等领域。目前，以海洋中鱼类、贝类为原料生产多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids，PUFAs)的自然资源途径已逐渐匮乏，而EPA的需求日益增加，利用改造的微生物菌种发酵生产EPA的方式成为主要趋势。裂殖壶菌(Schizochytrium)属于破囊壶藻科中的海洋异养微生物，胞内含EPA、DPA、DHA等PUFAs，因其胞内油脂和PUFAs含量高，特别是DHA含量高达30～70％，受到人们广泛关注，并已被用于DHA的工业化生产。
[0003]在裂殖壶菌中主要存在两种合成PUFAs途径，第一种是聚酮合酶途径(Polyketide Synthases,PKS)，也是厌氧途径。PUFAs的合成从乙酰本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.碘乙酰胺作为抑制剂在鉴定裂殖壶菌产EPA合成途径中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述碘乙酰胺的浓度为0.5mmol/L～4mmol/L。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述碘乙酰胺的浓度为1mmol/L～4mmol/L。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述碘乙酰胺的浓度为2mmol/L～4mmol/L。5.一种裂殖壶菌产EPA合成途径的鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：将裂殖壶菌种子液接种至发酵培养基中，摇床培养24h后添加碘乙酰胺，继续培养，分析添加碘乙酰胺的发酵液与未添加碘乙酰胺的发酵液中饱和脂肪酸、EPA和DHA+DPA的含量变化。6.根据权利要求5所述的裂殖壶菌产EPA合成途径的鉴定方法，其特征在于，所述碘乙酰胺在发酵培养基中的浓度为0.5mmol/L～4mmol/L。7.根据权利要求5所述的裂殖...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙浩鑫，王永华，蓝东明，杨博，高文宏，张萌，
申请(专利权)人：广东优酶生物制造研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：