一种从山乌龟中提取分离纯化千金藤啶碱的方法技术

本发明专利技术公开了一种从山乌龟中提取分离纯化千金藤啶碱的方法，其采用醇水体系对山乌龟原料进行提取，根据生物碱类物质的性质，利用先酸后碱分步沉淀法，得到千金藤啶碱粗品，再采用分子印迹技术对千金藤啶碱粗品进行了进一步纯化，经过一次重结晶即可制备得到纯度大于98％以上的高纯度千金藤啶碱产品。与传统的提取，粗精制工艺相比，有效避免了物料的反复多次转移，缩短了生产时间，减少了溶剂用量；与传统分离纯化方式相比有效缩短了工艺路线，提高了有效成分收率，降低了生产周期。降低了生产周期。

【技术实现步骤摘要】
一种从山乌龟中提取分离纯化千金藤啶碱的方法


[0001]本专利技术涉及天然产物提取
，具体而言，涉及一种从山乌龟中提取分离纯化千金藤啶碱的方法。

技术介绍

[0002]千金藤啶碱是从防己科千金藤属植物地不容块根中提取分离得到的苄基异喹啉类生物碱。研究表明其是一种脑内多巴胺受体阻滞剂；具有降压，抗心律失常，保护心肌梗死，镇痛，镇静，解痉及解热等作用；临床上主要用于治疗血管性头痛，如偏头痛；多动性运动障碍，儿童多动秽语综合征。研究表明小儿多动症发病率较高。据调查，学龄期儿童行为问题发生率达到12.9％，其中小儿多动症排名最前，发病率可达4.3
‑
5.8％。以上研究结果表明千金藤啶碱临床应用价值很大，具有很好的开发前景。
[0003]目前报道的千金藤啶碱的制备技术主要以合成或半合成法居多，几乎没有从山乌龟中提取分离千金藤啶碱的相关文献及专利报道。从植物中提取生物碱类天然成分的方法主要有酸水提取法、有机溶剂提取法；纯化生物碱的方法主要有重结晶法、柱层析法、生物碱沉淀剂沉淀法。
[0004]酸水提取法一般用1
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2％的无机酸水溶液在80
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90℃加热条件下，回流提取，提取液调至碱性，冷却静置析出生物碱粗品，粗品进一步纯化得到高纯度的生物碱产品；醇提取法利用体积分数为60％
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100％的乙醇/甲醇水溶液进行回流提取，提取液浓缩至无醇，调pH至碱性，静置析出沉淀为生物碱粗品，粗产物进一步纯化得到高纯度生物碱产品；纯化方法中重结晶法主要利用生物碱产品在不同溶剂或同一溶解的不同温度下溶解性不同进行提纯分离；柱层析法所用填料目前主要有阳离子交换树脂，硅胶，氧化铝三种；生物碱沉淀剂则主要用于分离水溶性季胺型生物碱。但是重结晶法纯化生物碱一般需要多次反复结晶才能制备到高纯度生物碱产品，收率低，步骤多。层析法分离生物碱，选择性较差，一般粗提物经一遍层析分离纯度较低，仍需多次结晶才能制备高纯度产品，且有机溶剂用量大。
[0005]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种从山乌龟中提取分离纯化千金藤啶碱的方法，以改善上述技术问题。
[0007]本专利技术是这样实现的：
[0008]第一方面，本专利技术提供了一种从山乌龟中提取分离纯化千金藤啶碱的方法，其包括：
[0009]将千金藤啶碱粗提物的醇溶液过千金藤啶碱分子印迹聚合物柱，再加入甲醇
‑
冰醋酸过柱，收集千金藤啶碱组分。
[0010]可选地，千金藤啶碱分子印迹聚合物柱的制备方法包括：向千金藤啶碱的乙腈溶液中加入功能单体、交联剂以及引发剂，通入氮气，搅拌均匀，静置后得白色坚硬固体聚合
物，然后将聚合物粉碎，得均匀颗粒装柱，用甲醇
‑
冰醋酸体系洗至流出液无模板分子即得千金藤啶碱分子印迹聚合物柱。
[0011]可选地，功能单体包括甲基丙烯酸。
[0012]可选地，交联剂包括乙二醇二甲基丙烯酸酯。
[0013]可选地，引发剂包括偶氮二异丁腈。
[0014]可选地，千金藤啶碱、甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯及偶氮二异丁腈的质量比为1:3
‑
4：15
‑
20：0.1
‑
0.3。
[0015]可选地，静置的条件为在55
‑
65℃下静置反应20
‑
25小时。
[0016]可选地，甲醇
‑
冰醋酸体系中甲醇与冰醋酸的体积比为100：0.5
‑
2。
[0017]可选地，千金藤啶碱粗提物的醇溶液中千金藤啶碱粗提物与醇溶液的质量体积比为1:5
‑
6。
[0018]可选地，上述醇溶液为乙醇。
[0019]可选地，上述醇溶液为无水乙醇。
[0020]可选地，千金藤啶碱粗提物的醇溶液在吸附洗脱时的吸附流速为0.8
‑
1.5BV/h。
[0021]可选地，纯化步骤还包括：将千金藤啶碱组分减压回收甲醇至原料重量的2
‑
3倍，然后加入活性炭，加热回流，趁热过滤，然后向滤液中加入热水，调节pH至8
‑
10，静置，放凉析出大量结晶即为千金藤啶碱。
[0022]可选地，活性炭的添加量为减压回收甲醇后的千金藤啶碱组分质量的0.1％
‑
0.3％。
[0023]可选地，加热回流的时间为0.5
‑
2h。
[0024]可选地，滤液与热水的体积比为1:0.8
‑
1.2。
[0025]可选地，千金藤啶碱粗提物的提取方法包括采用乙醇水溶液提取山乌龟原料，第一次提取完成后，提取残渣加乙醇水溶液进行第二次提取，合并两次提取液，然后在酸性条件下静置析出沉淀，第一次固液分离获得清液，再在碱性条件下静置清液，析出沉淀、第二次固液分离，收集第二次固液分离的沉淀，得千金藤啶碱粗提物。
[0026]可选地，乙醇水溶液中乙醇的体积含量为60
‑
95％。
[0027]可选地，第一次提取中乙醇水溶液与山乌龟原料的体积质量比为5
‑
10：1，提取时间为3
‑
5小时。
[0028]可选地，第二次提取中乙醇水溶液与山乌龟原料的体积质量比为3
‑
6：1，提取时间为2
‑
3小时。
[0029]可选地，酸性条件下静置包括：将合并后的提取液减压浓缩至无醇状态，再向其中加入无机酸溶液至pH＝2
‑
3，静置时间为≥4小时。
[0030]碱性条件下静置包括：向清液中加入无机碱溶液至pH＝8
‑
9，静置时间为≥4小时。
[0031]第二方面，本专利技术提供了上述从山乌龟中提取分离纯化千金藤啶碱的方法获得的千金藤啶碱，该千金藤啶碱的纯度大于98％。
[0032]第三方面，本专利技术提供了上述千金藤啶碱在制备相关药物中的应用，相关药物包括治疗预防血管性头痛的药物，此处血管性头痛包括偏头痛、多动性运动障碍和儿童多动秽语综合症。
[0033]本专利技术具有以下有益效果：
[0034]本专利技术提供的从山乌龟中提取分离纯化千金藤啶碱的方法，通过采用醇水体系对山乌龟原料进行提取，根据生物碱类物质的性质，利用先酸后碱分步沉淀法，得到千金藤啶碱粗品；与传统的提取，粗精制工艺相比，有效避免了物料的反复多次转移，缩短了生产时间，减少了溶剂用量。而且本专利技术还采用分子印迹技术对千金藤啶碱粗品进行了进一步纯化，经过一次重结晶即可制备得到纯度大于98％以上的高纯度千金藤啶碱产品。与传统反复重结晶法，柱层析法相比，有效降低了物料损失，减少了生产步骤。
具体实施方式
[0035]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从山乌龟中提取分离纯化千金藤啶碱的方法，其特征在于，其包括将从山乌龟中提取的千金藤啶碱粗提物的醇溶液过千金藤啶碱分子印迹聚合物柱，再加入甲醇
‑
冰醋酸过柱，收集千金藤啶碱组分。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述千金藤啶碱分子印迹聚合物柱的制备方法包括：向千金藤啶碱的乙腈溶液中加入功能单体、交联剂以及引发剂，通入氮气，搅拌均匀，静置后得白色坚硬固体聚合物，然后将聚合物粉碎，得均匀颗粒装柱，用甲醇
‑
冰醋酸体系洗至流出液无模板分子即得所述千金藤啶碱分子印迹聚合物柱；优选地，所述功能单体包括甲基丙烯酸；优选地，所述交联剂包括乙二醇二甲基丙烯酸酯；优选地，所述引发剂包括偶氮二异丁腈；优选地，所述千金藤啶碱、甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯及偶氮二异丁腈的摩尔比为1:3
‑
4：15
‑
20：0.1
‑
0.3；优选的，所述静置的条件为在55
‑
65℃下静置反应20
‑
25小时；优选地，所述甲醇
‑
冰醋酸体系中甲醇与冰醋酸的体积比为100：0.5
‑
2。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述千金藤啶碱粗提物的醇溶液中千金藤啶碱粗提物与醇溶液的质量体积比为1:5
‑
6；优选地，所述醇溶液为乙醇；优选地，所述醇溶液为无水乙醇；优选地，所述千金藤啶碱粗提物的醇溶液在吸附洗脱时的吸附流速为05
‑
1.5BV/h。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：将所述千金藤啶碱组分减压回收甲醇至原料重量的2
‑
3倍，然后加入活性炭，加热回流，趁热过滤，然后向滤液中加入热水，调节pH至8
‑
10，静置，放凉析出大量结晶即为千金藤啶碱；优选地，所述活性炭的添加量为减压回收甲醇后的千金藤啶碱组分质量的0.1％

【专利技术属性】
技术研发人员：罗庚，华宁，徐小琴，张成文，张卫刚，钱英，
申请(专利权)人：西安瑞仁生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：