检测刺激隐核虫的RPA引物、试剂盒以及检测方法技术

本发明专利技术涉及检测刺激隐核虫的RPA引物、试剂盒以及检测方法，属于刺激隐核虫检测技术领域。本发明专利技术要解决的技术问题是提供检测刺激隐核虫的RPA引物、试剂盒以及检测方法。本发明专利技术的快速检测刺激隐核虫的RPA引物，具有特定的核苷酸序列。以样品总DNA为模板，利用该引物对进行RPA扩增，然后用琼脂凝胶电泳检测，若能检测出232bp的电泳条带，则判断为刺激隐核虫阳性，反之为阴性。本发明专利技术方法，其最低可检出的4个刺激隐核虫幼虫总DNA。本发明专利技术所述刺激隐核虫检测的方法操作简便、所需时间短(90分钟完成检测)、检测结果准确、特异性好、稳定性强、灵敏度高，适用于刺激隐核虫的快速检测和刺激隐核虫病的早期诊断。病的早期诊断。病的早期诊断。

【技术实现步骤摘要】
检测刺激隐核虫的RPA引物、试剂盒以及检测方法


[0001]本专利技术涉及检测刺激隐核虫的RPA引物、试剂盒以及检测方法，属于刺激隐核虫检测


技术介绍

[0002]刺激隐核虫是寄生在海水硬骨鱼身上的一种纤毛虫类原生动物，可引起宿主死亡的寄生虫病——刺激隐核虫病，由于其常引起病鱼的皮肤、鳃和鳍条处产生肉眼可见的小白点，故俗称“白点病”。刺激隐核虫对宿主鱼的种类和个体大小没有明显的选择性，可以感染几乎所有海水硬骨鱼类，寄生过程中会造成鱼体机械性损伤和引起器官功能障碍，机械性损伤易诱发病鱼继发性感染细菌性疾病，寄生于鳃部可导致病鱼呼吸困难、出现狂游、严重时窒息致死。2007～2010年期间刺激隐核虫病在福建宁德沙埕港、三都湾以及福州罗源湾连续暴发，发病率在30％～100％，经济损失达3亿，最严重的是在罗源湾，近4.3万口网箱内的所有养殖品种全部感染，死亡率达80％，经济损失超过了2亿元。2014～2015年期间海南养殖石斑鱼几乎全年都能检出刺激隐核虫滋养体，2014年琼海海欧村出现刺激隐核虫病爆发导致整池塘点带石斑鱼死亡情况，2015年万宁本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测刺激隐核虫的RPA引物，其特征在于，所述RPA引物的核苷酸序列如下：正向引物FP的核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，反向引物RP的核苷酸序列为SEQ ID No.2所示。2.权利要求1所述的检测刺激隐核虫的RPA引物在制备刺激隐核虫的检测试剂盒中的应用。3.刺激隐核虫的检测试剂盒，其特征在于：包含权利要求1所述的检测刺激隐核虫的RPA引物。4.根据权利要求3所述的刺激隐核虫的检测试剂盒，其特征在于：还包括用于RPA反应的试剂。5.根据权利要求3所述的刺激隐核虫的检测试剂盒，其特征在于：用于RPA反应的试剂包括：含RPA冻干颗粒的反应管、反应缓冲液、ddH2O和醋酸镁。6.根据权利要求5所述的刺激隐核虫的检测试剂盒，其特征在于：含RPA冻干颗粒的反应管包括：噬菌体重组酶UvsX，辅助因子UvsY，DNA聚合酶，单链结合蛋白和dNTPS。7.基于RPA技术检测水体...

【专利技术属性】
技术研发人员：周永灿，郭伟良，宋玮玮，赵子晨，陈恩鹏，蒋满意，王世锋，孙云，邓恒为，张冬冬，李建龙，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：