一种大肠杆菌噬菌体pEC-S163-2.2及其应用和制剂制造技术

本申请提供了一种大肠杆菌噬菌体pEC

【技术实现步骤摘要】
一种大肠杆菌噬菌体pEC
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S163
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2.2及其应用和制剂


[0001]本专利技术涉及微生物领域，更具体地，涉及大肠杆菌噬菌体及其应用和制剂。

技术介绍

[0002]大肠杆菌(Escherichia coli)是一种机会致病革兰氏阴性杆菌，属于肠杆菌科(Enterobacteriaceae)，埃希氏菌属(Escherichia)，除胃肠道感染以外，还会引起尿道感染、关节炎、脑膜炎以及败血型感染等。其中O157:H7型大肠杆菌危害较大，它是EHEC(肠出血性大肠杆菌)家族中的一员。提起O157:H7型大肠杆菌，可谓劣迹斑斑：美国在1982、1984、1993年曾三次发生O157:H7型大肠杆菌的爆发性流行；日本曾在1996年爆发过一次波及9000多人的大流行。O157:H7型大肠杆菌感染后的主要症状正是出血性腹泻，严重者可伴发溶血尿毒综合征(HUS)，危及生命。由于O157:H7型大肠杆菌危害较大，且可经食物和饮用水在人群中广泛传播，因此食品卫生主管部门已将O157:H7型大肠杆菌列为常规检测项目。最新发现的O104型大肠杆菌也是一种EHEC，感染症状类似O157:H7型大肠杆菌，且毒力更为猛烈。大肠杆菌在生活中也最为常见且易获得耐药性，现代医学中最严重的挑战之一是对抗ESKAPE(粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、肠杆菌)组的多重耐药菌的医院感染。这些病原体极其危险，因为可能出现新的、更复杂的耐药机制。大肠杆菌病在临床最常见，根据2021年全国细菌耐药监测报告显示，在临床分离的细菌中，大肠杆菌排名第一(18.98％)。由此可见，大肠杆菌的感染是不容忽视的问题。近年来，耐多药和广泛耐药大肠杆菌的出现，给临床治疗带来很大的困难，同时也成为全球公共卫生问题。
[0003]噬菌体是感染细菌、真菌、藻类、放线菌、螺旋体以及蓝细菌等微生物的病毒，其在自然界分布极广，凡是有微生物，如细菌、真菌的地方，都存在相应的噬菌体。噬菌体最早是由微生物学家Frederick Twor和Felix d
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Herelle分别于1915年和1917年发现的，它是地球上最丰富最多样化的生物体，种类繁多，数量巨大，是细菌的10～100倍，约有1
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种。噬菌体必须利用细菌等微生物作为宿主进行繁殖，其大小通常在20～200nm之间。作为细菌的天然杀手，自发现以来就用于治疗细菌感染。噬菌体疗法已广泛应用于医药、畜牧兽医、食品卫生等多个领域的病原菌防控，与抗生素相比，噬菌体容易获得和分离；不易产生耐药性；宿主特异性强，只清除目标细菌，不会对人及动物体内的其他正常菌群造成威胁；安全性高，是人和动物正常的共生体。此外，它们可以在宿主存在的情况下迅速大量繁殖。由于细菌耐药问题的日益严重，噬菌体作为治疗感染性细菌疾病的替代选择具有巨大潜力。

技术实现思路

[0004]本专利技术针对上述技术问题，提供一种大肠杆菌噬菌体及其对多耐药大肠杆菌抑制、杀灭的应用，旨为大肠杆菌的感染提供新的治疗方案，以及对大肠杆菌造成的环境和饲料等污染提供潜在的新型消毒手段。
[0005]本申请提供了一种大肠杆菌噬菌体pEC
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2.2，所述大肠杆菌噬菌体
(Escherichia coli phage)pEC
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2.2保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏号为GDMCC No:63107
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B1。
[0006]本申请还提供了包含如上所述的大肠杆菌噬菌体pEC
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2.2的制剂。
[0007]本申请还提供了大肠杆菌噬菌体pEC
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2.2在制备防治大肠杆菌感染的制剂中的应用。
[0008]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0009](1)大肠杆菌噬菌体pEC
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2.2是宽宿主谱噬菌体，该噬菌体不仅对其多重耐药的宿主菌大肠杆菌MPEB0000337具有较好的消杀效果，对另外5株大肠杆菌MPEB0000278、MPEB0009307、MPEB0001297、MPEB0012068和MPEB0004456具备很强的消杀效果，抗菌谱较广，可应用于制备防治多重耐药大肠杆菌的药物，上述菌株均来自优宜邦生物科技(上海)有限公司；
[0010](2)大肠杆菌噬菌体pEC
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2.2潜伏期短(10min)，能快速杀死培养基中的宿主菌，且毒副作用小，安全性高，温度、酸碱耐受范围比较广且具有良好的亲水性，易制成喷洒剂和注射剂，对大肠杆菌的增殖有良好的抑制、杀灭作用，对感染多重耐药大肠杆菌的动物有很好的治疗和保护作用。
附图说明
[0011]图1是本专利技术大肠杆菌噬菌体pEC
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2.2的噬菌斑图片。
[0012]图2是本专利技术大肠杆菌噬菌体pEC
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2.2的透射电镜图。
[0013]图3是本专利技术大肠杆菌噬菌体pEC
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2.2的一步生长曲线图。
[0014]图4是温度对本专利技术大肠杆菌噬菌体pEC
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2.2的活性影响示意图。
[0015]图5是pH对本申请大肠杆菌噬菌体pEC
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2.2的活性影响示意图。
[0016]图6是本专利技术大肠杆菌噬菌体pEC
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2.2的培养基中的杀菌示意图。
[0017]图7是本专利技术大肠杆菌噬菌体pEC
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2.2对感染大肠杆菌的大蜡螟幼虫治疗示意图。
[0018]本专利技术提供的大肠杆菌噬菌体(Escherichia coli phage)pEC
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2.2，分类学名称为Escherichia coli phage，于2023年1月1日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏号为：GDMCC No:63107
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B1；保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。
具体实施方式
[0019]下面的实施例可以使本领域技术人员更全面地理解本专利技术，但不以任何方式限制本专利技术。
[0020]实施例涉及的菌株、试剂及培养基：
[0021]实验所用宿主菌为多重耐药大肠杆菌临床株，来自优宜邦生物科技(上海)有限公司货号为：MPEB0000337。
[0022]MH肉汤(1L)：称取MH肉汤(MH Broth)21.0g本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种大肠杆菌噬菌体(Escherichiacoliphage)pEC
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2.2，保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为：GDMCCNo:63107
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【专利技术属性】
技术研发人员：王承民，左君豪，王雪，曾君，王猛，赵佳男，郭志良，季芳，张立敏，赵瑞利，徐莉莉，
申请(专利权)人：优宜邦生物科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：