【技术实现步骤摘要】
一种动脉粥样硬化细胞模型的建立方法
[0001]本专利技术涉及生物化学工程
,具体为一种动脉粥样硬化细胞模型的建立方法。
技术介绍
[0002]动脉粥样硬化是引起冠心病死亡的主要原因之一。大量的体内外实验证明,动脉粥样硬化的形成过程中氧化低密度脂蛋白(OX
‑
LDL)是引起病理变化和损伤最主要的因子。OX
‑
LDL是多种具有生物活性物质的共存体,具有强免疫源性,能激发机体免疫反应,产生抗体,其介导的免疫反应在粥样斑块形成和发展中起重要作用。
[0003]天然低密度脂蛋白(LDL)中含有大量不饱和脂肪酸经过氧化引起一系列的连锁的自由基链式反应,最终生成多种活性醛,再与LDL中的载脂蛋白ApoB结合,产生新的抗原决定簇,最终形成Ox
‑
LDL。经过氧化修饰后形成的Ox
‑
LDL还可促进炎性因子和黏附分子的分泌,增加巨噬细胞摄入LDL的速度,导致胆固醇在巨噬细胞内的蓄积并使之转变为泡沫细胞。
[0004]授权公告号为CN101691562 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种动脉粥样硬化细胞模型的建立方法,其特征在于:包括如下步骤:步骤1、定量LDL:称取一定量新鲜的LDL,先用0.1mol/L的PBS缓冲液稀释,得到50mg/L的LDL溶液,再加入1μmol/L的铜锌超氧化物歧化酶和4μmol/L的ZnSO4,使LDL溶液的终浓度为5mmol/L;步骤2、合成OX
‑
LDL:将LDL溶液于36.0
‑
37.0℃水浴24h后,转入透析袋中,先在含5mol/LCuSO4的PBS缓冲液中室温透析24h,然后在含0.1%EDTA
‑
2Na的PBS缓冲液中室温透析24h,除菌保存;步骤3、建立泡沫细胞模型:将RAW264.7细胞置于含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液中,于36.0
‑
37.0℃恒温培养24h后,弃原液,加入含3%胎牛血清的RPMI 1640培养液和OX
‑
LDL,共同孵育24h,得到泡沫细...
【专利技术属性】
技术研发人员:张梦媛,
申请(专利权)人:江苏食品药品职业技术学院,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。