IRF4在治疗疟疾中的应用制造技术

本发明专利技术提供了IRF4基因在体外筛选治疗疟疾的药物中的应用；抑制和/或沉默IRF4基因表达的试剂在制备治疗疟疾的药物中的应用；IRF4蛋白的抑制剂和/或中和剂在制备治疗疟疾的药物中的应用。本发明专利技术首次通过研究证实了IRF4基因缺失可以抑制疟原虫感染，IRF4基因可作为治疗疟疾的新靶点。本发明专利技术利用疟原虫同时感染IRF4基因敲除小鼠和野生小鼠，结果发现IRF4基因敲除能有效抑制原虫率，降低死亡率，提高外周血红细胞数和小鼠存活率。本发明专利技术发现了IRF4基因在治疗疟疾中的新作用，为抗疟原虫感染提供了新的治疗靶点，为制备和筛选抗血吸虫感染药物提供了新的方向和思路。药物提供了新的方向和思路。药物提供了新的方向和思路。

【技术实现步骤摘要】
IRF4在治疗疟疾中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及IRF4在治疗疟疾中的应用。

技术介绍

[0002]疟疾是一种严重影响人类健康的寄生虫病，在许多热带和亚热带国家有很高的发病率和死亡率，严重威胁着公共卫生安全。疟原虫是疟疾的致病体。虽然导致严重疟疾的确切机制还不确定，但目前普遍认为血液期疟原虫在靶器官血管中的隔离和强烈的促炎反应是诱发疾病的重要决定因素。
[0003]目前治疗疟疾的化疗药物主要有氯喹、甲氟喹、奎宁及青蒿素类药物等。青蒿素类抗疟药以其速效，低毒等特点备受关注，以青蒿素为基础的联合用药已被世界卫生组织推荐为治疗恶性疟的一线方法。然而青蒿素等化疗药物在治疗疟疾的过程中已产生耐药性并已逐渐成为疟疾控制的主要威胁。因此，亟需找到控制疟疾的替代方法。由于对疟疾的保护性免疫反应及免疫逃逸机制的理解仍然十分有限，导致疫苗研制工作受到阻碍，目前还没有针对疟疾的有效疫苗。因此，阐明疟原虫感染诱导的免疫反应的机制，对未来疟疾的疫苗设计及防治起着关键作用。

技术实现思路

[0004]基于此，本专利技术的目的在于提供IRF4在治疗疟疾中的应用，为疟疾的治疗提供了新的靶点和思路。
[0005]为达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案。
[0006]IRF4基因在体外筛选治疗疟疾的药物中的应用。
[0007]本专利技术还提供了抑制和/或沉默IRF4基因表达的试剂在制备治疗疟疾的药物中的应用。
[0008]在一些实施例中，所述药物具有以下作用中的至少一种：改善疟色素沉积、感染红细胞沉积、肺泡腔或璧损伤。
[0009]在一些实施例中，所述抑制IRF4基因表达的试剂为化合物、siRNA、shRNA或CRISPR/Cas9。
[0010]本专利技术还提供了IRF4蛋白的抑制剂和/或中和剂在制备治疗疟疾的药物中的应用。
[0011]本专利技术还提供了一种治疗疟疾的药物，所述药物包含抑制IRF4基因表达的试剂、沉默IRF4基因表达的试剂、IRF4蛋白的抑制剂和IRF4蛋白的中和剂中的至少一种，以及药物学上可以接受的辅料。
[0012]在一些实施例中，所述抑制IRF4基因表达的试剂为化合物、siRNA、shRNA或CRISPR/Cas9。
[0013]在一些实施例中，所述药物的剂型为片剂、颗粒剂、胶囊剂、粉剂、溶液剂、丸剂、注射剂。
[0014]本专利技术首次通过研究证实了IRF4基因缺失可以抑制疟原虫感染，IRF4基因可作为治疗疟疾的新靶点。本专利技术利用疟原虫同时感染IRF4基因敲除小鼠和野生小鼠，结果发现IRF4基因敲除能有效抑制原虫率，降低死亡率，提高外周血红细胞数和小鼠存活率。本专利技术发现了IRF4基因在治疗疟疾中的新作用，为抗疟原虫感染提供了新的治疗靶点，为制备和筛选抗血吸虫感染药物提供了新的方向和思路。
附图说明
[0015]图1为感染14天后的血涂片结果。
[0016]图2为IRF4基因缺失对疟原虫感染的影响实验结果；其中，A为小鼠生存曲线；B为原虫率；C为外周血红细胞数目；D为小鼠体重随感染时间的变化；E为小鼠腹部体温随感染时间的变化；F为感染第14天原虫率；G为感染第14天外周血红细胞数目；H为感染第14天肺脏石蜡切片样本经苏木精
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伊红染色结果。
具体实施方式
[0017]本专利技术下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。实施例中所用到的各种常用化学试剂，均为市售产品。
[0018]除非另有定义，本专利技术所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不用于限制本专利技术。
[0019]本专利技术的术语“包括”和“具有”以及它们任何变形，意图在于覆盖不排他的包含。例如包含了一系列步骤的过程、方法、装置、产品或设备没有限定于已列出的步骤或模块，而是可选地还包括没有列出的步骤，或可选地还包括对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤。
[0020]在本专利技术中提及的“多个”是指两个或两个以上。“和/或”，描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如，A和/或B，可以表示：单独存在A，同时存在A和B，单独存在B这三种情况。字符“/”一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。
[0021]IRF4为干扰素调节因子4(interferon regulatory factor 4，IRF4)，在B细胞、T细胞和巨噬细胞等多种免疫细胞的发育和分化中发挥重要作用。
[0022]本专利技术分别利用约氏疟原虫经腹腔感染IRF4基因敲除小鼠和野生小鼠，然后检测小鼠生存曲线、原虫率、外周血红细胞数、体重和腹部体温随感染时间的变化；并于感染14天后处死小鼠，收集肺脏进行苏木精
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伊红染色。结果显示，与野生型小鼠相比，IRF4基因敲除能有效抑制原虫率，提高外周血红细胞数和小鼠生存率，同时提高感染过程中小鼠体重和腹部体温。
[0023]基于上述研究结果，IRF4可作为疟疾的一个新的治疗靶点，抑制或沉默IRF4基因的试剂可用于制备治疗疟疾的药物。所述抑制IRF4基因表达的试剂可以为化合物、siRNA、shRNA或CRISPR/Cas9，但并不限于上述试剂，只要能抑制或沉默IRF4基因的表达，均属于本专利技术请求保护的范围。
[0024]IRF4蛋白的抑制剂或中和剂能有效抑制IRF4蛋白的功能，因此，也可用于制备治疗疟疾的药物。能抑制或中和IRF4蛋白功能的试剂，均属于本专利技术请求保护的范围。
[0025]同时，IRF4基因可作为体外筛选治疗疟疾药物的一个新靶点。能抑制或沉默IRF4基因表达的试剂，即可作为治疗疟疾的候选药物。
[0026]本专利技术并不限定所述治疗疟疾的药物的剂型，所述药物可通过本领域常规技术制备成多种药物学领域可接受的剂型，包括但不限于片剂、颗粒剂、胶囊剂、粉剂、溶液剂、丸剂、注射剂。
[0027]下面结合具体实施例进行说明。
[0028]实施例1
[0029]本实施例研究IRF4基因缺失对疟原虫感染的影响。
[0030]1.疟原虫感染小鼠
[0031]实验分组：野生型C57BL/6小鼠感染组(WT
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Inf)和C57BL/6背景的IRF4基因敲除小鼠感染组(IRF4KO
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Inf)。取6
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8周龄野生型C57BL/6小鼠(WT小鼠)和IRF4基因敲除小鼠(IRF4KO小鼠)进行实验。Parasites and infection Plasmodium yoelii nigeriensis NSM购自疟疾研究和参考试剂资源中心(MR4)。将解冻的约氏疟原虫经腹腔注射到野生型C57BL/6小鼠体内，待原虫率达到10
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20％后，取眼球血，将受感染的红细胞(iRBC 1
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106)经腹腔注本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.IRF4基因在体外筛选治疗疟疾的药物中的应用。2.抑制和/或沉默IRF4基因表达的试剂在制备治疗疟疾的药物中的应用。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物具有以下作用中的至少一种：改善疟色素沉积、感染红细胞沉积、肺泡腔或璧损伤。4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述抑制IRF4基因表达的试剂为化合物、siRNA、shRNA或CRISPR/Cas9。5.IRF4蛋白的抑制剂和/或中和剂在制备治疗疟疾的药物中的应用。...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨权，朱意强，周露，莫棱珊，洪灿盛，林杰，钱满泓添，胡腾飞，
申请(专利权)人：广州医科大学，
类型：发明
国别省市：