【技术实现步骤摘要】
一种稳定遗传外源基因的粘质沙雷氏菌工程菌及其应用
[0001]本专利技术属于微生物
,具体涉及一种稳定遗传外源基因的粘质沙雷氏菌工程菌BRC
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CXG2
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pCHSW及其应用。
技术介绍
[0002]松墨天牛、星天牛、云斑天牛、光肩星天牛、红棕象甲、赤拟谷盗等是重要的鞘翅目害虫,对我国许多种类农林植物造成重大危害,研究建立针对上述害虫持久高效的生物防治方法具有重要的生态学和经济学意义。目前已经发现生物杀虫毒素Cry3AaT蛋白对多种鞘翅目害虫具有杀虫活性,但将其应用于生产实践仍然存在一些重要问题。其杀虫机理主要是昆虫取食毒素后,毒素与昆虫肠道上皮细胞表面受体结合形成膜穿孔,从而造成昆虫死亡;而松墨天牛、星天牛、云斑天牛、光肩星天牛、红棕象甲等钻蛀性害虫主要隐蔽在树干中危害,导致该毒素无法直接与进入害虫肠道,进而影响该毒素的应用。因此,筛选获得植物与害虫肠道的共生菌作为毒素载体,通过基因工程构建能够表达分泌毒素的工程菌,是解决这一问题的理想途径。
[0003]粘质沙雷氏菌是一种 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种稳定遗传外源基因的粘质沙雷氏菌工程菌BRC
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CXG2
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pCHSW,其特征在于:所述菌株的分类命名为粘质沙雷氏菌Serratia marcescens,已于2021年8月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号为CGMCC NO.23125。2.根据权利要求1所述的粘质沙雷氏菌工程菌BRC
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CXG2
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pCHSW,其特征在于:所述粘质沙雷氏菌工程菌BRC
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CXG2
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pCHSW能够稳定遗传nptII
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cry3AaT
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hasA外源基因且能外分泌表达Cry3AaT蛋白。3.一种构建权利要求1所述的粘质沙雷氏菌工程菌BRC
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CXG2
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pCHSW的方法,其特征在于:所述方法为通过接合转移技术,将携带能够实现杀虫毒素蛋白外分泌表达的nptII
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cry3AaT
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hasA基因的pCHSW质粒转入到粘质沙雷氏菌BRC
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CXG2中,利用质粒上携带的tnp转座基因将外源基因nptII<...
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