【技术实现步骤摘要】
水稻OsNPR1基因及其在抗水稻条纹叶枯病中的应用
[0001]本专利技术涉及转基因
及植物病毒病害防治领域，尤其涉及水稻水杨酸途径重要调控因子OsNPR1基因在植物抗水稻条纹叶枯病中的应用领域。
技术介绍
[0002]水稻条纹病毒(Rice stripe virus，RSV)，以灰飞虱为媒介在水稻群体中传播流行，该病毒属于纤细病毒属(Tenuivirus)，是一种多分体负义单链RNA病毒。在自然条件下，RSV侵染水稻引起水稻条纹叶枯病，植物感染RSV的典型症状包括植株枯萎矮化、叶脉褪绿斑驳出现不连续的黄色条纹、心叶捻转扭曲下垂、生长发育迟缓，导致整株植株不抽穗或抽穗减少，严重则会出现死亡。RSV在侵染植株的不同时期表现症状不一样，以水稻为例，水稻在幼苗期被感染RSV后，植株出现矮化、枯心，严重时会导致整棵植株的死亡；成株期感染RSV矮化症状不明显，叶脉出现不连续黄色条纹，分蘖增多。近年来，国内外学者对RSV分子生物学功能包括基因组学、蛋白组学以及病毒蛋白与寄主因子互作等方面开展了大量的研究。发现RSV的基因组由四个单...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.OsNPR1基因在抗纤细病毒属病毒作物育种中的应用，所述基因序列如：SEQ ID NO:1所示。2.权利要求1所述的应用，编码所述OsNPR1基因的蛋白序列如SEQ ID NO:2所示。3.权利要求1
‑
2任一项所述的应用，所述纤细病毒属病毒(Tenuiviruses)包括稗草白叶病毒(Echinochloa hoja blanca virus，EHBV)、玉米条纹病毒(Maize stripe virus，MSpV)、水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus，RGSV)、水稻白叶病毒(Rice hoja blanca virus，RHBV)、水稻条纹病毒(Rice stripe virus，RSV)、尾粰草白叶病毒(Urochloa hoja blanca virus，UHBV)。4.权利要求3所述的应用，所述作物优选水稻，玉米，小麦，燕麦和大麦；更优选水稻，最优选日本晴。5.一种水稻条纹病毒(RSV)转基因水稻的制备方法，其步骤包括：(1)构建水稻过表达OsNPR1载体设计带有BamHI及SacI酶切位点的引物去扩增权利要求1所述的OsNPR1基因，用BamHI、SacI酶对pCV1300载体进行双酶切，酶切位点的引物，用于OsNPR1双元表达载体PCV1300的构建，引物序列如下：PCV
‑
OsNPR1
‑
F:GTTCCAGATTACGCTGGATCCATGGAGCCGCCGACCAGCCASEQ ID NO:5PCV
‑
OsNPR1
‑
R:ATCGGGGAAATTCGAGCTCTCATCTCCTTGGTCGAATGGCSEQ ID NO:6酶切PCV1300载体后，将上述引物扩增PCR产物分别与载体连接；挑选阳性克隆，进行测序确认已成功构建PCV1300
‑
OsNPR1表达载体。(2)EHA105农杆菌的培养与水稻愈伤组织诱导培养：取
‑
80℃冰箱保存的含有序列如SEQ ID NO:1所示的目基因载体的质粒PCV1300
‑
OsNPR1转化根瘤农杆菌EHA105；详细的操作步骤如下，首先吸取1μL质粒加到100μL感受态细胞中，吹打混匀，加入4℃提前遇冷的电极杯中，2200V的电压转化，加入500μL无抗性的LB液体培养基，28℃，200rpm培养2
...
【专利技术属性】
技术研发人员：孙宗涛，张合红，魏中艳，李雁军，谢凯丽，陈剑平，
申请(专利权)人：宁波大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。