在重组产生的RSV蛋白质的纯化方法中对阴离子交换色谱法所用洗涤溶液的改进技术

本发明专利技术涉及RSV蛋白质的纯化方法，其中将包含RSV蛋白质的负载溶液与阴离子交换色谱法介质接触，由此RSV蛋白质结合至阴离子交换色谱法介质，用至少一种洗涤溶液洗涤阴离子交换色谱法介质和从阴离子交换色谱法介质洗脱RSV蛋白质。根据本发明专利技术，洗涤溶液具有3.0至6.5的pH，由此宿主细胞蛋白质的移除被增强。本发明专利技术也涉及药物产品，其包括通过上述方法纯化的RSV蛋白质。RSV蛋白质。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】在重组产生的RSV蛋白质的纯化方法中对阴离子交换色谱法所用洗涤溶液的改进
[0001]关于序列表
[0002]本申请经由EFS
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Web电子提交并且包括电子提交的.txt格式序列表。该.txt文件含有题为"PC072530A_SeqListing_ST25.txt"的序列表，其创建于2021年7月1日并且具有1.24MB的大小。该.txt文件中包含的序列表是说明书的一部分并且通过援引将其全部并入本文。


[0003]本专利技术涉及制备呼吸道合胞病毒(RSV)疫苗的方法。更特别地，本专利技术涉及重组产生的RSV蛋白质的纯化方法，包括阴离子交换色谱法步骤。
[0004]专利技术背景
[0005]在遗传工程改造的宿主细胞中产生、从生物反应器收获、然后在设计用来为终产品赋予高度纯度的受控多步方法中纯化重组蛋白质，比如用于治疗或预防性意图的那些。
[0006]主要挑战之一是降低杂质尤其是残余的宿主细胞蛋白质(HCPs)，其是通过用于制备治疗性蛋白质的宿主细胞表达的蛋白质。
[0007]虽然从法规的立场来说可本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.重组产生的RSV蛋白质的纯化方法，包括阴离子交换色谱法步骤，其中a)将从收获的细胞培养液获得且包含RSV蛋白质的负载溶液与阴离子交换色谱法介质接触，由此RSV蛋白质结合至阴离子交换色谱法介质；b)用至少一种pH为3.0至6.5的低pH洗涤溶液洗涤阴离子交换色谱法介质，由此宿主细胞蛋白质的移除被增强；和c)从阴离子交换色谱法介质洗脱RSV蛋白质。2.根据权利要求1的方法，其中负载溶液的pH是7.0至8.5，优选约7.5。3.根据权利要求1或2的方法，其中所述低pH洗涤溶液的pH是4.0至6.0，优选4.5至5.5，优选约5.0。4.根据权利要求1至3中任一项的方法，其中所述低pH洗涤溶液包含乙酸盐。5.根据权利要求4的方法，其中在所述低pH洗涤溶液中乙酸盐的浓度是56至84mM，优选63至77mM，优选约70mM。6.根据权利要求1至5中任一项的方法，其中在洗脱RSV蛋白质之前，用至少一种pH为7.0至8.0、优选约7.5的第一高pH洗涤溶液进一步洗涤阴离子交换色谱法介质。7.根据权利要求6的方法，其中所述第一高pH洗涤溶液包含浓度为18至22mM、优选约20mM的Tris。8.根据权利要求6或7的方法，其中所述第一高pH洗涤溶液包含浓度为45至55mM、优选约50mM的NaCl。9.根据权利要求6至8中任一项的方法，其中使用所述第一高pH洗涤溶液的洗涤步骤在使用所述低pH洗涤溶液的洗涤步骤之前进行。10.根据权利要求6至9中任一项的方法，其中在洗脱RSV蛋白质之前，用至少一种pH为7.0至8.0、优选约7.5的第二高pH洗涤溶液进一步洗涤阴离子交换色谱法介质。11.根据权利要求10的方法，其中所述第二高pH洗涤溶液包含浓度为45至55mM、优选约50mM的Tris。12.根据权利要求10或11的方法，其中所述第二高pH洗涤溶液包含浓度为18至22mM、优选约20mM的NaCl。13.根据权利要求10至12中任一项的方法，其中使用所述第二高pH洗涤溶液的洗涤步骤在使用所述低pH洗涤溶液的洗涤步骤之后进行。14.根据权利要求1至13中任一项的方法，其中用具有7.0至8.0、优选约7.5的pH的洗脱溶液洗脱RSV蛋白质。15.根据权利要求14的方法，其中所述洗脱溶液包含浓度为146至180mM、优选约163mM的NaCl。16.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：J，
申请(专利权)人：辉瑞大药厂，
类型：发明
国别省市：