子宫内膜类器官体外构建母胎界面的3D模型制备方法技术

本发明专利技术公开了一种子宫内膜类器官体外构建母胎界面的3D模型制备方法，包括：体外建立原代子宫内膜上皮类器官和子宫内膜基质细胞系；改善用于组装子宫内膜腺体样类器官与基质细胞的细胞外基质；构建的子宫内膜类器官模型包含腺体和基质细胞；采用气液界面培养子宫内膜类器官模型，使其具有腔上皮和腺体结构；子宫内膜类器官模型模拟子宫内膜的月经周期以及功能鉴定。本发明专利技术首次建立了同时具有腔上皮和腺上皮的内膜类器官模型，类器官的组织结构、细胞组成、激素诱导变化、基因表达的特征与体内相似，并且能够重现体内胚胎着床所必需的容受性基因和纤毛的动态性；可用于作为研究胚胎着床调控、子宫内膜疾病和再生机制的模型。子宫内膜疾病和再生机制的模型。子宫内膜疾病和再生机制的模型。

【技术实现步骤摘要】
子宫内膜类器官体外构建母胎界面的3D模型制备方法


[0001]本专利技术属于生殖医学以及生物
，具体涉及子宫内膜类器官体外构建母胎界面的3D模型制备方法。

技术介绍

[0002]与其他哺乳动物相比，人类的生育能力是低下的。即使对于健康女性，每个月经周期自然受孕的几率只有30％。据人类生育情况统计，每六对夫妇中就有一对被诊断为不孕不育症，而在这些人群中，约有25％的夫妇又被诊断为不明原因不孕。虽然在临床上运用辅助生殖技术提高生育率，但成功率也仅在40
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55％之间，着床失败是该技术的限速步骤。因为人类目前对于胚胎着床的认识仍不清晰，所以我们需要更好地理解人类母胎界面的交叉对话，了解子宫内膜容受性对胚胎植入的重要性，从而进一步改善妊娠结局，提高不孕夫妇的妊娠率。
[0003]子宫内膜作为胚胎着床的“土壤”，它是成功妊娠的关键。内膜是由覆盖在表层的腔上皮和下方的腺上皮组成的多层结构，前者是胚胎与之发生互作的植入位点，后者为浸润到其中的胚胎提供营养环境。在女性的月经周期，子宫内膜在雌孕激素的作用下处于一种高度动态变化过程本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种子宫内膜类器官体外构建母胎界面的3D模型制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、体外建立原代子宫内膜上皮类器官和子宫内膜基质细胞系；S2、改善用于组装子宫内膜腺体样类器官与基质细胞的细胞外基质；S3、构建的子宫内膜类器官模型包含腺体和基质细胞；S4、采用气液界面培养子宫内膜类器官模型，使其具有腔上皮和腺体结构；S5、子宫内膜类器官模型模拟子宫内膜的月经周期以及功能鉴定。2.根据权利要求1所述的一种子宫内膜类器官体外构建母胎界面的3D模型制备方法，其特征在于：所述的S1中子宫内膜上皮类器官的培养基被称为扩增培养基(Expansionmedium，ExM)，其中成分包括AdvancedDMEM/F12，N2supplement，B27supplementminus vitaminA，青霉素/链霉素，0.5
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2mMN
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Acetyl
‑
L
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cysteine，0.5
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3mM L
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glutamine，30
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70ng/mlEGF，50
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200ng/mlNoggin，50
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100ng/ml Rspondin
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1，50
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200ng/mlFGF
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10，20
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80ng/mlHGF，200
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1000nM A83
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01，5
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20nM烟酰胺和5
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15nMY27632。3.根据权利要求1所述的一种子宫内膜类器官体外构建母胎界面的3D模型制备方法，其特征在于：所述的S1中子宫内膜基质细胞的培养基成分为5
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20％胎牛血清和0.5
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5μg/mlL
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ascorbicacid。4.根据权利要求1所述的一种子宫内膜类器官体外构建母胎界面的3D模型制备方法，其特征在于：所述的S2中将子宫内膜腺体样上皮类器官与基质细胞的细胞按照一定比例进行混合；改善组装子宫...

【专利技术属性】
技术研发人员：李天晴，田冀雯，杨洁，
申请(专利权)人：昆明理工大学，
类型：发明
国别省市：