一种抗LILRB4单克隆抗体电荷异质性的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种抗LILRB4单克隆抗体电荷异质性的检测方法，包括：检测样品配制成混合溶液；设置高效液相色谱仪的检测条件，进行分离并获得色谱图；基于色谱图，确定检测样品中电荷异质体的百分含量。本发明专利技术提供的抗LILRB4单克隆抗体有效抑制LILRB4抗原与其配体复合物的结合，阻断其与配体ApoE复合物的相互作用，进而阻止下游NF

【技术实现步骤摘要】
一种抗LILRB4单克隆抗体电荷异质性的检测方法


[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别涉及一种抗LILRB4单克隆抗体电荷异质性的检测方法。

技术介绍

[0002]髓系细胞(myeloid cells)含量丰富且通常是免疫抑制性的重要来源，白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B蛋白(LILRBs)是一组I型跨膜糖蛋白，由于其免疫抑制功能，LILRBs被认为是髓系细胞的免疫检查点蛋白。LILRB4主要表达于单核细胞和单核急性髓性白血病细胞，且单核急性髓性白血病细胞表达水平更高。将LILRB4阳性(B4+)或阴性(B4
‑
)的肿瘤细胞与病人T细胞或健康人T细胞共培养，发现LILRB4阳性细胞可抑制T细胞增殖。之后研究人员将肿瘤细胞上的LILRB4敲除，结果发现肿瘤细胞无法抑制T细胞增殖。当加入LILRB4抗体后，通过抗体阻断LILRB4靶点，发现能够增强T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用，可减少白血病细胞向骨髓、肝脏以及脑渗透，减缓人源化小鼠体重的下降，并延长其寿命。
[0003]总的来说，LILRB4主要是改变了免疫抑制的微本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗LILRB4单克隆抗体电荷异质性的检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤一：将检测样品用第一流动相稀释配制成混合溶液，所述检测样品为抗LILRB4单克隆抗体；步骤二：通过设置高效液相色谱仪的检测条件，并对所述混合溶液进行分离并获得色谱图；步骤三：基于所述色谱图，进行归一化分析后确定所述检测样品中电荷异质体的百分含量；其中，所述抗LILRB4单克隆抗体包括：氨基酸序列如SEQ ID No:1所示的重链互补决定区HCDR1、氨基酸序列如SEQ ID No:2所示的重链互补决定区HCDR2、氨基酸序列如SEQ ID No:3所示的重链互补决定区HCDR3、氨基酸序列如SEQ ID No:4所示的轻链互补决定区LCDR1、氨基酸序列如SEQ ID No:5所示的轻链互补决定区LCDR2、氨基酸序列如SEQ ID No:6所示的轻链互补决定区LCDR3。2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述抗LILRB4单克隆抗体为鼠源抗体分子，所述鼠源抗体分子包括氨基酸序列如SEQ IDNo:7所示的重链可变区和氨基酸序列如SEQ ID No:8所示的轻链可变区。3.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述鼠源抗体分子还包括重链恒定区和轻链恒定区，所述重链恒定区选自鼠的IgG1型、IgG2a型、IgG2b型或IgG3型的恒定区的一种，所述轻链恒定区为氨基酸序列如SEQ ID No:15所示的鼠源C
k
型的恒定区；所述IgG1型的恒定区的氨基酸序列如SEQ ID No:11所示，所述IgG2a型的恒定区的氨基酸序列如SEQ ID No:12所示，所述IgG2b型的恒定区的氨基酸序列如SEQ ID No:13所示，所述IgG3型的恒定区的氨基酸序列如SEQ IDNo:14所示。4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述抗LILRB4单克隆抗体为人源化抗体分子，所述人源化抗体分子选自以下任意一种：HA
‑Ⅰ
：氨基酸序列如SEQ ID No:20所示的重链可变区和氨基酸序列如SEQ ID No:21所示的轻链可变区；HA
‑Ⅱ
：氨基酸序列如SEQ ID No:22所示的重链可变区和氨基酸序列如SEQ ID No:23所示的轻链可变区；H...

【专利技术属性】
技术研发人员：白义，
申请(专利权)人：北京东方百泰生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：