一种外泌体分离纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种外泌体分离纯化方法，包括以下步骤：将CD36适配体修饰到磁珠表面，得到CD63适配体磁珠；将细胞上清液与CD63适配体磁珠混合反应，通过CD63适配体磁珠捕获外泌体，得到CD63适配体磁珠

【技术实现步骤摘要】
一种外泌体分离纯化方法


[0001]本专利技术属于外泌体分离提取
，涉及一种外泌体分离纯化方法。

技术介绍

[0002]外泌体最早于1983年被发现，是一种尺寸在30
‑
150nm之间的几乎所有哺乳动物细胞都能分泌的囊泡。它具有脂质双分子层膜结构，呈典型的杯状形态。通常包含蛋白质、脂质、mRNA、microRNA等功能分子，广泛存在于各种体液中，如血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁等。外泌体参与细胞间物质交换和信息传递，调节免疫反应、肿瘤侵袭、细胞增殖等生物学行为，具备成为相关疾病诊断可靠生物标志物和疾病治疗药物载体的天然优势和巨大潜力。但是，受限于外泌体所处体液环境的成分复杂性和外泌体自身的纳米级尺寸尺寸，从各种体液中分离获取高纯度和功能结构完整性的外泌体仍具有很大挑战性。
[0003]目前，常用的外泌体分离提纯方法有超速离心法(UC)、免疫亲和法、聚合物沉淀法、纳米膜过滤法、尺寸排阻色谱法等。其中超速离心法(UC)是外泌体分离提纯的黄金标准，但是该方法耗时长、产量低，依赖于昂贵的精密仪器设备，同时多次的超速浓缩可本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种外泌体分离纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：将CD36适配体修饰到磁珠表面，得到CD63适配体磁珠；S2：将细胞上清液样本与CD63适配体磁珠混合反应，通过CD63适配体磁珠捕获外泌体，得到CD63适配体磁珠
‑
外泌体吸附物；S3：对CD63适配体磁珠
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外泌体吸附物进行固液分离，得到磁珠吸附物；S4：对得到的磁珠吸附物进行洗涤，得到提纯后的外泌体。2.根据权利要求1所述的一种外泌体分离纯化方法，其特征在于，所述步骤S1包括在磁珠的表面依次修饰有Strep
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tagII、Strep
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Tactin和CD63适配体。3.根据权利要求1所述的一种外泌体分离纯化方法，其特征在于，所述步骤S2中，预处理后的细胞培养上清液样本的体积与CD63适配体磁珠的用量比为(90
‑
110)μl：0.1mg。4.根据权利要求1所述的一种外泌体分离纯化方法，其特征在于，所述步骤S2中，细胞上清液样本与CD63适配体磁珠在室温下振荡孵育25
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30分钟。5.根据权利要求1所述的一种外泌体分离纯化方法，其特征在于，所述步骤S3中，首先对CD63适配体磁珠
‑
外泌体吸附物进行洗涤，然后利用脱氧核糖核酸酶溶液或生物素溶液对磁珠
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【专利技术属性】
技术研发人员：彭年才，雍张，郭晓牛，胡飞，赵书豪，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：