一种即用型无菌MEM液体培养基的制备方法及其产品技术

本发明专利技术公开了一种即用型无菌MEM液体培养基的制备方法及其产品，属于培养基制备技术领域。本发明专利技术在水中添加磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、hepe's粉末和碳酸氢钠，调节溶液pH值和渗透压，然后进行无菌处理，得到培养基液体；对MEM粉末进行辐照处理，与所述培养基液体混合后，得到所述即用型无菌MEM液体培养基。本发明专利技术的MEM液体培养基用于体外培养贴壁细胞，可促进细胞的增殖代谢。本发明专利技术将无菌培养基液体与无菌MEM粉末分装，使用时采用现用现配的方式，既方便保存，又可延长保存时间，能够确保长期使用。用。用。

【技术实现步骤摘要】
一种即用型无菌MEM液体培养基的制备方法及其产品


[0001]本专利技术属于培养基制备
，特别是涉及一种即用型无菌MEM液体培养基的制备方法及其产品。

技术介绍

[0002]MEM液体培养基不含非必需氨基酸，含Earle
’
s混合盐，D
‑
葡萄糖，谷氨酰胺，碳酸氢钠等，pH值7.0
‑
7.4。MEM液体培养基是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，是一种最基本、适用范围最广的培养基，是动物细胞培养中最常用的培养基之一，添加血清后，可用于培养多种单层生长的细胞，如成纤维细胞。能降低细胞培养时细胞自身生产非必需氨基酸的副作用，有效促进细胞增殖代谢。
[0003]目前，配置好的无菌MEM液体培养基当中都是包含谷氨酰胺的，谷氨酰在溶液中容易降解，因此，市面上配置好的无菌MEM液体培养基保质期都比较短，购买货期又较长，且需要低温保存，不利于长期保存使用。因此，如何制备一种保存期限长且细胞培养效果好的无菌MEM液体培养基，具有重要的研究意义。

技术实现思路

[0004]针对上述现有技术中存在的缺陷或不足，本专利技术的目的在于提供一种即用型无菌MEM液体培养基的制备方法及其产品，本专利技术的MEM液体培养基用于体外培养贴壁细胞，可促进细胞的增殖代谢。本专利技术将无菌培养基液体与无菌MEM粉末分装，使用时采用现用现配的方式，既方便保存，又可延长保存时间，能够确保长期使用。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0006]本专利技术目的之一是提供一种即用型无菌MEM液体培养基的制备方法，包括如下步骤：
[0007]在水中添加磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、hepe's粉末和碳酸氢钠，调节溶液pH值和渗透压，然后进行无菌处理，得到培养基液体；
[0008]对MEM粉末进行辐照处理，与所述培养基液体混合后，得到所述即用型无菌MEM液体培养基。
[0009]进一步地，所述水(室温超纯水)、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、hepe's粉末和碳酸氢钠的比例为100mL：2
‑
5g：2
‑
5g：3
‑
6g：0.1
‑
0.5g，优选为100mL：3.28g：3.28g：4.766g：0.225g。
[0010]进一步地，所述pH值为7.1
‑
7.4，所述渗透压为280
‑
320mOsm/kg。
[0011]进一步地，所述辐照处理的辐照剂量为11
‑
18KGy。
[0012]进一步地，所述MEM粉末与培养基液体的质量体积比为0.8
‑
1.2g：100mL，优选为0.953g：100mL。
[0013]进一步地，所述MEM粉末与培养基液体分开保存，使用时现用现配。
[0014]本专利技术目的之二是提供一种所述的制备方法制得的即用型无菌MEM液体培养基。
[0015]本专利技术的有益效果：
[0016]本专利技术的MEM粉末通过辐照达到无菌效果，而培养基液体通过添加磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、hepe's粉末和碳酸氢钠等缓冲溶液将其pH值和渗透压调制到合适的条件，后进行无菌处理。将无菌培养基液体与无菌MEM粉末分装，使用时采用现用现配的方式，既方便保存，又可延长保存时间。本专利技术的MEM液体培养基用于体外培养贴壁细胞，可促进细胞的增殖代谢，解决了液体培养基长期保存易导致谷氨酰胺以及其他营养物质降解的问题。另外，由于本专利技术的MEM液体培养基保存时间长，可降低培养基的运输和保存条件，有助于保持培养基营养物质的完整性，解决了长期运输带来的产品质量问题，为购买者提供了极大的便利。
附图说明
[0017]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单的介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0018]图1为商品化无菌MEM培养基培养293T/17细胞72h的结果；
[0019]图2为实施例1制备的即用型无菌MEM液体培养基培养293T/17细胞72h的结果。
具体实施方式
[0020]为使本领域技术人员更好地理解本专利技术的技术方案，下面结合实施例对本专利技术作进一步详细描述。
[0021]实施例1
[0022]在100mL室温的超纯水中添加3.28g磷酸二氢钠、3.28g磷酸氢二钠、4.766g的hepe's粉末和0.225g碳酸氢钠，调节溶液pH值为7.1
‑
7.4，渗透压为280
‑
320mOsm/kg，然后进行过滤除菌、密封保存，得到培养基液体；
[0023]对MEM粉末进行辐照处理，辐照剂量为11
‑
18KGy。不使用时MEM粉末和培养基液体室温分开放置，使用时现用现配，将0.953g辐照后的MEM粉末与100mL培养基液体混合，得到即用型无菌MEM液体培养基，保存时间为2年。
[0024]将本实施例的即用型无菌MEM液体培养基用于贴壁细胞培养，293T/17细胞培养结果如图2所示，常用商品化无菌MEM培养基(来源：内蒙古金源康生物工程股份有限公司)作为对照，293T/17细胞培养结果如图1所示。293T/17细胞经过商品化无菌MEM培养基和本实施例的即用型无菌MEM液体培养基分别培养72h后，其增殖速度、细胞形态、分布情况、复层情况、透光情况、汇合度均无异，甚至略优于商品化无菌MEM培养基，可见其使用效果极佳。
[0025]实施例2
[0026]在100mL室温的超纯水中添加2g磷酸二氢钠、2g磷酸氢二钠、3g的hepe's粉末和0.1g碳酸氢钠，调节溶液pH值为7.1
‑
7.4，渗透压为280
‑
320mOsm/kg，然后进行过滤除菌、密封保存，得到培养基液体；
[0027]对MEM粉末进行辐照处理，辐照剂量为11
‑
18KGy。使用时将0.8g辐照后的MEM粉末与100mL培养基液体混合，得到即用型无菌MEM液体培养基，保存时间为2年。
[0028]实施例3
[0029]在100mL室温的超纯水中添加5g磷酸二氢钠、5g磷酸氢二钠、6g的hepe's粉末和0.5g碳酸氢钠，调节溶液pH值为7.1
‑
7.4，渗透压为280
‑
320mOsm/kg，然后进行过滤除菌、密封保存，得到培养基液体；
[0030]对MEM粉末进行辐照处理，辐照剂量为11
‑
18KGy。使用时将1.2g辐照后的MEM粉末与100mL培养基液体混合，得到即用型无菌MEM液体培养基，保存时间为2年。
[0031]以上所述的实施例仅是对本专利技术的优选方式进行描述，并非对本专利技术的范围本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种即用型无菌MEM液体培养基的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：在水中添加磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、hepe's粉末和碳酸氢钠，调节溶液pH值和渗透压，然后进行无菌处理，得到培养基液体；对MEM粉末进行辐照处理，与所述培养基液体混合后，得到所述即用型无菌MEM液体培养基。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述水、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、hepe's粉末和碳酸氢钠的比例为100mL：2
‑
5g：2
‑
5g：3
‑
6g：0.1
‑
0.5g。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：张舒博，赵峻岭，黄新朋，
申请(专利权)人：内蒙古奥普赛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：