师岗链霉菌菌株SGX33及其应用制造技术

本发明专利技术属于土壤微生物的应用和农作物病害防治技术领域。本发明专利技术公开了师岗链霉菌(Streptomyces morookaense)菌株SGX33，其保藏号为CGMCC No.25350。该菌株SGX33已于2022年7月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，该中心简称为CGMCC，该中心地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，该菌株保藏号为CGMCCNo.25350。本发明专利技术提供的菌株在真菌病害的防治显示了明显的防控效果。另外可以在pH4

【技术实现步骤摘要】
师岗链霉菌菌株SGX33及其应用


[0001]本专利技术属于土壤微生物的应用和农作物病害防治


技术介绍

[0002]真菌性病害是造成农作物产量和品质降低的最主要原因。化学农药的频繁使用导致一些病原真菌抗药性急剧增强、造成环境与农产品的污染，以及破坏植物体内外微生物平衡而加剧病害的爆发流行等。生物防控是实现真菌病害绿色防控的重要途径，相关研究一直以来是一个热点和难点。多年来人们也筛选到了很多拮抗真菌的生防菌，如芽孢杆菌类和假单胞菌用于多种真菌病害的生物防治，木霉用于纹枯病菌与根腐病在内的各种病害的生物防治，也有很多链霉菌用于真菌病害的防治，如灰褐色链霉菌用于稻瘟病的防治、灰绿链霉菌用于棉花枯萎病的防治、氢化链霉菌和金黄垂直链霉菌用于各种土传真菌病害的防治等。这些生防菌株虽然都具有较强的抗真菌活性，但很多菌株的耐酸性和耐盐性差，不适合酸性土壤、盐碱和盐渍土壤的定殖，限制了其应用范围及生防功效的发挥。在农业生产的实际应用中存在很大的局限性。
[0003]由于各种因素影响，全球土壤酸化和盐渍化问题日益严重。全国土壤质量普查数据，我国酸性土、盐碱土面积占耕地总面积的60％。土壤酸化和盐渍化会导致土壤生物学性能降低，土壤微生物生态失衡，尤其是酸性土壤真菌病害发生加重，严重降低了土壤的生产性能。生产上亟需能够在酸性土、盐渍化土和盐碱土中能够定殖并能发挥生防功能的有益微生物，进行真菌病害的生物防控。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的第一目的是提供了师岗链霉菌(Streptomyces morookaense)菌株SGX33，其保藏号为CGMCC No.25350。
[0005]本专利技术的第二目的是提供了微生物菌剂，含有所述师岗链霉菌(Streptomyces morookaense)菌株SGX33。
[0006]本专利技术第三目的是提供了组合物，包括所述师岗链霉菌(Streptomyces morookaense)菌株SGX33。
[0007]本专利技术第四目的提供了师岗链霉菌(Streptomyces morookaense)菌株SGX33在制备耐盐制剂中应用，所述耐盐的NaCl质量浓度不高于2％。
[0008]本专利技术第五目的提供了师岗链霉菌(Streptomyces morookaense)菌株SGX33在制备耐酸碱制剂中应用，所述耐酸碱的pH范围为pH4
‑
10。
[0009]本专利技术第六目的提供了师岗链霉菌(Streptomyces morookaense)菌株SGX33在制备抗真菌制剂中应用，所述真菌为香蕉枯萎病菌、番茄枯萎病菌、小麦根腐病菌、黄瓜立枯病菌、番茄叶斑病病菌、柑桔炭疽病和/或蔬菜灰霉病菌。
[0010]本专利技术提供的菌株在真菌病害的防治显示了明显的防控效果。另外可以在pH4
‑
10范围内生长，耐受2％的盐浓度，是一株具有广泛pH适应范围和耐盐性的链霉菌，可以在酸
性土壤、盐碱和盐渍土壤中定殖并对土传真菌病害发挥生防作用。
附图说明
[0011]图1是菌株SGX33在MS培养基上的生长形态及扫描电镜观察图。
[0012]其中，A为MS培养基上的生长形态图，B为扫描电镜观察图。
[0013]图2是师岗链霉菌SGX33对多种植物病原菌的拮抗作用图。
具体实施方式
[0014]以下的实施例便于更好地理解本专利技术，但并不限定本专利技术。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。
[0015]以下实施条例中，用到如下培养基：
[0016]高氏一号培养基：可溶性淀粉20g，KNO
3 1g，K2HPO
4 0.5g，MgSO4·
7H2O 0.5g，NaCl 0.5g，FeSO4·
7H2O 0.01g，NaCl 0.5g，琼脂20g，自来水定容到1000mL，pH 7.2～7.4。
[0017]PDA培养基：马铃薯葡萄糖琼脂培养基，马铃薯200g煮沸30分钟后过滤取滤液，葡萄糖20g，琼脂15
‑
20g，自来水定容到1000ml，自然pH；115℃高温灭菌。
[0018]MS培养基：黄豆粉20g加水提前煮沸至糊状，露醇20g，琼脂15
‑
20g，自来水定容到1000mL，自然pH。
[0019]2×
YT液体培养基：蛋白胨16g，酵母粉10g，NaCl 5g，自来水定容到1000mL，自然pH。
[0020]实施例1
[0021]菌株的分离、鉴定及生物学特性
[0022]一、菌株的分离和纯化
[0023]2018年9月从广西南宁田间中分离得到了若干株放线菌，过程如下：1g样品加于灭菌的装有小玻璃珠和99ml无菌生理盐水的300ml三角瓶中，28℃摇床培养1h。取l ml悬液，采用梯度稀释的方法稀释到10
‑4，取原液、10
‑2稀释液和10
‑4稀释液分别涂布重铬酸钾终浓度为50μg/ml高氏一号培养基，分别于第5天、第7天和第10天挑取单菌落，再采用平板划线法于PDA培养基上进行纯化和分离培养，命名为菌株SGX33。
[0024]利用20％甘油保存所得纯化菌株于
‑
80℃。
[0025]二、菌株的鉴定
[0026]1、形态学特征
[0027]分离自广西田间的菌株SGX33的形态特征，运用平板划线的方法在培养基接种培养后进行形态观察，菌株SGX33在各种培养基上的菌落特征见表1。
[0028]表1.菌株SGX33的菌落特征
[0029][0030]菌株SGX33在各种培养基上的菌落特征见表1。其中在MS和PDA培养基上生长速度较快，在高氏一号培养基上生长速度较慢。在MS培养基上，气生菌丝微白色(图1A)。扫描电镜观察菌丝直型，分枝少(图1B)。
[0031]2、分子鉴定
[0032]PCR扩增16S rDNA采用通用引物：27F：5'
‑
AGAGTTTGATCCTGGCTCAG
‑
3'；1492R：5'
‑
GGTTACCTTGTTACGACTT
‑
3。扩增片段大小约1473bp，退火温度为55℃。
[0033]gyrB扩增引物：gyrBF：5'
‑
TTATCTACGACCTTAGACG
‑
3'；gyrBR：5'
‑
TAAATTGAAGTCTTCTCCG
‑
3'。扩增片段大小约1045bp，退火温度为55℃。
[0034]PCR反应程序为：95℃5min；95℃30s，56℃90s，72℃60s(33cycles)；72℃10min；4℃。
[0035]扩增序列进行纯化测序后，通过NCBI的Bla本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.师岗链霉菌(Streptomyces morookaense)菌株SGX33，其保藏号为CGMCC No.25350。2.微生物菌剂，其特征在于，含有权利要求1所述师岗链霉菌(Streptomyces morookaense)菌株SGX33。3.组合物，其特征在于，包括权利要求1所述师岗链霉菌(Streptomyces morookaense)菌株SGX33。4.权利要求1所述师岗链霉菌(Streptomyces morookaense)菌株SGX33在制备耐盐制剂中应用，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙宪昀，李少杰，余义发，梁丰收，梁承，胡成成，
申请(专利权)人：南宁汉和生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：