一种化橘红提取物及其提取方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种化橘红提取物的提取方法。所述提取方法包括如下步骤：取化橘红的乙醇

【技术实现步骤摘要】
一种化橘红提取物及其提取方法和应用


[0001]本专利技术属于中药活性成分提取
更具体地，涉及一种化橘红提取物及其提取方法和应用。

技术介绍

[0002]肺癌是全球发病率第二、致死率最高、预后差的肿瘤类型，全球肺癌新发病例的估计值为220.7万，死亡病例的估计值为179.6万，而非小细胞肺癌(Non
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Small Cell Lung Cancer,NSCLC)是肺癌中临床最常见的一种组织学亚型。目前NSCLC的治疗方案有外科手术、放疗、化疗、靶向治疗、免疫治疗及其组合疗法等，使NSCLC的管理进入个性化时代，但NSCLC的年新发病例仍在百万级别、五年相对生存率仅为26％，同时治疗成本高昂、药物毒性较大、易产生耐药性、耐受性，影响生活质量而使NSCLC患者总体生存获益不高，因此NSCLC成为危害人类健康和社会经济的公共卫生问题。研发高效低毒、不易产生耐药性的抗肺癌药物来干预肺癌进展仍然是当前国内外新药研究的一个热点与急迫需要。
[0003]据统计，获批上市的抗肿瘤药物中有63％来源于天然产物，中药及传统天然药物是抗肿瘤新药来源的一个宝库。中医药理论对肿瘤的认识中，肿瘤多为痰阻、气滞、血瘀、热毒等相互搏结而成，部分肺癌症状属于“痰证”范畴，肺癌的治疗可以选择从“痰”论治，中医药理论为源于中药的抗肿瘤新药研发提供了理论指导，缩小抗肿瘤中药的品种筛选范围。
[0004]化橘红(Exocarpium Citri grandis)归肺、脾经，具有理气宽中，燥湿化痰功效，主治咳嗽痰多，食积伤酒，呕恶痞闷等症状，临床上多应用于止咳化痰方面。中药资源方面，《广东省岭南中药材保护条例》将化橘红列为首个岭南八大中药材保护对象，加强了中药资源保护力度，化橘红按商品规格可分为毛橘红和光橘红，对应的基原植物分别为芸香科柑橘属化州柚Citrus grandis Tomentosa和柚C.grandis(L.)Osbeck，入药部位均为未成熟或近成熟的干燥外层果皮，其中化州柚为柚的变种之一，仅栽培种植于中国广东省化州市，由于两种植物属于变种与种的关系，毛橘红和光橘红的化学成分类似，但在临床应用上，毛橘红的止咳化痰功效优于光橘红，具有道地性特征。中国专利CN10730554A公开了一种化橘红提取物及其在制备治疗APEI介导的疾病的药物中的应用，化橘红提取物包括如下重量百分比的有效成分：川陈皮素20～30％；槲皮素10～20％；柚皮甙30～40％，所述化橘红提取物可抑制A549细胞系APE1蛋白表达并对A549细胞系产生细胞毒作用，具有作为APE1抑制剂使用的前景。但是现有的化橘红止咳化痰的功效物质基础为以柚皮苷为主要成分的黄酮类，且为多类提取物组合，其作用机制与抑制快速适应性肺部牵张感受器(RARs)放电等途径有关，目前化橘红黄酮类、化橘红柚皮苷分别被开发成中药五类新药、化学一类新药进入临床试验阶段，但是现有关于化橘红提取物可用于抗肿瘤的报道仍较少，且提取物内不同有效成分的含量不同，其抗肿瘤效果也具有较大差距。

技术实现思路

[0005]针对上述现有的技术问题，本专利技术的首要目的在于提供一种新的化橘红提取物的
提取方法，通过优化所述提取方法，提取获得的化橘红提取物以酸橙素烯醇为有效活性成分，不仅对于肿瘤细胞具有细胞毒活性，能够有效地抑制肿瘤细胞的克隆形成能力和横向迁移能力，还可减缓移植瘤的荷瘤生长、降低荷瘤体积以及荷瘤瘤重，起到了优异的抗肿瘤作用。
[0006]本专利技术的第二个目的在于提供一种上述提取方法提取获得的化橘红提取物。
[0007]本专利技术的第三个目的在于提供上述化橘红提取物或酸橙素烯醇在制备预防和/或治疗肿瘤药物中的应用。
[0008]本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
[0009]一种化橘红提取物的提取方法，包括如下步骤：取化橘红的乙醇
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乙酸乙酯提取液，采用乙酸乙酯进行萃取，减压浓缩后，得化橘红乙酸乙酯萃取部位；再将化橘红乙酸乙酯萃取部位依次采用不同配比的石油醚
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乙酸乙酯混合溶液进行梯度洗脱分离，收集目标洗脱液组分，再采用硅胶薄层色谱进行分离，获得所述化橘红提取物；所述石油醚和乙酸乙酯的体积比为(10～0)：(0～10)；所述目标洗脱液组分为石油醚和乙酸乙酯的体积比为(2.5～3)：1时的洗脱液组分。
[0010]本专利技术通过采用不同配比的石油醚
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乙酸乙酯混合溶液进行梯度洗脱分离，梯度洗脱优选分离出了具有特定组分的目标洗脱液组分，即本专利技术中含有有效活性成分酸橙素烯醇的化橘红提取物，所述化橘红提取物的抗肿瘤药理评价研究结果表明，以酸橙素烯醇为主要成分的化橘红提取物具有抗肿瘤作用，为化橘红所有组分中细胞毒活性最强的组分。更具体而言，所述化橘红提取物对人非小细胞肺癌A549细胞系和/或H1299细胞系展现出了优异的抑制作用，对两类细胞具有优异的毒性，且能够有效地抑制两种细胞的克隆形成能力和横向迁移能力。此外，含有有效活性成分酸橙素烯醇的化橘红提取物还可减缓移植瘤的荷瘤生长、降低荷瘤体积以及荷瘤瘤重，为化橘红的抗肿瘤新用途、化痰中药治疗“痰证”范畴的肿瘤提供了实验依据。
[0011]优选地，所述化橘红的乙醇
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乙酸乙酯提取液加入乙酸乙酯进行萃取的次数为5～8次。进一步优选地，所述化橘红的乙醇
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乙酸乙酯提取液加入乙酸乙酯进行萃取的次数为7次。
[0012]优选地，所述目标洗脱液组分为石油醚和乙酸乙酯的体积比为3：1时的洗脱液组分。
[0013]优选地，依次采用石油醚和乙酸乙酯体积比为10：0，10：1，10：2，10：3，3：1，2：1，3：2，1：1，2：3，0：10的石油醚
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乙酸乙酯混合溶液进行梯度洗脱分离。
[0014]优选地，所述化橘红的乙醇
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乙酸乙酯提取液为化橘红中加入乙醇
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乙酸乙酯混合溶液，经超声提取获得；所述超声提取的次数≥4次，所述乙醇
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乙酸乙酯混合溶液的总用量为化橘红干重的8～15倍。
[0015]进一步优选地，为了更充分地提取化橘红中的有效活性成分，在化橘红中依次加入化橘红干重4、2、2、2倍用量的乙醇
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乙酸乙酯混合溶剂，超声提取4次。
[0016]优选地，所述超声提取的时间为30～60min。
[0017]优选地，所述乙醇
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乙酸乙酯混合溶剂中，乙醇和乙酸乙酯体积比为1：(1～3)；进一步优选地，乙醇和乙酸乙酯体积比为1：1。
[0018]此外，本专利技术也可以采用化州柚(Citrus grandis Tomentosa)果实通过上述提取
方法获得含有酸橙素烯醇的提取物。
[0019]进一步地，本专利技术还提供了上述提取方法提取获得的化橘红提取物。
[0020]优选地，按重量百分比计，所述化橘红提取物包含如下有效成分：65～75％的酸橙素烯醇。
[0021]进一步本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种化橘红提取物的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：取化橘红的乙醇
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乙酸乙酯提取液，采用乙酸乙酯进行萃取，减压浓缩后，得化橘红乙酸乙酯萃取部位；再将化橘红乙酸乙酯萃取部位依次采用不同配比的石油醚
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乙酸乙酯混合溶液进行梯度洗脱分离，收集目标洗脱液组分，再采用硅胶薄层色谱进行分离，获得所述化橘红提取物；所述石油醚和乙酸乙酯的体积比为(10～0)：(0～10)；所述目标洗脱液组分为石油醚和乙酸乙酯的体积比为(2.5～3)：1时的洗脱液组分。2.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，所述目标洗脱液组分为石油醚和乙酸乙酯的体积比为3：1时的洗脱液组分。3.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，所述化橘红的乙醇
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乙酸乙酯提取液为化橘红中加入乙醇
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乙酸乙酯混合溶液，经超声提取获得；所述超声提取的次数≥4次，所述乙醇

【专利技术属性】
技术研发人员：黄慧才，詹若挺，谭景波，刘永强，
申请(专利权)人：广州中医药大学广州中医药研究院，
类型：发明
国别省市：