一种纳米金佐剂联合siRNA-PEX5的药物制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，涉及一种纳米金佐剂联合siRNA

【技术实现步骤摘要】
一种纳米金佐剂联合siRNA
‑
PEX5的药物


[0001]本专利技术属于生物医药领域，涉及一种纳米金佐剂联合siRNA
‑
PEX5的药物。

技术介绍

[0002]恶性肿瘤(Cancer)是严重威胁人类健康的疾病，是全球范围内最难治愈的疾病之一。我国整体癌症粗发病率及死亡率仍持续上升，癌症实际负担沉重，且近年来发病年轻化趋势愈发严重。在过去的几年里，许多治疗方法已经被批准用于癌症的治疗，然而许多方法只能提供有限的生存益处，现有的治疗并不能满足大多数患者的治疗需求。癌症的治疗仍然具有挑战性，迫切需要有效的药物来提高癌症的治疗效果，找寻有效的治疗药物仍然是癌症治疗探索中的重要任务。
[0003]PEX蛋白(Peroxins)是一系列由PEX基因编码的蛋白质，在过氧化物酶体形成、降解以及执行生物学功能的过程中起到关键作用。其中，PEX5由一段长的、无规则结构、功能不明的N端区域及一个球形的三角形四肽重复结构域(Tetratricopeptide repeat，TPR)构成。TPR结构域可与多数基质蛋白都含有的过氧化物酶体靶向信号(Peroxisome targeting signal，PTS)直接结合，如C末端的丝氨酸
‑
赖氨酸
‑
亮氨酸(SKL)三肽组成的PTS1，或位于基质蛋白N端的PTS2，但PTS2的识别还需要接头蛋白PEX7。PEX5还存在一种短的可变剪接形式，仅能结合PTS1货物。进一步与过氧化物酶体膜上的其他PEX蛋白(PEX13和PEX14所组成的复合物)相互作用，协同将其转运至过氧化物酶体。PEX5可以通过其泛素化形式的改变，从过氧化物酶体膜上分离、继续执行转运功能，或者进入蛋白酶体途径降解，或者在过氧化酶体膜上招募自噬衔接蛋白(NBR1、p62等)引起过氧化物酶体自噬(Pexophagy)。WalkerC.L.团队首次报道，ROS可以导致胞质中结节性硬化综合征蛋白复合体(Tuberous sclerosiscomplex，TSC)定位至过氧化物酶体，发挥抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Themammaliantargetofrapamycin，mTOR)信号通路的功能，启动细胞自噬。TSC是由TSC1和TSC2组成的异二聚体，其中TSC2含有PTS1信号序列，可被PEX5识别转运。他们团队研究还发现，ROS能够激活毛细血管扩张性共济失调突变蛋白(Ataxia
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telangiectasiamutated，ATM，含PTS1序列)，并且被PEX5搬运至过氧化物酶体上，同时PEX5被ATM磷酸化，启动PEX5的单个泛素化修饰，进而引起过氧化物酶体自噬。
[0004]目前，随着病毒生物学的发展，种类繁多的病毒载体已越来越成为向各种实验系统(如细胞系、原代细胞、组织脏器等)转运核酸的重要工具。主流的病毒载体系统主要包括慢病毒(LV)、(γ
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)逆转录病毒(RV)、腺病毒(Ad)和腺相关病毒(AAV)。病毒载体在基因转染方面的独特优势，已经被广泛认可。但也有其限制性，主要是生物安全性，存在潜在的生物学危险，可能引起人或动物严重免疫及毒副反应。探索将慢病毒载体直接为临床所用时的安全性因素，以使其为患者所服务，仍是现有技术上的瓶颈。纳米技术为癌症治疗提供了新的机会，使用纳米颗粒作为佐剂，从而实现载药靶向治疗癌症。越来越多具有专属特性的纳米药物被设计出来，它们在机体内不仅能够免受降解和快速清除，同时能够准确进入肿瘤组织，具有渗透性强和保留时间久的优势以及与肿瘤微环境反应的特性。尽管在构建肿瘤
特异性纳米载体方面取得了越来越多的成功，但大多数商业化产品(例如脂质体、胶束和聚合物)都存在分解不当、负载不足和耗时/成本高昂的构建问题。因此，探索合成简单、稳定性高、同时具有优异性能的纳米药物是一个挑战。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于为避免病毒载体存在潜在的生物学危险以及肿瘤特异性纳米载体大多数商业化产品都存在分解不当、负载不足和耗时/成本高昂的构建问题，提供一种生物安全性高且能提高癌症治疗效果的药物。
[0006]基于上述目的，本申请通过提供一种纳米金佐剂联合siRNA
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PEX5的药物来解决该领域中的这种需要。
[0007]一方面，本专利技术涉及一种纳米金佐剂联合siRNA
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PEX5的药物，其包含纳米金佐剂和HAS
‑
siRNA
‑
PEX5；
[0008]所述纳米金佐剂包括氯金酸和HEPES；
[0009]所述HAS
‑
siRNA
‑
PEX5包括人血清白蛋白和siRNA
‑
PEX5；
[0010]所述siRNA
‑
PEX5为一段靶向敲除PEX5的siRNA片段，所述siRNA的核苷酸序列为5
’‑
AATCCTGAGTTACATCCACAG
‑3’
。
[0011]进一步地，本专利技术提供的纳米金佐剂联合siRNA
‑
PEX5的药物中，所述纳米金联合siRNA
‑
PEX5的药物中，以摩尔比计，所述纳米金佐剂和HAS
‑
siRNA
‑
PEX5的配比为1:1
‑
3:1。
[0012]进一步地，本专利技术提供的纳米金佐剂联合siRNA
‑
PEX5的药物中，所述纳米金佐剂中，以摩尔比计，所述氯金酸和HEPES的配比为1:5。
[0013]进一步地，本专利技术提供的纳米金佐剂联合siRNA
‑
PEX5的药物中，所述HAS
‑
siRNA
‑
PEX5中，以摩尔比计，所述人血清白蛋白和siRNA
‑
PEX5的配比为1:1
‑
1:5。
[0014]进一步地，本专利技术提供的纳米金佐剂联合siRNA
‑
PEX5的药物中，其制备方法包括：依次添加TCEP、所述人血清白蛋白和所述siRNA
‑
PEX5，制得所述HAS
‑
siRNA
‑
PEX5；
[0015]将所述氯金酸和所述HEPES(pH＝7.4)的酸性缓冲液在加热(温度40
‑
50℃)条件下混合搅拌，直到溶液变为紫红色，即为所述纳米金佐剂；
[0016]将所述HAS
‑
siRNA
‑
PEX5和所述纳米金佐剂混合，即为所述纳米金佐剂联合siRNA
‑
PEX5的药物。
[0017]进一步地，本专利技术提供的纳米金佐剂联合siRNA
‑
PEX5的药物中，所述纳米金佐剂联合siRNA
‑
PEX5的药物含有Au
‑
S键；
[0018]所述纳米本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种纳米金佐剂联合siRNA
‑
PEX5的药物，其特征在于，包含纳米金佐剂和HAS
‑
siRNA
‑
PEX5；所述纳米金佐剂包括氯金酸和HEPES；所述HAS
‑
siRNA
‑
PEX5包括人血清白蛋白和siRNA
‑
PEX5；所述siRNA
‑
PEX5为一段靶向敲除PEX5的siRNA片段，所述siRNA的核苷酸序列为5
’‑
AATCCTGAGTTACATCCACAG
‑3’
。2.根据权利要求1所述的纳米金佐剂联合siRNA
‑
PEX5的药物，其特征在于，所述纳米金联合siRNA
‑
PEX5的药物中，以摩尔比计，所述纳米金佐剂和HAS
‑
siRNA
‑
PEX5的配比为1:1
‑
3:1。3.根据权利要求1所述的纳米金佐剂联合siRNA
‑
PEX5的药物，其特征在于，所述纳米金佐剂中，以摩尔比计，所述氯金酸和HEPES的配比为1:5。4.根据权利要求1所述的纳米金佐剂联合siRNA
‑
PEX5的药物，其特征在于，所述HAS
‑
siRNA
‑
PEX5中，以摩尔比计，所述人血清白蛋白和siRNA
‑
PEX5的配比为1:1
‑
1:5。5.根据权利要求1所述的纳米金佐剂联合siRNA
‑
PEX5的药物，其特征在于，制备方法包括：依次添加TCEP、所述人血清白蛋白和所述siRNA
‑
PE...

【专利技术属性】
技术研发人员：马瑾璐，蔡梦娇，陈洁，
申请(专利权)人：西安交通大学医学院第一附属医院，
类型：发明
国别省市：