用于增强PKLR的基因表达的组合物和方法技术

本公开提供了用于在哺乳动物细胞中表达基因以便为丙酮酸激酶缺乏症提供基因疗法的多核苷酸盒、表达载体和方法。表达载体和方法。表达载体和方法。

【技术实现步骤摘要】
用于增强PKLR的基因表达的组合物和方法
[0001]本申请是申请日为2017年4月20日、专利技术名称为“用于增强PKLR的基因表达的组合物和方法”的中国专利技术专利申请No.201780037995.0的分案申请。
[0002]相关申请的交叉引用
[0003]本申请要求2016年4月20日提交的美国临时申请号62/325,397的优先权，该临时申请通过引用整体并入本文。
专利

[0004]本专利技术涉及丙酮酸激酶缺乏症的基因疗法。
[0005]专利技术背景
[0006]丙酮酸激酶缺乏症(PKD)是由PKLR基因突变引起的单基因代谢疾病，其导致可变症状的溶血性贫血，并且在新生儿期可能是致命的。PKD隐性遗传性状及其通过同种异体骨髓移植的治愈性治疗为开发基因治疗方法提供了理想的方案。
[0007]在影响红细胞的许多其他遗传性酶缺乏中，丙酮酸激酶缺乏症(PKD)是引起慢性非球形红细胞性溶血性贫血(chronic nonspherocytic hemolytic anemia，CNSHA)的最常见因素(Zanella等本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种包含多核苷酸序列的表达盒，所述多核苷酸以5'至3'顺序包含以下序列：a)启动子序列；b)编码基因产物的序列；和c)核糖核酸(RNA)输出信号，其中所述启动子序列与编码丙酮酸激酶多肽的序列可操作地连接。2.权利要求1的表达盒，其中所述启动子是磷酸甘油酸激酶(PGK)启动子。3.权利要求1或2的表达盒，其中所述基因产物是治疗性基因产物。4.权利要求3的表达盒，其中所述治疗性基因产物是丙酮酸激酶(PK)多肽，任选地丙酮酸激酶肝和红细胞(PKLR)多肽。5.权利要求1
‑
4中任一项的表达盒，其中所述编码基因产物的序列是密码子优化的。6.权利要求1
‑
5中任一项的表达盒，其中所述RNA输出信号是土拨鼠肝炎病毒的突变的转录后调控元件(Wpre)。7.权利要求6的表达盒，其中所述突变的Wpre是嵌合的Wpre，其包含与SEQ ID NO:1具有至少80％同一性的序列。8.权利要求1
‑
7中任一项的表达盒，其还包含一种或多种增强子序列。9.权利要求1
‑
8中任一项的表达盒，其还包含多嘌呤区(PPT)或多腺苷酸化(polyA)信号序列。10.权利要求1
‑
9中任一项的表达盒，其还包含以下序列中的一种或多种：i)包装信号序列；ii)截短的Gag序列；iii)Rev响应元件(RRE)；iv)中心多嘌呤区(cPPT)；v)中心末端序列(CTS)；和vi)上游序列元件(USE)，任选地来自猿猴病毒40(SV40
‑
USE)。11.权利要求1
‑
10中任一项的表达盒，其还包含5'和3'长末端重复序列。12.一种重组基因递送载体，其包含权利要求1
‑
11中任一项的表达盒。1...

【专利技术属性】
技术研发人员：J，
申请(专利权)人：希门尼斯，
类型：发明
国别省市：