一种将衰老皮肤成纤维细胞诱导为皮肤角质干细胞的方法技术

本发明专利技术涉及诱导细胞技术领域，公开了一种将衰老皮肤成纤维细胞诱导为皮肤角质干细胞的方法。该方法包括以下步骤：(1)将人成纤维细胞接种于DMEM培养基中培养，再将细胞进行病毒转导并将病毒转导后的细胞接种于人胚胎干细胞培养基继续培养，获得功能性诱导的角质细胞干样细胞；(2)将所述功能性诱导的角质细胞干样细胞接种于皮肤角质干细胞诱导培养基进行培养，培养完成后进行分离、选择，获得皮肤角质干细胞；所述皮肤角质干细胞诱导培养基含有表皮诱导因子。本发明专利技术本技术避免了形成诱导性多能干细胞的步骤，在重编程过程中，直接通过谱系诱导因子将衰老成纤维细胞诱导为皮肤角质干细胞。干细胞。

【技术实现步骤摘要】
一种将衰老皮肤成纤维细胞诱导为皮肤角质干细胞的方法


[0001]本专利技术涉及诱导细胞
，具体涉及一种将衰老皮肤成纤维细胞诱导为皮肤角质干细胞的方法。

技术介绍

[0002]皮肤角质干细胞(keratinocyte stem cells，KSC)是皮肤组织损伤修复最关键的种子细胞。创伤、衰老等各种损伤因素均可导致皮肤角质干细胞功能缺失，因此皮肤角质干细胞的修复是决定皮肤损伤修复最关键的难点。作为皮肤含量最多的细胞，成纤维细胞对皮肤修复也起着至关重要的作用，但过度增殖往往导致疤痕形成。衰老过程中皮肤成纤维细胞和角质干细胞均会出现功能衰退，损伤修复能力下降，直接导致皮肤衰老的表征。
[0003]目前通过注射间充质干细胞、外泌体等多种技术手段对皮肤衰老细胞功能进行改善，但均有各种不足，包括外源性细胞排异性、作用时间短暂等等。如何解决种子细胞来源，解决异源性细胞的排斥问题，并改善损伤微环境，充分调动干细胞功能，提高创伤组织修复效率，促进创伤原位细胞的再发育和再生能力，最终在各种损伤环境下实现创面结构与功能修复的完美再生，始终是组织再生研究本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种将衰老皮肤成纤维细胞诱导为皮肤角质干细胞的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)将人成纤维细胞接种于DMEM培养基中培养，再将细胞进行病毒转导并将病毒转导后的细胞接种于人胚胎干细胞培养基继续培养，获得功能性诱导的角质细胞干样细胞；(2)将所述功能性诱导的角质细胞干样细胞接种于皮肤角质干细胞诱导培养基进行培养，培养完成后进行分离、选择，获得皮肤角质干细胞；所述皮肤角质干细胞诱导培养基含有表皮诱导因子。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述DMEM培养基的组分包括：胎牛血清、L
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谷氨酰胺、青霉素、链霉素。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述人胚胎干细胞培养基培养的时间为5
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8天。4.根据权利要求1所述的方法，其他组在于，步骤(1)中，所述病毒转导为先将细胞以3
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104‑4×
104个细胞/孔接种在含DMEM培养基的六孔板的基质胶涂层板上，再按比例将含有Oct4、Sox2、Klf4和c
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Myc的逆转录病毒上清液混合制...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘宇，蔡飒，潘晓华，
申请(专利权)人：深圳市宝安区人民医院，
类型：发明
国别省市：