一种重组腺相关病毒载体及其应用制造技术

本发明专利技术属于分子生物技术领域，公开了一种重组腺相关病毒载体及其应用。该重组腺相关病毒载体，包含腺相关病毒衣壳和非自身互补的单链基因组；所述单链基因组包含EF1α启动子和编码运动神经元存活蛋白的基因；本发明专利技术通过采用EF1α启动子，调控SMN1基因表达，在SMA患者发育成型后不在保持SMN基因的持续性高表达，避免出现由于SMN持续性过表达引起的运动神经元延迟性退行性病变，使得本发明专利技术提供的重组腺相关病毒载体治疗SMA的效果显著优于包含其他启动子的重组腺相关病毒载体：延长小鼠生存时间、增加小鼠体重、改善运动神经元与骨骼肌相关的组织发育，可用于预防、减轻或治疗神经系统疾病。统疾病。

【技术实现步骤摘要】
一种重组腺相关病毒载体及其应用


[0001]本专利技术属于分子生物
，具体涉及一种重组腺相关病毒载体及其应用。

技术介绍

[0002]腺相关病毒(AAV)是细小病毒科的一种。AAV基因组由一个长度约为4.7kb的线性单链DNA分子组成，具有两个主要的开放阅读框，编码非结构复制和结构帽(衣壳)蛋白。AAV编码区两侧是两个顺式作用的反向末端重复序列(ITR)，长度约为145个核苷酸，在DNA复制起始阶段起引物的作用。ITR序列除了在DNA复制中发挥作用外，还被证明在病毒整合、将病毒核酸包封到成熟的病毒粒子中等过程中起作用。引导病毒DNA复制(rep)、包封/包装和宿主细胞染色体整合的顺式作用序列包含在ITR中。cap基因从p40启动子中表达，编码三种衣壳蛋白VP1、VP2和VP3。衣壳蛋白由cap基因编码，根据cap基因的不同，AAV具有多种血清型，并提供不同的组织倾向性。AAV有多种血清型，包括:AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10和AAV11等。其中AAV9及其突变体AAVP本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组腺相关病毒载体，包含腺相关病毒衣壳和非自身互补的单链基因组；所述单链基因组包含EF1α启动子和编码运动神经元存活蛋白的基因。2.根据权利要求1所述的重组腺相关病毒载体，其特征在于：所述EF1α启动子为(a1)～(a3)中任一种：(a1)具有如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的启动子；(a2)SEQ ID NO.1所示核苷酸序列经过一个或多个碱基的取代、缺失或添加后仍具有EF1α启动子功能的核苷酸序列所示的启动子；(a3)与SEQ ID NO.1所示核苷酸序列具有80％、85％、90％、95％、98％或99％以上同源性且具有EF1α启动子功能的核苷酸序列所示的启动子。3.根据权利要求1所述的重组腺相关病毒载体，其特征在于：所述运动神经元存活蛋白为(b1)～(b3)中任一种：(b1)具有如SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的蛋白；(b2)SEQ ID NO.2所示氨基酸序列经过一个或多个氨基酸的取代、缺失或添加后仍具有运动神经元存活蛋白功能的氨基酸序列所示的蛋白；(b3)与SEQ ID NO.2所示氨基酸序列具有80％、85％、90％、95％、98％或99％以上同源性且具有运动神经元存活蛋白功能的氨基酸序列所示的蛋白；优选地，所述编码运动神经元存活蛋白的基因为人SMN1基因。4.根据权利要求1～3中任一项所述的重组腺相关病毒载体，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：高堂鑫，陈小祝，孔嘉宝，蔡育宜，林圣智，
申请(专利权)人：蓝图生物医药广州有限公司，
类型：发明
国别省市：