测定动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物残留量的方法技术

本发明专利技术涉及生物检测技术领域，且公开了测定动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物残留量的方法，包括如下步骤：步骤一：将样品经甲酸

【技术实现步骤摘要】
测定动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物残留量的方法


[0001]本专利技术涉及生物检测
，具体为测定动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物残留量的方法。

技术介绍

[0002]磺酰草吡唑是拜耳公司研发的用于谷物田的4
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羟基苯基丙酮酸双加氧酶(4
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hydroxyphenylpyruvate dioxygenase，4
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HPPD)抑制剂类除草剂，具有高效、安全、环境友好等特点；现已成为HPPD抑制剂中的第五大产品,目前在加拿大、美国、澳大利亚广泛用于谷物田除草,磺酰草吡唑及代谢物磺酰草吡唑
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脱甲基的结构式见图1。畜禽类动物食用含磺酰草吡唑残留饲料作物后可能导致其体内产生残留，从而可能通过食物链造成对人体的危害，加拿大和美国制定了牛肉、羊肉、禽肉及相关副产品、蛋和奶等动物源性食品中残留限量值，限量值最低为0.01mg/kg，残留限量均以磺酰草吡唑及代谢物磺酰草吡唑
‑
脱甲基之和。针对磺酰草吡唑的研究主要集中在合成和除草应用研究等方面，对于磺酰草吡唑的残留分析方法国内外相关报道较少。白晓晨等采用高效液相色谱建立了一种测定磺酰草吡唑含量的高效液相色谱方法，对于磺酰草吡唑在动物源性产品中的分析方法尚未见报道。
[0003]超高效液相色谱
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四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(ultrahigh performance liquid chromatography
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quadrupole/orbitrap high resolution mass spectrometry，UPLC
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Q
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Orbitrap HRMS)将高选择性的四极杆和高分辨率高灵敏度的轨道阱进行有机结合，具有选择性好、分辨率高和灵敏度优越等突出优点，在动物源食品中的残留物分析和成分检测中已得到广泛应用。本研究基于冷冻除脂结合分散固相萃取进行样品前处理，再结合UPLC
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Q
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Orbitrap HRMS，首次建立了动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物残留的检测方法，旨在为我国动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物的检测提供技术支持。

技术实现思路

[0004](一)解决的技术问题
[0005]针对现有技术的不足，本专利技术提供了测定动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物残留量的方法，具备操作简单快速，灵敏度高，结果准确，可应用于动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物的检测。
[0006](二)技术方案
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0008]测定动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物残留量的方法，包括如下步骤：
[0009]步骤一：将样品经甲酸
‑
乙腈溶液提取，提取液先经低温冷冻除脂后，再采用十八烷基键合硅胶、石墨化炭黑和无水硫酸镁分散固相萃取进行净化；
[0010]步骤二：以Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱为分析柱，甲醇
‑
0.2％甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱分离；
[0011]步骤三：采用高分辨质谱平行反应监测扫描模式，以正离子采集进行定性定量分
析，基质匹配外标法定量。
[0012]优选的，所述步骤一包括：将动物源性产品的样品切成小块，用刀式研磨仪5000r/min粉碎至浆状，鸡蛋取10枚去壳后搅拌混匀，牛奶样品取约200g搅拌混匀；
[0013]称取5g(精确至0.01g)制备好的试样于50mL聚丙烯离心管中，加入4g氯化钠和25mL 0.2％甲酸乙腈溶液，13500r/min均质提取1min，5000r/min离心3min；
[0014]吸取1.5mL上清液于2mL聚丙烯离心管中，于超低温冰箱(≤
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65℃)冷冻10min，低温冷冻离心机15000r/min离心1min，取上清液1.0mL于2mL聚丙烯离心管中；
[0015]加入5mg GCB和10mg C
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和20mg MgSO4，涡旋混合1min，12000r/min离心3min，取上清液过0.22μm有机滤膜，待测定。
[0016]优选的，所述动物源性产品为牛肉、羊肉、鸡肉、牛肝和羊肝。
[0017]优选的，所述步骤二中甲醇
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0.2％甲酸溶液的配制为：
[0018]分别吸取适量的磺酰草吡唑和磺酰草吡唑
‑
脱甲基标准储备液，用甲醇稀释成1mg/L磺酰草吡唑和磺酰草吡唑
‑
脱甲基的混合标准中间液；
[0019]再用甲醇和空白样品提取液(空白样品按1.3.1节处理)稀释浓度为0.5、1、2、10、50μg/L的系列标准工作溶液和基质匹配标准工作溶液，工作溶液现配现用。
[0020]优选的，所述步骤三中高分辨质谱为超高效液相色谱
‑
四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC
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Q
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Orbitrap HRMS)，利用UPLC
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Q
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Orbitrap HRMS的PRM模式对磺酰草吡唑及磺酰草吡唑
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脱甲基混合标准溶液进行检测。。
[0021](三)有益效果
[0022]与现有技术相比，本专利技术提供了测定动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物残留量的方法，具备以下有益效果：
[0023]该测定动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物残留量方法，该方法操作简单快速，灵敏度高，结果准确，可应用于动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物的检测。
附图说明
[0024]图1为磺酰草吡唑及其代谢物的结构式；
[0025]图2为磺酰草吡唑及其代谢物(1ng/mL)二级质谱定量子离子的提取离子色谱图；
[0026]图3为不同提取溶剂对磺酰草吡唑及其代谢物提取回收率的影响；
[0027]图4为提取溶剂体积对磺酰草吡唑及其代谢物回收率的影响；
[0028]图5为净化试剂对磺酰草吡唑及其代谢物回收率的影响；
[0029]图6为不同基质中磺酰草吡唑及代谢物的基质效应。
具体实施方式
[0030]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。
[0031]实施例：
[0032]测定动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物残留量的方法，包括如下步骤：
[0033]步骤一：将样品经甲酸
‑
乙腈溶液提取，提取液先经低温冷冻除脂后，再采用十八烷基键合硅胶、石墨化炭黑和无水硫酸镁分散固相萃取进行净化；
[0034]步骤二：以Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱为分析柱，甲醇
‑
0.2％甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱分离；
[0035]步骤三：采用高分辨质谱平行本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.测定动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物残留量的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：将样品经甲酸
‑
乙腈溶液提取，提取液先经低温冷冻除脂后，再采用十八烷基键合硅胶、石墨化炭黑和无水硫酸镁分散固相萃取进行净化；步骤二：以Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱为分析柱，甲醇
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0.2％甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱分离；步骤三：采用高分辨质谱平行反应监测扫描模式，以正离子采集进行定性定量分析，基质匹配外标法定量。2.根据权利要求1所述的测定动物源性产品中磺酰草吡唑及其代谢物残留量的方法，其特征在于：所述步骤一包括：将动物源性产品的样品切成小块，用刀式研磨仪5000r/min粉碎至浆状，鸡蛋取10枚去壳后搅拌混匀，牛奶样品取约200g搅拌混匀；称取5g(精确至0.01g)制备好的试样于50mL聚丙烯离心管中，加入4g氯化钠和25mL 0.2％甲酸乙腈溶液，13500r/min均质提取1min，5000r/min离心3min；吸取1.5mL上清液于2mL聚丙烯离心管中，于超低温冰箱(≤
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65℃)冷冻10min，低温冷冻离心机15000r/min离心1min，取上清液1.0mL于2mL聚丙烯离心管中；加入5mg GCB和10mg C
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和20mg MgSO4...

【专利技术属性】
技术研发人员：荣杰峰，曾秋霞，邹强，陈高群，佘紫文，
申请(专利权)人：泉州海关综合技术服务中心，
类型：发明
国别省市：