一种暹罗芽孢杆菌、微生物菌剂及其应用制造技术

本申请适用于微生物技术领域，提供了一种暹罗芽孢杆菌、微生物菌剂及其应用。本申请提供的暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）ZXKN01菌株能兼抗病原真菌、病原细菌和北方根结线虫，以该ZXKN01菌株制备的微生物菌剂对人参属中药材上北方根结线虫病的防效在70%以上，对北方根结线虫复合病害的防效可达60%以上。本申请以该ZXKN01菌株制备的微生物菌剂能高效防治人参属中药材上的北方根结线虫病，同时对土传真菌病害和细菌病害也有一定的防效，具有使用成本低、无残留、对人畜安全的特点。对人畜安全的特点。

【技术实现步骤摘要】
一种暹罗芽孢杆菌、微生物菌剂及其应用


[0001]本申请属于微生物
，尤其涉及一种暹罗芽孢杆菌、微生物菌剂及其应用。

技术介绍

[0002]根结线虫复合病害是指栖居于同一生态位的根结线虫与土传病原菌协同侵染同一种作物引起的病害。根结线虫二龄幼虫侵染作物根系造成的伤口利于多种土传病原真菌、病原细菌的侵染；因此，根结线虫复合病害在各种农作物上普遍发生、危害严重。根结线虫复合病害首次报道于根结线虫与尖孢镰刀菌复合侵染棉花。迄今，根结线虫与多种植物病原真菌和病原细菌协同侵染引起的复合病害在番茄、中药材、烟草、苜薯、棉花、香蕉、咖啡，以及豆类等作物均被广泛报道，危害严重，损失巨大。
[0003]在人参属中药材上的根结线虫病由北方根结线虫侵染引起，根结线虫复合病害极为严重。例如，北方根结线虫与病原细菌假单孢杆菌、产吲哚金黄杆菌和病原真菌恶疫霉、草茎点霉复合侵染引起的三七根结线虫复合病害极为普遍。北方根结线虫与病原菌镰刀菌属，柱孢属，草茎点霉以及恶疫霉等病原真菌复合侵染导致的西洋参和人参根结线虫复合病害危害面积大、造成的经济损失严重。
[0004]目前，针对人参属中药材上北方根结线虫防治的相关研究少，且防治效果有待提升。

技术实现思路

[0005]本申请实施例的目的在于提供一种暹罗芽孢杆菌，旨在提供一种可有效防治人参属中药材上北方根结线虫及其复合病害中的暹罗芽孢杆菌。
[0006]本申请实施例是这样实现的，一种暹罗芽孢杆菌，所述暹罗芽孢杆菌为暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）ZXKN01，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25830，保藏日期为2022年09月28日。
[0007]本申请实施例的另一目的在于一种微生物菌剂，所述微生物菌剂包含上述的暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）ZXKN01。
[0008]本申请实施例的另一目的在于一种上述的微生物菌剂的制备方法，包括：将暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）ZXKN01菌株接种于培养基斜面上进行培养，得斜面种子；将所述斜面种子接种于液体培养基中进行培养，得液体种子；将所述液体种子按3
‑
5%的体积比接入发酵罐内的培养基中进行发酵培养，得菌体及其代谢产物；将所述菌体及其代谢产物与可溶性玉米淀粉混合，经喷雾干燥处理，即得微生物菌剂。
[0009]本申请实施例的另一目的在于一种上述的暹罗芽孢杆菌或者上述的微生物菌剂在防治人参属中药材上北方根结线虫病中的应用。
[0010]本申请实施例的另一目的在于一种上述的暹罗芽孢杆菌或者上述的微生物菌剂在防治人参属中药材根结线虫复合病害中的应用。
[0011]本申请实施例提供的暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）ZXKN01菌株能兼抗病原真菌、病原细菌和北方根结线虫，以该ZXKN01菌株制备的微生物菌剂对人参属中药材上北方根结线虫病的防效在70%以上，对北方根结线虫复合病害的防效可达60%以上。本申请以该ZXKN01菌株制备的微生物菌剂能高效防治人参属中药材上的北方根结线虫病，同时对土传真菌病害和细菌病害也有一定的防效，具有使用成本低、无残留、对人畜安全的特点。
具体实施方式
[0012]为了使本申请的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0013]本申请以人参属中药材上的北方根结线虫复合病害病原为靶标，筛选的暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）ZXKN01菌株能兼抗病原真菌、病原细菌和北方根结线虫。当前，不仅暹罗芽孢杆菌中兼抗三种病原的菌株及其应用未见报道，且暹罗芽孢杆菌在人参属中药材上北方根结线虫防治中的应用也未见报道。
[0014]本申请提供了一种暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）ZXKN01菌株，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25830，保藏日期为2022年09月28日，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
[0015]本申请通过在从事线虫生防菌筛选的研究过程中，从不同来源的根结线虫二龄幼虫（J2）、卵和雌虫的附生菌中共分离到45株暹罗芽孢杆菌。以侵染西洋参的北方根结线虫J2为靶标，获得对J2致死率在70%以上的菌株12株；再以病原真菌恶疫霉和病原细菌荧光假单胞菌为靶标，测定这12株暹罗芽孢杆菌LB发酵液对两种病原的拮抗性，发现只有分离自西洋参北方根结线虫J2上的暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）ZXKN01菌株能对三种病原表现出良好的生防活性（表1）。
[0016]其中，暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）ZXKN01菌株在R2A培养基上37℃培养3天时，菌落直径2
‑
4 mm，粘液状，半透明，边缘整齐；菌株可在5
‑
55℃，pH 4.5
‑
9.0条件下生长，在37℃，pH 6
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7时生长最佳。暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）ZXKN01菌株为革兰氏阳性菌，好氧或兼性厌氧，菌体杆状，细胞宽0.25 ~ 0.65 mm，长1.2
‑
3.6 mm。ZXKN01菌株的生理生化特征为全细胞脂肪酸分析显示主要脂肪酸为 anteiso
‑
C
15:0
和anteiso
‑
C
17:0
。菌体全细胞极性脂质分析显示其含有双磷脂酰甘油、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、赖氨酰磷脂酰甘油、糖脂和其他未知脂质；以上理化特征是鉴别ZXKN01的主要化学特征依据。利用通用引物27f和1492r 经PCR扩增ZXKN01菌株的16S rRNA基因获得的序列在GeneBank公共数据库的序列号为OP459296，此序列是鉴定该菌株的主要分子特征依据。
[0017]另外，本申请提供的微生物菌剂，可按照微生物发酵常规方法及微生物菌剂制备常规方法制成。
[0018]以下给出本申请针对暹罗芽孢杆菌、微生物菌剂的获得及其应用的某些实施方式的实施例，其目的不在于对本专利技术的范围进行限定。
[0019]实施例1 暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）ZXKN01菌株的获得从感染根结线虫的三七、西洋参、人参根瘤上分离获得根结线虫的J2、卵和雌虫，将J2、卵和雌虫分别接种到LB培养基平板上，37℃下培养3天后按传统的划线分离法获得线虫附生细菌单菌落共145株。将这145株细菌用LB液体培养基在37℃、150 rpm下培养3天获得菌体发酵液，通过测定各菌株发酵液对西洋参北方根结线虫J2的致死率，其中12株对J2的致死率在70%以上（表1）；再以西洋参北方根结线虫复合病害的病原真菌恶疫霉和病原细菌荧光本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种暹罗芽孢杆菌，其特征在于，所述暹罗芽孢杆菌为暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）ZXKN01，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25830，保藏日期为2022年09月28日。2.一种微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂包含如权利要求1所述的暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）ZXKN01。3.一种权利要求2所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括：将暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）ZXKN01菌株接种于培养基斜面上进行培养，得斜面种子；将所述斜面种子接种于液体培养基中进行培养，得液体种子；将所述液体种子按3
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5%的体积比接入发酵罐内的培养基中进行发酵培养，得菌体及其代谢产物；将所述菌体及其代谢产物与可溶性玉米淀粉混合，经...

【专利技术属性】
技术研发人员：王世辉，徐道雨，李向阳，王风杰，于志波，李振福，莫明和，李红丽，卢希海，庞巧莲，张璐，李宏云，张学成，张健康，王星博，
申请(专利权)人：山东康惠植物保护有限公司，
类型：发明
国别省市：