一种玉米叶绿体聚光和避光运动的观察鉴定方法技术

本申请属于玉米基因工程技术领域，具体涉及一种玉米叶绿体聚光和避光运动的观察鉴定方法。所述光运动包括聚光运动和避光运动两个方面，该方法包括：种子萌发、培养成苗、预处理、取样处理和观察等步骤。本申请以玉米为研究对象，在对玉米叶片中叶绿体光运动特点进行深入研究基础上，对玉米叶绿体光运动的观察鉴定体系进行了优化，明确了切片材料中叶片的最适生长天数等关键性观察鉴定条件，可为玉米叶绿体光运动的标准化鉴定体系的建立奠定一定技术基础。同时也为其他生物体微观运动鉴定体系的建立提供了良好借鉴和参考。而基于这些工作，对于深入解析玉米光运动机制、以及相关亲本筛选和新品种培育具有十分重要的基础技术意义。选和新品种培育具有十分重要的基础技术意义。选和新品种培育具有十分重要的基础技术意义。

【技术实现步骤摘要】
一种玉米叶绿体聚光和避光运动的观察鉴定方法


[0001]本申请属于玉米基因工程
，具体涉及一种玉米叶绿体光运动观察鉴定方法。

技术介绍

[0002]玉米（Zea mays L.）是禾本科玉蜀黍属一种一年生的雌雄同株异花授粉草本植物，原产于中美洲和南美洲，在全世界热带和温带地区广泛种植，广泛应用于食品、饲料和生物能源等领域。为了满足全球日益增长的玉米生产需求，育种家一直在不断选择可以在更高密度下种植的玉米品种，以提高玉米单位土地面积产量。然而高密度种植会因临近植物间遮荫导致作物的中下层叶片光照不足出现弱光胁迫。如何根据光环境变化有效调整叶绿体在玉米叶片中重新定位以优化光捕获，是提高玉米生产力的新途径。
[0003]叶绿体是含有绿色色素（包括叶绿素a、b）的质体，是绿色植物进行光合作用的场所。叶绿体会根据光环境变化表现出聚集和分散运动，主要由蓝光受体向光素（phot1和phot2）调节，旨在提高植物光捕获能力。
[0004]在拟南芥中，研究表明，当光线受限时，弱蓝光（0.01~20
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–2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种玉米叶绿体聚光和避光运动的观察鉴定方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：（一）种子萌发取玉米种子，清水浸泡后，暗培养，诱导萌发形成黄花幼苗；（二）培养成苗将步骤（一）中已萌发的玉米黄化幼苗移栽土壤中，培育15
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25天；（三）预处理将步骤（二）中玉米苗暗处理1 d；（四）取样处理和观察取步骤（三）中玉米叶片，剪取自下向上第三或第四片叶片的中部部分后，置于琼脂平板上，并在叶片表面覆盖一层含一条狭缝处可透光的锡箔纸；对于避光运动，蓝光照射处理1~8 h；蓝光光强为：50~300
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‑2s
‑1；对于聚光运动，蓝光照射处理6~12 h；蓝光光强为：5~50
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‑2s
‑1；蓝光辐照处理完成后，将处理后叶片置于光板上拍照，黑白转换处理后，分别测量叶片狭缝处条带和遮挡部分的灰度值，并计算狭缝处叶片的相对亮度；计算公式为：其中：VGS为相对灰度值，AC为遮挡处叶片的积分灰度值，AL为狭缝处叶片的积分灰度值；拍照完成后，剪取叶片被照光部分，转移EP管中，加入Fixation buffer固定；固定完成后，将固定好的叶片包埋，并用振荡切片机切片和进行光学显微镜观察。2.如权利要求1所述玉米叶绿体聚光和避光运动的观察鉴定方法，其特征在于，步骤（一）中，所述玉米种子为B7...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵翔，邓晓柳，李陆平，辛广远，朱金东，
申请(专利权)人：河南大学，
类型：发明
国别省市：