MiR-133a-3p在制备治疗UVB急性皮肤损伤药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及生物医药技术领域，具体涉及miR

【技术实现步骤摘要】
MiR
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133a
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3p在制备治疗UVB急性皮肤损伤药物中的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体涉及miR
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133a
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3p在制备治疗UVB急性皮肤损伤药物中的应用。

技术介绍

[0002]日光中的紫外线是光线性皮肤病的重要致病因素，与慢性光化性皮炎、多形性光疹、红斑狼疮、光老化、光致癌等多种皮肤病的发病和加重密切相关。根据波长的不同，UV分为UVC、UVB和UVA。由于UVB的穿透性较低，UVB暴露后，组织损伤主要位于表皮。短时间内暴露在高剂量的UVB辐射下会引起急性皮肤损伤，导致皮肤水疱、红肿、脱屑等一系列症状。因此，防治UVB所致皮肤急性光损伤，发现新的药物靶点，是目前实验研究和临床实践面临的重大挑战。
[0003]外用糖皮质激素目前仍是UVB导致皮肤光损伤(如日晒伤、光变态反应相关皮肤病等)首要的治疗方式，然而，外用糖皮质激素仍存在一系列不良反应如：皮肤变薄萎缩；毛细血管扩张、潮红；细菌真菌感染；痤疮、多毛等等。一方面，由于外用糖皮质激素种类繁多，且多为非处方药，因此在使用过程中常常有超出其合理应用范围的行为，存在误用、滥用的问题，导致病情加重，发生不良反应；另一方面，由于医学科学知识尚未普及，一些患者对外用糖皮质激素的使用感到恐慌和排斥，对其不良反应心存畏惧，限制了外用糖皮质激素制剂在临床工作中的合理使用。
[0004]人类基因组DNA中98％的序列转录为非编码RNA，其数量远大于编码蛋白质的基因，它们不会进一步翻译为蛋白质，但发挥着重要的生物学功能。近年来的研究发现了越来越多非编码RNA，如microRNAs(miRNAs)作为疾病的治疗靶点，相比现有的数百种蛋白质药物靶点，非编码RNA大大扩展了现有的疾病治疗靶标，为新药研发开辟了更为广阔的天地。目前，一些RNA疗法已经被美国食品和药物管理局和欧洲药监局批准进入临床，还有一些miRNA疗法正在临床试验阶段。目前，尚未有关miR
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3p(一种miRNA)可以缓解UVB造成的急性损伤的相关报道。

技术实现思路

[0005]为了克服上述技术缺陷的不足，本专利技术提供了miR
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133a
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3p在制备治疗UVB急性皮肤损伤药物中的新用途。我们发现在UVB急性损伤的小鼠表皮和人角质形成细胞系HaCaT细胞中，miR
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3p水平较正常表皮或细胞下降，通过恢复miR
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3p水平可以缓解UVB造成的急性损伤，因此，miR
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3p是UVB所致急性皮肤损伤的重要治疗靶点之一。
[0006]本专利技术探讨了皮内注射agomir miR
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3p对于缓解UVB照射所致小鼠急性皮肤光损伤的作用。
[0007]本专利技术进一步探讨了人角质形成细胞系HaCaT细胞过表达miR
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3p对于缓解UVB照射所致细胞死亡的疗效。
[0008]一方面，本专利技术提供了MiR
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133a
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3p在制备治疗UVB急性皮肤损伤药物中的应用。
antisense序列：acgugacacguucggagaatt。
[0031]实验条件：所有组小鼠背部剃毛后24小时后均予以UVB 430mJ/cm2照射背部。于UVB照射后0、24、48h，在II、III组小鼠背部UVB照射处进行皮内注射，II组小鼠注射对照序列agomir NC，III组小鼠注射agomir
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133。
[0032]皮肤损伤评价：按照2015年版光斑贴试验临床应用专家共识对小鼠皮肤损伤情况进行评分，使用红斑、水肿等指标量化评价。依据被国内外相关研究采用的评价方法，采用的评分项目包括红斑、水肿和溃疡，每项评分按照损伤程度分为0～3：无＝0，轻度＝1，中度＝2，重度＝3，取3项指标的评分之和，最高评分为9分。实验统计结果见表1所示，采用SPSS统计软件进行数据分析，数据采用均值
±
标准差(X
±
s)表示，各组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD检验，P<0.05为差异有统计学意义。照光后96h牺牲小鼠，观察小鼠背部皮肤改变并留取照片，如附图1所示。
[0033]表1 C57BL/6J小鼠皮肤损伤评分表(X
±
s)
[0034]组别例数皮损评分UVB组58.00
±
0.71*UVB+agomirNC组58.40
±
0.55*UVB+agomir
‑
133组54.20
±
1.48
[0035]*：与UVB+agomir
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133组比较，p＜0.05
[0036]结果显示，相较于单独照射UVB或照射UVB后注射agomir NC，注射agomir
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133可显著减轻UVB急性照射引起的皮肤糜烂溃疡，差异有统计学意义。
[0037]表皮厚度增厚评价：取造模完成后小鼠的背部皮肤组织，通过对组织固定，脱水，石蜡包埋，切片后进行HE染色，实验结果如附图2所示。相较于单独照射UVB或照射UVB后注射agomir NC，注射agomir
‑
133可显著减轻UVB急性照射引起的皮肤增厚及坏死；通过对HE染色对表皮厚度进行检测，结果如表2所示，采用SPSS统计软件进行数据分析，数据采用均值
±
标准差(X
±
s)表示，各组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD检验，P<0.05为差异有统计学意义。
[0038]表2 C57BL/6J小鼠皮肤表皮厚度(X
±
s)
[0039]组别例数表皮厚度(μm)UVB组5147.23
±
2.74
*
UVB+agomirNC组5135.64
±
4.93
*
UVB+agomir
‑
133组581.71
±
6.14
[0040]*：与UVB+agomir
‑
133组比较，p＜0.05
[0041]结果显示，相较于单独照射UVB或照射UVB后注射agomir NC，注射agomir
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133可显著减轻UVB急性照射引起的表皮厚度增加，差异有统计学意义。
[0042]实施例2人角质形成细胞系HaCaT细胞过表达miR
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133a
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3p缓解UVB照射所致细胞死亡
[0043]实验条件：HaCaT细胞接种于6孔板中，分为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.miR
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133a
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3p在制备治疗UVB急性皮肤损伤药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，所述药物用于减轻UVB急性照射引起的皮肤糜烂溃疡和/或减轻UVB急性照射引起的皮肤增厚及坏死和/或减轻UVB急性照射引起的表皮厚度增加。3.根据权利要求1所述的应用，所述miR
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3p来自被分离细胞，或者可通过人工合成的方式获得。4.根据权利要求1所述的应用，所述药物包括以下任一：(1)miR
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133a
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【专利技术属性】
技术研发人员：陈旭，宋常君，肖塔，顾恒，
申请(专利权)人：中国医学科学院皮肤病医院中国医学科学院皮肤病研究所，
类型：发明
国别省市：