一种促进人骨形成的多种蛋白混合物的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种促进人骨形成的多种蛋白混合物的制备方法，通过将蛋白溶解液通过半透膜超滤，取其滤上物为胶原蛋白，滤下物为骨形成蛋白，并将所得的胶原蛋白和骨形成蛋白进行混合，对混合物进行复合冻干以及后续灭菌处理，通过对混合物活性检测实验所得的光学图片肉眼可见有大量活跃的软骨细胞，证明制备的多种蛋白混合物对软骨细胞有诱导生成作用，表明利用胶原蛋白保护骨形成蛋白方法对骨形成蛋白进行存储，制得的混合物能够有效缓解骨形成蛋白的活性损失。蛋白的活性损失。蛋白的活性损失。

【技术实现步骤摘要】
一种促进人骨形成的多种蛋白混合物的制备方法


[0001]本专利技术涉及骨形成蛋白
，具体为一种促进人骨形成的多种蛋白混合物的制备方法。

技术介绍

[0002]骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein，BMP)又称骨形成蛋白，是一组具有类似结构的高度保守的功能蛋白，BMP能刺激DNA的合成和细胞的复制，从而促进间充质细胞定向分化为成骨细胞。它还是体内诱导骨和软骨形成的主要因子，并在肢体生长、软骨内骨化、骨折早期、软骨修复时表达，不仅对骨骼的胚胎发育和再生修复起重要作用，而且对脂肪、肾脏、肝脏、骨骼及神经系统发育也起到一定作用。
[0003]骨形成蛋白BMP是一种疏水性非胶原酸性糖蛋白，存在于动物骨组织中，但含量极低，分离过程繁杂、纯度低、重复性差，且现有技术中通过水溶解骨形成蛋白、冻干过程和灭菌过程都对骨形成蛋白的活性有影响，使得制备得到的骨形成蛋白活性损失，降低其效价。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供了一种促进人骨形成的多种蛋白混合物的制备方法，可有效保持骨形成蛋白的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种促进人骨形成的多种蛋白混合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：纯化：将蛋白浓缩液离心得到沉淀物，将沉淀物通过盐酸胍溶解得到蛋白溶解液；S2：骨形成蛋白的提取：将S1中所得蛋白溶解液通过半透膜超滤，取其滤上物为胶原蛋白，滤下物为骨形成蛋白；S3:复合冻干：将S2中所得的胶原蛋白和骨形成蛋白进行混合，将混合物进行复合冻干；S4：内包装：将S3所得的复合冻干物进行灭菌，然后阴凉干燥密封储存。2.根据权利要求1所述的一种促进人骨形成的多种蛋白混合物的制备方法，其特征在于，S3中胶原蛋白和骨形成蛋白以10:1～20:1的比例进行混合。3.根据权利要求1所述的一种促进人骨形成的多种蛋白混合物的制备方法，其特征在于，S1中所述的蛋白浓缩液的制备方法如下：S21：皮质骨粉碎：取牛的四肢长骨的皮质骨部分，通过液氮浸泡粉碎成皮质骨粒；S22：皮质骨粒化学处理：将S21中所得的皮质骨粒经甲醇和氯仿的混合溶液进行脱脂，再将脱脂后的产品通过盐酸进行...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁力，任芳，唐瑞辰，郭长水，李湘杰，
申请(专利权)人：天津中津生物发展有限公司，
类型：发明
国别省市：