一种提高贝莱斯芽孢杆菌降解玉米赤霉烯酮效率的培养方法技术

本发明专利技术公开了一株可降解玉米赤霉烯酮的贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis PA26

【技术实现步骤摘要】
一种提高贝莱斯芽孢杆菌降解玉米赤霉烯酮效率的培养方法


[0001]本领域属于霉菌毒素降解
更具体地，涉及一株高效降解玉米赤霉烯酮的贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis PA26
‑
7菌株的发酵条件优化。

技术介绍

[0002]玉米赤霉烯酮(Zearalenone，ZEN)又称F
‑
2毒素，是由镰刀菌属真菌产生的具有二羟基二甲酸内酯结构的雌激素类真菌毒素。玉米、水稻、小麦、高粱等谷物及其制品在生产、加工和运输等过程中极易受到ZEN的污染。ZEN性质稳定，可溶于碱性溶液和各种有机溶剂，其熔点达164
‑
165℃，因此在饲料和食品加工过程中均不易被破坏，已被国际癌症研究机构列为第三大类致癌物。因此，为保障农产品质量安全，建立高效可行的脱毒方法至关重要。
[0003]传统的物理和化学方法虽然也能一定程度解决ZEN毒素的污染问题，但存在对产品及环境造成二次污染、破坏谷物和饲料营养价值、成本高等缺点，在实际脱毒应用中具有一定的局限性。目前对ZEN的脱毒研究主要集中在生物领域。相比于其他脱毒方法，通过微生物细胞壁对ZEN的吸附作用或微生物分泌的酶对ZEN的降解作用实现脱毒成本更低、效率更高，且不会对饲料和环境造成二次污染，具有更高的安全性和实用性。
[0004]目前已发现多种可以代谢ZEN的微生物，包括粉红黏帚霉(Gliocladium roseum)、热带假丝酵母(Candida tropicalis)、鲁氏酵母(Zygosaccharomyces rouxii)、毕赤酵母(Pichia sp.)等在内的真菌和芽孢杆菌(Bacillus sp.)、假单胞菌(Psesudomonas sp.)鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffii)等在内的细菌。目前国内外ZEN降解菌虽有较多报道，但是多数降解菌降解效率不高，因此实际应用受到了限制。

技术实现思路

[0005]本专利技术要解决的技术问题是克服现有的玉米赤霉烯酮降解技术的缺陷和不足，提供一株可降解玉米赤霉烯酮的贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis PA26
‑
7以及提高该菌株降解ZEN效率的方法。
[0006]本研究的目的是提供一种提高玉米赤霉烯酮降解菌贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis PA26
‑
7菌株降解玉米赤霉烯酮的培养方法。
[0007]本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
[0008]所述可降解玉米赤霉烯酮的贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis PA26
‑
7菌株已于2022年10月27日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏编号为GDMCC.No 62926。
[0009]本专利技术研究通过对贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis PA26
‑
7菌株发酵使用的培养基、培养基起始pH、培养温度、细菌接种量等方面进行优化，有效提高该菌株降解玉米赤霉烯酮的效率。
[0010]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0011]本专利技术研究经过对ZEN降解菌株Bacillus velezensis PA26
‑
7发酵条件的探索优
化，使该菌株降解玉米赤霉烯酮能力提升了11.5％，对于ZEN生物脱毒剂及其在饲料生产和农产品加工上的应用具有十分重要的作用。
附图说明
[0012]图1为Bacillus velezensis PA26
‑
7菌株对玉米赤霉烯酮的降解能力(A为ZEN的空白对照图，B为PA26
‑
7代谢ZEN的效果图)。
[0013]图2为不同培养基中Bacillus velezensis PA26
‑
7对玉米赤霉烯酮的降解率。
[0014]图3为不同起始pH的培养基中Bacillus velezensis PA26
‑
7对玉米赤霉烯酮的降解率。
[0015]图4为不同温度温度下Bacillus velezensis PA26
‑
7对玉米赤霉烯酮的降解率。
[0016]图5为不同接种比例下Bacillus velezensis PA26
‑
7对玉米赤霉烯酮的降解率。
[0017]图6为最适降解条件下Bacillus velezensis PA26
‑
7对不同浓度玉米赤霉烯酮的降解率。
[0018]图7 Bacillus velezensis PA26
‑
7降解玉米赤霉烯酮条件优化前后降解能力比较
具体实施方式
[0019]以下结合说明书附图和具体实例来进一步说明本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法和设备；除非特别说明，以下实施例所用试剂和耗材均为市购。
[0020]实施例1 玉米赤霉烯酮的高效液相色谱法检测
[0021]1、方法
[0022](1)将PA26
‑
7接种至含有ZEN的培养基，震荡培养48h后，取200μL发酵液中加入等体积的甲醇，涡旋振荡后4℃静置4h，混合液1000rpm离心5min，上清液经0.22μm微孔滤膜过滤至上样品。同时设置不接种PA26
‑
7菌株的培养基为对照。
[0023](2)HPLC检测条件为：安捷伦色谱柱(ZorbaxSB
‑
C18，250
×
4.6mm，5μm)；进样量：20μL；流动相：乙腈/水＝40/60(v/v)；流速：0.6mL/min；柱温：30℃。检测器：HPLC
‑
DAD；检测波长：274nm；等度洗脱20min。
[0024](3)ZEN降解率的计算：ZEN降解率(％)＝(1
‑
ZEN样品峰面积/ZEN对照峰面积)
×
100％
[0025]2、结果如附图1所示，贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis PA26
‑
7可降解培养基中的玉米赤霉烯酮，降解率为83.2％。
[0026]实施例2 贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis PA26
‑
7发酵培养基的确定
[0027]1、方法
[0028](1)将PA26
‑
7分别接种至ZEN终浓度为10μg/mL的BHI、TSB、LB培养基中，37℃，150rpm震荡培养48h。
[0029](2)培养完成后按照实施例1所述步骤测定各培养基中ZEN残留量，以ZEN残留量最低的培养基作为PA26
‑
7降解ZEN的最适培养基。
[0030]2、结本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株可降解玉米赤霉烯酮的贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis PA26
‑
7菌株，其特征在于，该菌株已于2022年10月26日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓诣群，陈嘉杭，邓凤如，文继开，赵苑婷，陈嘉琪，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：