一种基于CRISPR/cas12a的B族链球菌快速检测体系及方法技术

本发明专利技术提供了一种基于CRISPR/cas12a的B族链球菌快速检测体系及方法。具体地，本发明专利技术提供了一种用于检测GBS核酸分子的检测体系、试剂盒、胶体金检测试剂以及检测方法。由此极大地缩短了GBS的检测时间，避免了由于GBS感染的短暂性和间歇性而带来的漏诊，且本发明专利技术建立的经济便携式的即时检测方法对缺乏医疗设备的基层及偏远地区或是发展中国家GBS的检测具有重要意义，简易的操作使得GBS的家庭自检成为可能。为可能。

【技术实现步骤摘要】
一种基于CRISPR/cas12a的B族链球菌快速检测体系及方法


[0001]本专利技术涉及生物
，更具体涉及一种基于CRISPR/cas12a的B族链球菌快速检测体系及方法。

技术介绍

[0002]感染性疾病因为其高发病率和高死亡率，严重威胁人类生命健康。尤其是传染性强、突变率高的病原体易形成大流行，是对全球公共卫生系统的巨大考验。对感染性疾病进行早期快速准确的诊断是降低其病死率，改善预后，限制传播的关键性举措，也是检验医学研究的重要内容。核酸检测是感染性疾病诊断的重点，与抗原、抗体检测相比，具有更高的灵敏度和特异性，对于早期诊断最为准确可靠。
[0003]B族链球菌(group B streptococcus,GBS)，即无乳链球菌，为革兰氏阳性、触酶阴性的兼性厌氧菌，呈直径小于2μm的球形或卵圆形。60％的女性会间歇性感染GBS且不表征出任何临床症状，感染者中的40％～70％在分娩过程中会传递给新生儿，大约有1％～3％的新生儿会发生早发型(GBS early
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onset disease,GBS
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测GBS核酸分子的检测体系，其特征在于，所述检测体系包含：(a)Cas12a蛋白；(b)向导RNA，所述向导RNA引导Cas12a蛋白特异性结合于GBS核酸分子；和(c)核酸探针，所述核酸探针为单链DNA；其中，所述的GBS核酸分子为DNA分子。2.如权利要求1所述的检测体系，其特征在于，所述检测体系还含有：(e1)用于扩增GBS核酸分子的聚合酶；(e2)任选的用于反转录的反转录酶；(e3)用于扩增反应和/或反转录反应的dNTP。3.如权利要求1所述的检测体系，其特征在于，所述的向导RNA的长度为30
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50nt，较佳地35
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45nt，更佳地41nt。4.如权利要求1所述的检测体系，其特征在于，所述的向导RNA具有选自下组的序列：如SEQ ID NO:7所示的序列、如SEQ ID NO:8所示的序列，或其组合。5.如权利要求1所述的检测体系，其特征在于，所述的单链DNA为在5'端标记荧光基团FAM并在3'端标记淬灭基团BHQ1后的荧光探针。6.如权利要求1所述的检测体系，其特征在于，所述的核酸探针为在5'端标记FAM并在3'端标记Biotin后的分子探针。7.一种用于检测GBS核酸分子的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：i)第一容器以及位于第一容器内的Cas12a蛋白；ii)任选的第二容器以及位于第二容器内的向导RNA，所述向导RNA引导所述Cas12a蛋白特异性结合于GBS核酸分子；iii)第三容器以及位于第三容器内的核酸探针；iv)任选的第四容器以及位于第四容器内的缓冲液；其中，所述的GBS核酸分子为DNA分子。8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还含有用于LAMP反应的试剂，其中所述的用于LAMP反应的试剂包括LAMP引物，并且所述LAMP引物具有选自下组的序列：如SEQ ...

【专利技术属性】
技术研发人员：张传领，蒋国军，徐洁颖，陈云，应晓波，
申请(专利权)人：浙江萧山医院，
类型：发明
国别省市：