本发明专利技术公开了一种高产RNA、辅酶I和人畜可食用蛋白3种产品的产朊假丝酵母菌种，其分类命名为产朊假丝酵母(Candida utilis)，菌株号为WZX2103，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为24238，保藏日期为2022年01月04日。本发明专利技术还公开了应用等离子诱变反复培养筛选方法获得高产18.1％RNA、4.1g/Kg辅酶I和菌浓118g/L的产朊假丝酵母菌WZX2103的方法，以及它的发酵生产和应用。以及它的发酵生产和应用。
【技术实现步骤摘要】
高产RNA、辅酶l和蛋白的菌种选育和应用
[0001]本专利技术涉及微生物
，具体涉及一种高产RNA、辅酶Ⅰ和可食用蛋白的产朊假丝酵母菌、以及其菌种获得方法和它的发酵生产和应用。
技术介绍
[0002]核糖核酸(Ribonucleic acid，简称RNA)是一类极为重要的生物大分子物质，属于两大类核酸之一。RNA及其降解物在婴儿奶粉营养强化剂、医药中间体以及农业生产、饲料工业等行业都有着重要的作用。辅酶Ⅰ是生物机体组织必须的一种辅酶，在生物氧化过程中起着传递氢的作用，能活化多酶系统，促进核酸、蛋白质、多糖的合成及代谢，提高物质转运和调节控制，改善代谢功能。同时，辅酶Ⅰ在修复心脏缺血性损伤，抑制细胞凋亡，抵抗和修复辐射或化学药物毒性等方面具有不可替代作用，将为抗衰老、防治心血管、肿瘤等疾病带来新的启示和帮助；它具有很高附加值。
[0003]目前，关于高产RNA的热带假丝酵母菌种的应用已有许多报道，例如文献1，李祥鹏等《工业微生物》1986,12(3)；文献2，周长林等ZL2010105787X；文献3，邱蔚然等ZL2010105789；文献4，岳秀宏等《中国酿造》2019,38(07)；文献5，黄芳《中国酿造》2019,38(06)。文献1
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5主要是介绍热带假丝酵母菌种选育和发酵生产高含量RNA的应用。其缺点是菌种选育主要是应用较传统的紫外诱变和亚硝基胍等化学诱变方法，且热带假丝酵母是致病菌，应用其生产食品级RNA或人畜食用蛋白存在着生物安全性等问题，而且干酵母的RNA含量一般都在12
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16％。文献6，蒋雪薇等《食品科学》2017,38(10)，它是采用传统的紫外和化学诱变方法，获得16.8％高产RNA菌种，干菌体收获量21.3g/L，但是没有更高附加值相关产品同时制造。文献7，李小坤,华南理工大学硕士论文,2018.4；论文中介绍了酿酒酵母应用等离子诱变获得高产RNA的方法。其RNA含量14.2％(142mg RNA/g DCW)，但是由于酿酒酵母生长较慢，产率较低。按其OD
600
推算，菌浓只能达到30g/L(8g/L干菌体)。
[0004]文献8，Takuo Sakai等,Agr,Biol.chem,197337(5)，文献9，王伟等，中国专利，CN111733198A，报道了应用面包酵母或啤酒酵母通过2次发酵培养，添加前体，制造辅酶I的方法，其缺点是先要发酵培养酵母，然后添加烟酸、烟酰胺、或腺嘌呤等辅酶I的前体，再发酵生成辅酶I的方法，这些方法工艺繁杂，并且由于加入前体物质价格较贵，生产成本较高。
技术实现思路
[0005]本专利技术的目的在于针对现有技术的缺陷和不足，提供一种高产RNA、辅酶Ⅰ和食用蛋白的产朊假丝酵母菌及其菌种获得方法和此菌种的应用，避免以前方法的缺陷，选用人畜可食用产朊假丝酵母菌株，应用新型等离子诱变技术及反复优选等培养方法，获得了高产RNA、辅酶I和食用蛋白的WZX2103菌株。
[0006]为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是：一种高产RNA、辅酶Ⅰ和食用蛋白的产朊假丝酵母菌，其分类命名为产朊假丝酵母(Candida utilis)，菌株号为WZX2103，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为24238，地址：北京市朝阳
区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101，保藏日期为2022年01月04日。
[0007]本专利技术的实施例还提供一种WZX2103产朊假丝酵母菌的获得方法，其特征在于，所述WZX2103产朊假丝酵母菌通过所购入的产朊假丝酵母菌菌种活化培养，再用ARTP诱变育种技术多次诱变，最后分离纯化培养，得到多株突变株；筛选出ZX2103产朊假丝酵母菌菌种。
[0008]进一步的，筛选产朊假丝酵母菌菌种方法如下：ARTP诱变后，将多株突变株用生理盐水分散均匀，然后划线或涂布培养，再挑选单菌落在斜面培养基、28℃恒温培养箱中培养，待其在斜面上长满菌后，分别接入装有50ml摇瓶培养基的摇瓶中培养18h后，取样分别检测RNA和辅酶Ⅰ含量，筛选出ZX2103产朊假丝酵母菌菌种。
[0009]本专利技术的实施例另外还提供WZX2103产朊假丝酵母菌在发酵生产核糖核酸或辅酶Ⅰ中的应用。
[0010]进一步的，将WZX2103产朊假丝酵母菌先经种子培养，再经发酵培养，制备核糖核酸与辅酶Ⅰ。
[0011]其中，所述种子培养过程如下：将WZX2103产朊假丝酵母菌用生理盐水分散均匀，然后划线或涂布培养，再挑选单菌落在斜面培养基、28℃恒温培养箱中培养，待其在斜面上长满菌后，接入装有50ml摇瓶培养基的摇瓶中培养18h。
[0012]优选的，所述斜面培养基的配方包括：5％Be＇麦芽汁与2％琼脂。
[0013]优选的，所述摇瓶培养基的配方如下：硫酸镁1.2g，硫酸铵0.3g，尿素1.2g，硫酸锌0.15g，硫酸亚铁0.15g，氯化钠0.1g，糖蜜40g，磷酸1.8ml，pH5.0。
[0014]其中，所述发酵培养过程如下：30L发酵罐空罐灭菌121℃，20分钟；加入发酵培养基18L；然后实罐灭菌，115℃，20分钟；接入摇瓶WX2103菌种1L，转速300
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500rpm，逐步高升，通风1.2M3/min
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2M3/min，溶氧保持10
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15，温度32
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33℃，pH 4.2；发酵12h。
[0015]优选的，发酵培养基的配方如下：硫酸镁20.4g，尿素20.4g，硫酸铵5.1g，硫酸锌2.55g，硫酸亚铁2.55g，氯化钠1.7g，磷酸34ml，糖蜜水3.52L(糖蜜按1:1.8稀释总糖18％)，自来水13.48L，pH 4.04。
[0016]一种产朊假丝酵母菌在提取核糖核酸或辅酶Ⅰ后作为人畜食用蛋白的应用。
[0017]采用上述技术后，本专利技术有益效果为：
[0018](1)本专利技术的产朊假丝酵母采用常温常压等离子体诱变技术诱变(ARTP诱变育种技术)，ARTP诱变育种技术在常温常压下进行，具有高效、普遍、快速、便捷、安全等优点，是一种新型的诱变技术，其原理是改变微生物细胞壁/膜的结构及通透性，并引起基因损伤，进而使微生物基因序列及其代谢网络发生显著变化，对于微生物产生多重作用，从而获得多株突变株，然后从中筛选出高产RNA和辅酶Ⅰ的菌种，并命名为WZX2103产朊假丝酵母菌株。
[0019](2)本专利技术通过检测诱变获得菌种反复培养筛选获得双高产RNA和辅酶Ⅰ的菌种，这种菌种可同时分离和提取RNA和辅酶Ⅰ两种有开发价值和附加值较高的产品，提取后RNA和辅酶Ⅰ的菌体是一种蛋白含量较高的人畜可食用蛋白，由于提取时需要破壁，故而其作为蛋白更易为人或饲养家畜、鱼苗、幼虾等吸收。
[0020](3)本专利技术获得的高产RNA、辅酶I和食用蛋白的WZX2103菌株。其RNA含量可达
18.1％，辅酶I含量可达本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种高产RNA、辅酶I和食用蛋白的产朊假丝酵母菌，其分类命名为产朊假丝酵母(Candida utilis)，菌株号为WZX2103，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为24238，保藏日期为2022年01月04日。2.一种权利要求1所述产朊假丝酵母菌菌种的获得方法，其特征在于，所述WZX2103产朊假丝酵母菌通过所购入的产朊假丝酵母菌菌种活化培养，再用ARTP诱变育种技术多次诱变，最后分离纯化培养，得到多株突变株；筛选出ZX2103产朊假丝酵母菌菌种。3.根据权利要求2的方法，其特征在于，筛选产朊假丝酵母菌菌种方法如下：ARTP诱变后，将多株突变株用生理盐水分散均匀，然后划线或涂布培养，再挑选单菌落在斜面培养基、28℃恒温培养箱中培养，待其在斜面上长满菌后，分别接入装有50ml摇瓶培养基的摇瓶中培养18h后，取样分别检测RNA和辅酶I含量，筛选出ZX2103产朊假丝酵母菌菌种。4.一种权利要求1所述产朊假丝酵母菌在发酵生产核糖核酸或辅酶I中的应用。5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，将WZX2103产朊假丝酵母菌先经种子培养，再经发酵培养，制备得到核糖核酸与辅酶I。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述种子培养过程如下：将WZX2103产朊假丝酵母菌用生理盐水分散均匀，然后划线或涂布培养，再挑选单菌落在斜面培养基、28...
【专利技术属性】
技术研发人员：邱蔚然，武琳，欧伶，陈修足，卢建祥，莫违，仝争，
申请(专利权)人：上海蔚之星生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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