细胞的HLA-I类MHC消融制造技术

本申请提供了降低用于移植(包括基于细胞的免疫疗法)的细胞的免疫原性的组合物和方法。编码修饰β2微球蛋白(B2M)的RNA以及靶向部分和其他信号和/或自杀基因的载体允许从任何来源高效地生产工程化的CAR T调节细胞或其他治疗细胞。他治疗细胞。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细胞的HLA
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I类MHC消融
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年4月23日提交的美国临时专利申请第63/014,344号的权益和优先权，该申请的全部内容通过引用并入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请包含具有11个序列的序列表，该序列表已通过EFS
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Web提交，并通过引用整体并入本文。该ASCII拷贝创建于2021年4月21日，名为48216WO_CRF_序列表.txt，大小为6,287字节。


[0005]本申请提供了用于在细胞中消融编码I类主要组织相容性复合蛋白的人白细胞抗原的组合物和方法。

技术介绍

[0006]包括干细胞移植和各种免疫疗法在内的基于细胞的治疗方法的出现在治疗包括癌症在内的疾病方面显示出巨大的希望。特别地，表达嵌合抗原受体的工程化T细胞(CAR
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T细胞)作为靶向性免疫治疗的新武器，因而备受关注。此外，正如专利公开WO2019/190879(其通过引用并入本文)中所讨论的那样，包括调节性T淋巴细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.载体，其编码：修饰β2微球蛋白(B2M)的RNA；和嵌合抗原受体(CAR)。2.根据权利要求1所述的载体，其中所述载体是慢病毒载体。3.根据权利要求1所述的载体，其中所述修饰B2M的RNA包含小干扰RNA(siRNA)。4.根据权利要求3所述的载体，其中所述siRNA的编码序列包含选自下组的一个：SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5。5.根据权利要求1所述的载体，其中所述修饰B2M的RNA包含小发夹RNA(shRNA)。6.根据权利要求5所述的载体，其中所述shRNA的编码序列包含选自下组的一个：SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5，以及一个或更多个发夹环序列，所述发夹环序列的编码序列包含选自下组的一个：SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7。7.根据权利要求1所述的载体，与野生型相比，其可操作以将转导的细胞中的B2M表达敲除至少75％。8.根据权利要求1所述的载体，与野生型相比，其可操作以将转导的细胞中的B2M表达敲除至少80％。9.根据权利要求1所述的载体，与野生型相比，其可操作以将转导的细胞中的B2M表达敲除至少85％。10.根据权利要求1所述的载体，与野生型相比，其可操作以将转导的细胞中的B2M表达敲除至少90％。11.根据权利要求1所述的载体，与野生型相比，其可操作以将转导的细胞中的B2M表达敲除至少95％。12.根据权利要求1所述的载体，其中所述CAR特异性结合神经胶质细胞标志物。13.根据权利要求1所述的载体，其中所述CAR特异性结合抗原呈递细胞(APC)标志物。14.根据权利要求1所述的载体，其中所述CAR特异性结合辅助性T细胞1(Th1)标志物。15.根据权利要求1所述的载体，其中所述CAR特异性结合辅助性T细胞17(Th17)标志物。16.根据权利要求1所述的载体，其中所述CAR特异性地结合对选自下组的细胞具有特异性的标志物：胰岛细胞、胰腺β细胞、心肌细胞、单核细胞、巨噬细胞、骨髓细胞、肠细胞、肝细胞、肾细胞、肾足细胞、肾小管细胞、上皮细胞、唾液腺细胞、肺细胞、成纤维细胞、结缔组织细胞、朗格汉斯细胞、角质细胞、黑色素细胞、皮肤细胞、毛囊细胞和毛球细胞。17.根据权利要求1所述的载体，其进一步编码自杀基因。18.根据权利要求1所述的载体，其进一步编码PET报告基因。19.根据权利要求1所述的载体，其进一步编码TK自杀/PET报告基因。20.经编码修饰β2微球蛋白(B2M)的RNA和嵌合抗原受体(CAR)的载体转导的工程化细胞。21.根据权利要求20所述的工程化细胞，其中所述修饰B2M的RNA包含小干扰RNA(siRNA)。22.根据权利要求21所述的工程化细胞，其中所述siRNA的编码序列包含选自下组的一个：SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5。
23.根据权利要求20所述的工程化细胞，其中所述修饰B2M的RNA包含小发夹RNA(shRNA)。24.根据权利要求23所述的工程化细胞，其中所述shRNA的编码序列包含选自下组的一个：SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5，以及一个或更多发夹环序列，所述发夹环序列的编码序列包含选自下组的一个：SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7。25.根据权利要求20所述的工程化细胞，其B2M表达为同等野生型细胞的25％或更少。26.根据权利要求20所述的工程化细胞，其B2M表达为同等野生型细胞的20％或更少。27.根据权利要求20所述的工程化细胞，其B2M表达为同等野生型细胞的15％或更少。28.根据权利要求20所述的工程化细胞，其B2M表达为同等野生型细胞的10％或更少。29.根据权利要求20所述的工程化细胞，其B2M表达为同等野生型细胞的5％或更少。30.根据权利要求20所述的工程化细胞，其中所述CAR特异性结合CNS神经胶质细胞标志物。31.根据权利要求20所述的工程化细胞，其中所述CAR特异性结合抗原呈递细胞(APC)标志物。32.根据权利要求20所述的工程化细胞，其中所述CAR特异性结合辅助性T细胞1(Th1)标志物。33.根据权利要求20所述的工程化细胞，其中所述CAR特异性结合辅助性T细胞17(Th17)标志物。34.根据权利要求20所述的工程化细胞，其中所述CAR特异性结合对选自下组的细胞具有特异性的标志物：胰岛细胞、胰腺β细胞、心肌细胞、单核细胞、巨噬细胞、骨髓细胞、肠细胞、肝细胞、肾细胞、肾足细胞、肾小管细胞、上皮细胞、唾液腺细胞、肺细胞、成纤维细胞、结缔组织细胞、朗格汉斯细胞、角质细胞、黑色素细胞、皮肤细胞、毛囊细胞、毛球细胞、少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞。35.根据权利要求20所述的工程化细胞，其中所述细胞选自：干细胞和淋巴细胞。36.根据权利要求20所述的工程化细胞，其中所述细胞是调节性T细胞(Treg)。37.根据权利要求20所述的工程化细胞，其中所述细胞源自用于在受试者中进行同种异体移植的供体。38.治疗受试者自身免疫性疾病或炎性疾病的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的调节性T细胞(Treg)，每个调节性T细胞表达修饰β
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2微球蛋白(B2M)的RNA和嵌合抗原受体(CAR)，所述嵌合抗原受体以抑制受试者免疫反应的方式特异性结合细胞表面上的配体，从而治疗受试者的自身免疫性疾病或炎性疾病。39.根据权利要求38所述的方法，其中所述修饰B2M的RNA包含小干扰RNA(si...

【专利技术属性】
技术研发人员：P，
申请(专利权)人：AZ治疗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：