【技术实现步骤摘要】
检测IGH基因重排及超突变的引物组、方法和系统
[0001]本专利技术属于分子生物学
,更具体地,本专利技术涉及一种检测IGH基因重排及超突变的引物组、试剂盒、系统和方法。
技术介绍
[0002]淋巴细胞不同于体内的其他体细胞,在发育过程中,淋巴细胞中的抗原受体基因发生体细胞基因重排。例如,在B细胞发育过程中,编码IGH分子的基因由多个多态基因片段组装而成,这些基因片段经历重排和选择,产生长度和序列均独一无二的VH
‑
DH
‑
JH组合。由于白血病和淋巴瘤起源于个体淋巴细胞的恶性转化,个体的白血病或淋巴细胞通常共享一个或多个细胞特异性或“克隆”抗原受体基因重排。因此,检测IGH克隆重排的测试可用于B细胞肿瘤的研究。
[0003]此外,免疫球蛋白重链可变区(IGHV)基因超突变状态为慢性淋巴细胞白血病(CLL)和小淋巴细胞淋巴瘤(SLL)患者提供了重要的预后信息。IGHV体细胞超突变(SHM)的存在被定义为与种系VH基因序列的差异大于或等于2%,而小于2%的差异被认为是没有SHM ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种检测IGH基因重排及超突变的引物组,其特征在于,所述引物组包括:序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.7所示的正向引物、以及序列如SEQ IDNO.8所示的反向引物。2.权利要求1所述的引物组在制备检测IGH基因重排及超突变的试剂盒中的应用。3.一种检测IGH基因重排及超突变的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的检测IGH基因重排及超突变的引物组。4.根据权利要求3所述的检测IGH基因重排及超突变的试剂盒,其特征在于,所述引物组的工作浓度为3μM~5μM。5.一种检测IGH基因重排及超突变的方法,其特征在于,包括以下步骤:以待测样本的DNA为模板,采用权利要求3或4所述试剂盒进行IGH基因序列的PCR扩增,对扩增产物进行末端修复后,连接特异性接头,再进行文库扩增,对文库进行上机测序。6.根据权利要求5所述的检测IGH基因重排及超突变的方法,其特征在于,所述PCR扩增的反应体系包括:ddH2O 10.15
±
0.1μL、10
×
Buffer 2
±
0.1μL、MgCl21.2
±
0.1μL、dNTP Mix 0.4
±
0.1μL、引物组混合物1
±
0.1μL、DNA Polymerase 0.25
±
0.05μL、DNA 5
±
...
【专利技术属性】
技术研发人员:郭慈琳,李露,易煜庭,胡昌明,王华文,甘立佳,
申请(专利权)人:广州金域医学检验集团股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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