【技术实现步骤摘要】
一种用于酶促DNA合成的试剂盒及其应用
[0001]本申请属于DNA合成领域,具体涉及一种用于酶促DNA合成的试剂盒及其应用。
技术介绍
[0002]目前DNA合成主要采用20世纪80年代开发的固相亚磷酰胺化学合成法,通过4步循环反应,实现寡核苷酸链从3
’
到5
’
方向合成。然而,DNA化学合成技术存在本身瓶颈问题,例如反应步骤繁琐、单个循环耗时较长(6
‑
8分钟)、化学试剂消耗较多且成本较高,大量使用有毒、易燃的有机试剂,污染较大。因此,基于蛋白酶催化的DNA生物合成逐渐成为有望替代化学合成技术的新一代DNA合成技术。
[0003]酶法DNA合成技术是指利用不依赖模板的末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)向DNA链末端添加单核苷酸,其合成机理类似与生物体内DNA复制机制,可实现寡核苷酸链从5
’
到3
’
方向合成。在存在天然核苷酸的情况下,TdT可以将单链DNA片段延长数千个核苷酸。生物法DNA合成技术具有化学合成法无法比拟的优势,如 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于酶促DNA合成的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括芯片和起始链,所述芯片含有探针,所述探针为单链DNA分子,所述探针的3'末端被氨基修饰,所述探针包括柔性臂区和与所述起始链结合的结合区,所述柔性臂区由6
‑
12个T连接而成,所述结合区由20
‑
30个核苷酸组成,所述结合区的核苷酸序列与所述起始链的5'端反向互补。2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述探针的长度为26
‑
42nt。3.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于:所述起始链包括与所述探针结合的配对区,所述配对区的核苷酸序列与所述探针的结合区反向互补,所述配对区的长度为20
‑
30个核苷酸。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的试剂盒,其特征在于:所述起始链还包括位于3'端的用于起始DNA合成的引发区,所述引发区的长度大于3nt。5.根据权利要求1
‑
5中任一项所述的试剂盒,其特征在于:所述起始链的引发区...
【专利技术属性】
技术研发人员:逯晓云,吕文丽,
申请(专利权)人:天津中合基因科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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