用于制备抗平滑肌抗体质控品的组合物、抗平滑肌抗体质控品和试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种用于制备抗平滑肌抗体质控品的组合物、抗平滑肌抗体质控品和试剂盒。该组合物由基质和添加剂组成，基质包括胎牛血清和新生牛血清中的至少一种，添加剂包括吗啉乙磺酸，在组合物中，牛血清体积与吗啉乙磺酸的质量之比为1L：(6.5g～10.2g)；组合物的pH为5.8～6.38。所采用的抗平滑肌抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。采用该组合物可替代人血清制备的抗平滑肌抗体质控品，且制得的抗平滑肌抗体质控品的稳定性好。且制得的抗平滑肌抗体质控品的稳定性好。且制得的抗平滑肌抗体质控品的稳定性好。

【技术实现步骤摘要】
用于制备抗平滑肌抗体质控品的组合物、抗平滑肌抗体质控品和试剂盒


[0001]本专利技术涉及免疫检测
，特别是涉及一种用于制备抗平滑肌抗体质控品的组合物、抗平滑肌抗体质控品和试剂盒。

技术介绍

[0002]抗平滑肌抗体(anti
‑
smooth muscle antibody，简称ASMA或SMA)是自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis，AIH)的血清学标志物，是一类以细胞骨架蛋白为靶抗原的自身抗体，主要有IgG类型和IgM类型。不同抗体类型，可见于不同疾病。当抗体以IgG为主，多见于AIH患者，亦见于其他一些疾病，例如支原体肺炎、干燥综合征、类风湿关节炎、梅毒等；当IgG和IgM同时出现，多见于原发性胆汁性肝硬化与AIH重叠患者；当抗体以IgM为主时，与酒精性肝炎相关。ASMA是一类以细胞骨架蛋白为靶抗原的自身抗体，在AIH患者中的阳性率高达80％，其滴度越高，诊断AIH的敏感性越好。
[0003]SMA的检测主要依赖于医学实验室的检测。医学实验室的质控目的就在于检测和控制本实验室常规工作精密度以及检测其准确度的改变，以提高常规工作中标本检测的一致性，从而保证检验报告的准确发出。故研发一种适用于临床实验室、第三方体检中心、省市临检中心等医学实验室开展有抗平滑肌抗体项目进行标本检测时质量评价的质控品，对SMA项目的检测结果可靠性和准确性有重要的保障。这也要求该质控品是一种近似病人样本的质控品，具有较高稳定性，有助于无偏倚评估或验证试剂盒和仪器的性能，以达到与标本检测一致性、减少检测误差的目的。
[0004]目前，市场上的抗平滑肌抗体质控品主要采用人血清配制，但临床血清获取较为困难，不利于批量化生产。

技术实现思路

[0005]基于此，有必要提供一种用于制备抗平滑肌抗体质控品的组合物，该组合物能够替代人血清配制抗平滑肌抗体质控品，以改善因采用人血清而引起的原料获取困难的问题，利于抗平滑肌抗体质控品批量化生产，提高SMA项目的检测结果可靠性和准确性。
[0006]一种用于制备抗平滑肌抗体质控品的组合物，所述组合物由基质和添加剂组成，所述基质包括胎牛血清和新生牛血清中的至少一种，所述添加剂包括吗啉乙磺酸，在所述组合物中，所述牛血清体积与所述吗啉乙磺酸的质量之比为1L：(6.5g～10.2g)，所述组合物的pH为5.8～6.38。
[0007]上述用于制备抗平滑肌抗体的组合物采用牛血清作为主要基质，并将其pH设置为5.8～6.38，牛血清体积与吗啉乙磺酸的质量之比为1L：(6.5g～10.2g)。经验证，在制备抗平滑肌抗体质控品时，上述的用于制备抗平滑肌抗体质控品的组合物可以替代临床人血清，利于抗平滑肌抗体质控品批量化生产；并且采用该组合物制备的抗平滑肌抗体质控品的热稳定性好，冻干后的损失率小。
[0008]在其中一个实施例中，所述添加剂还包括防腐剂，所述防腐剂的工作浓度为0.01m/V％～0.5m/V％。
[0009]在其中一个实施例中，所述添加剂还包括牛血清白蛋白、酪蛋白和无机盐中的至少一种。
[0010]在其中一个实施例中，在所述组合物中，所述牛血清白蛋白的工作浓度为13.5g/L～16g/L；所述无机盐的浓度为3.2g/L～3.6g/L。
[0011]在其中一个实施例中，所述添加剂还包括冻干赋形剂，所述冻干赋形剂包括甘露醇和海藻糖中的至少一种；
[0012]进一步地，在所述组合物中，所述甘露醇的工作浓度为27g/L～32g/L；所述海藻糖的工作浓度为6.7g/L～8g/L。
[0013]一种抗平滑肌抗体质控品，所述抗平滑肌抗体质控品采用上述的用于制备抗平滑肌抗体质控品的组合物与抗平滑肌抗体混合而成，在所述组合物中，所述吗啉乙磺酸的浓度为3.9g/L～10.2g/L；
[0014]或者，所述抗平滑肌抗体质控品采用上述的用于制备抗平滑肌抗体质控品的组合物与抗平滑肌抗体混合后冻干而成，在所述组合物中，所述基质包括体积百分数为60％～65％的牛血清和35％～40％的水，所述吗啉乙磺酸的浓度为3.3g/L～3.9g/L。
[0015]在其中一个实施例中，所述抗平滑肌抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述抗平滑肌抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
[0016]一种抗平滑肌抗体质控品的制备方法，包括如下步骤：
[0017]将上述的用于制备抗平滑肌抗体质控品的组合物与抗平滑肌抗体混合，制备抗平滑肌抗体质控品，在所述组合物中，所述基质为牛血清，所述吗啉乙磺酸的工作浓度为3.9g/L～2g/L；
[0018]或者，将上述的用于制备抗平滑肌抗体质控品的组合物与抗平滑肌抗体混合后冻干，制备抗平滑肌抗体质控品，在所述组合物中，所述基质包括体积百分数为60％～65％的牛血清和35％～40％的水，所述吗啉乙磺酸的工作浓度为3.3g/L～3.9g/L。
[0019]在其中一个实施例中，所述冻干包括依次进行的预冻、第一干燥和第二次干燥，所述预冻按照如下条件依次进行：
‑
8℃～
‑
10℃条件下10min～50min，
‑
40℃～
‑
60℃条件下30min～120min，
‑
20℃～
‑
25℃条件下30min～120min，
‑
40℃～
‑
60℃条件下120min～240min；
[0020]所述第一次干燥按照如下条件依次进行：40℃～
‑
60℃和0.1mbar～0.2mbar条件下10min～30min，
‑
25℃～
‑
40℃和0.1mbar～0.2mbar条件下15h～30h，
‑
5℃～
‑
10℃和0.1mbar～0.2mbar条件下1h～3h；
[0021]所述第二次干燥按照如下条件依次进行：5℃～25℃和0.001mbar～0.01mbar条件下30min～60min，5℃～25℃和0.001mbar～0.01mbar条件下2h～10h。
[0022]一种检测抗平滑肌抗体的试剂盒，包括上述的抗平滑肌抗体质控品。
附图说明
[0023]图1为实施例1中的SMA IgG嵌合抗体纯化结果；
[0024]图2为实施例2中采用溶液1和溶液2配制的含有SMA IgG的两种溶液与采用临床血
清样本配制的含有SMA IgG的溶液中SMA IgG的浓度的相关性；
[0025]图3为实施例2中采用配方1～4配制的含有SMA IgG的四种溶液与采用临床血清样本配制的含有SMA IgG的溶液中SMA IgG的浓度的相关性；
[0026]图4为实施例4中冻干后SMA IgG的浓度与采用临床血清直接配制的溶液中SMA IgG的浓度的相关性；
[0027]图5为实施例7中的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于制备抗平滑肌抗体质控品的组合物，其特征在于，所述组合物由基质和添加剂组成，所述基质包括胎牛血清和新生牛血清中的至少一种，所述添加剂包括吗啉乙磺酸，在所述组合物中，所述牛血清体积与所述吗啉乙磺酸的质量之比为1L：(6.5g～10.2g)；所述组合物的pH为5.8～6.38。2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述添加剂还包括防腐剂，所述防腐剂的工作浓度为0.01m/V％～0.5m/V％。3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述添加剂还包括牛血清白蛋白、酪蛋白和无机盐中的至少一种。4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，在所述组合物中，所述牛血清白蛋白的工作浓度为13.5g/L～16g/L；所述无机盐的浓度为3.2g/L～3.6g/L。5.根据权利要求1～4任一项所述的组合物，其特征在于，所述添加剂还包括冻干赋形剂，所述冻干赋形剂包括甘露醇和海藻糖中的至少一种；进一步地，在所述组合物中，所述甘露醇的工作浓度为27g/L～32g/L；所述海藻糖的工作浓度为6.7g/L～8g/L。6.一种抗平滑肌抗体质控品，其特征在于，所述抗平滑肌抗体质控品采用权利要求1～4任一项所述的用于制备抗平滑肌抗体质控品的组合物与抗平滑肌抗体混合而成，在所述组合物中，所述吗啉乙磺酸的浓度为3.9g/L～10.2g/L；或者，所述抗平滑肌抗体质控品采用权利要求5所述的用于制备抗平滑肌抗体质控品的组合物与抗平滑肌抗体混合后冻干而成，在所述组合物中，所述基质包括体积百分数为60％～65％的牛血清和35％～40％的水，所述吗啉乙磺酸的浓度为3.3g/L～3.9g/L。7.根据权利要求6所述的抗平滑肌抗体质控品，其特征在于，所述抗平滑肌抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述抗平滑肌抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。8.一种抗平滑肌抗体质控品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将权利要求1～4任一项所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：何雨禧，吕庆琴，邱盛荣，林晓涛，项旭夫，朱岭峰，苏钰莹，彭成，
申请(专利权)人：深圳市昭蓝生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：