RNA结合蛋白NOVA2作为非小细胞肺癌转移标志物的应用制造技术

本发明专利技术公开了RNA结合蛋白NOVA2作为非小细胞肺癌转移标志物的应用，涉及生物医药技术领域。本发明专利技术综合运用转录组测序、生物信息学分析、动物实验和临床样本检验等手段，首次鉴定出一个在NSCLC组织中表达上调，且促进NSCLC转移的标志物，即RNA结合蛋白NOVA2。进一步实验证实，NOVA2通过调控TGF

【技术实现步骤摘要】
RNA结合蛋白NOVA2作为非小细胞肺癌转移标志物的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别是涉及RNA结合蛋白NOVA2作为非小细胞肺癌转移标志物的应用。

技术介绍

[0002]最新统计显示，肺癌发病率占所有肿瘤的12.5％，并以21％的死亡率高居所有肿瘤第一位。非小细胞肺癌(Non
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small
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cell lung cancer，NSCLC)是肺癌最常见的病理类型，约占83％，包括肺腺癌、肺鳞癌和大细胞肺癌。NSCLC患者的预后较差，其五年生存率仅约15％。转移是癌症患者死亡的主要原因，临床上超过90％的NSCLC患者死亡是由转移引起。针对这一严峻现状，深入探究NSCLC转移的机制，探寻潜在的分子干预靶标，对改善NSCLC患者的预后具有十分重要的意义。
[0003]目前，越来越多的研究揭示了EGFR、ALK、ROS1、KRAS和HER2等分子在NSCLC发生发展中的作用及机制，基于以上分子靶点开发的多款靶向药物成功应用于临床，为NSCLC患者带来新的希望和选择。然而，目前临床尚无特异的靶向药物用于NSCLC转移的治疗，其重要原因是缺乏与NSCLC转移相关的特异分子靶点以供下游药物开发与临床研究。因此，筛选NSCLC转移的关键调控因子，揭示其作用机制，为NSCLC转移的临床治疗提供新的干预靶点，是改善NSCLC预后的关键。
[0004]RNA结合蛋白(RNA
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binding proteins，RBPs)是指一类与RNA结合的蛋白质的总称，其在转录后水平参与RNA的剪接加工、修饰、转运和稳定性调节等过程。RBPs在肿瘤转移中的调控作用近年来备受关注，如：Goodarzi等首次揭示了RBPTARBP2在乳腺癌转移中发挥重要作用；最近，Yu等证实RBPRBMS1在转录后水平调控靶标RNA的稳定性而抑制结肠癌转移。然而，RBPs在NSCLC转移中的作用及机制却鲜有报道。
[0005]NOVA2(neuro
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oncological ventral antigen 2)作为RBP通过识别靶标mRNA的特异YCAY(Y＝C/U)重复序列簇在转录后水平调控靶基因表达。NOVA2最初被认为是一种神经元特异性RBP，Saito等发现NOVA2基因敲除小鼠表现出胼胝体发育不全，以及腹侧运动神经元轴突生长缺陷等特征。Giampietro等发现NOVA2缺失损害Par极性复合体的顶端分布导致内皮细胞极性改变，进而阻碍体内血管腔的形成。然而，NOVA2在人类恶性肿瘤发生发展中的作用却鲜有研究，未见NOVA2调控NSCLC转移的相关报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供RNA结合蛋白NOVA2作为非小细胞肺癌转移标志物的应用，以解决上述现有技术存在的问题，本专利技术研究发现RNA结合蛋白NOVA2可以作为非小细胞肺癌转移的生物标志物，NOVA2表达上调促进TGF
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β/SMAD介导上皮间质转化(EMT)和NSCLC转移。
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0008]本专利技术提供一种非小细胞癌转移的生物标志物，所述生物标志物为RNA结合蛋白NOVA2。
[0009]本专利技术还提供一种检测上述的生物标志物表达水平的试剂在制备检测非小细胞癌转移的产品中的应用。
[0010]本专利技术还提供一种检测非小细胞癌转移的产品，包括检测上述的生物标志物表达水平的试剂。
[0011]进一步地，所述产品为试剂盒或试剂。
[0012]本专利技术还提供一种抑制剂在制备预防和/或治疗非小细胞癌转移的药物中的应用，所述抑制剂为抑制上述的生物标志物表达的物质。
[0013]进一步地，所述抑制剂通过降低转录因子ETV4的表达来抑制所述生物标志物的表达。
[0014]本专利技术还提供一种预防和/或治疗非小细胞癌转移的药物，包括抑制上述的生物标志物表达的物质。
[0015]进一步地，所述药物还包括药学上可接受的辅料。
[0016]本专利技术公开了以下技术效果：
[0017]本专利技术综合运用转录组测序、生物信息学分析和临床样本检验等手段，首次鉴定出一个在NSCLC组织中表达上调，且促进NSCLC转移的RBP——NOVA2。进一步实验证实，NOVA2通过调控TGF
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β/SMAD介导的EMT而促进NSCLC转移。经生物信息学预测和预实验分析，证实TGF
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β/SMAD信号通路关键信号转导因子SMAD4是NOVA2的潜在调控靶标。此外，本专利技术还发现转录因子ETV4上调了NOVA2的表达。本专利技术阐明了NOVA2表达上调及其促进TGF
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β/SMAD介导EMT和NSCLC转移的新机制，丰富了对RBP功能的认识，并为NSCLC转移的预防和治疗提供新的策略和靶点。
附图说明
[0018]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0019]图1为对NSCLC组织及癌旁组织进行转录组测序分析的结果；其中，A：10对NSCLC组织及癌旁组织经转录组测序产生差异表达RBPs集；B：qRT
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PCR检测85对NSCLC组织及癌旁组织中相关RBPs mRNA的表达水平；C：将85对NSCLC组织分为非转移(n＝43)和转移(n＝42)两组后，分析相关RBPs mRNA表达水平在两组NSCLC组织中的表达差异(T/N)，T：Tumor，癌组织；N：Normal，癌旁组织；*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001；D：免疫组化分析NOVA2蛋白在非转移和转移性NSCLC组织中的表达情况；E：TCGA数据库分析NOVA2表达与NSCLC患者预后的关系；
[0020]图2为裸鼠转移模型证实过表达NOVA2显著促进NSCLC转移；其中，A：建立NSCLC裸鼠肺癌转移模型的流程示意图；B：尾静脉注射NSCLC稳转细胞(A549)8周后，解剖取完整肺，经Bouin
’
s染液染色观察肺转移情况，行HE染色分析肺内微转移病理情况；C和D为B图中肺转移灶(C)和肺内微转移灶(D)的统计结果；*P<0.05；**P<0.01；
[0021]图3为GSEA富集分析发现NOVA2与EMT基因集(A)以及TGF
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β/SMAD基因集(B)显著相关；
[0022]图4为过表达NOVA2显著促进TGF
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β/SMAD介导的EMT、NSCLC细胞迁移和侵袭；其中，A
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B为在A549(A)和H226(B)细胞中检测过表达NOVA2对TGF
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种非小细胞癌转移的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物为RNA结合蛋白NOVA2。2.一种检测如权利要求1所述的生物标志物表达水平的试剂在制备检测非小细胞癌转移的产品中的应用。3.一种检测非小细胞癌转移的产品，其特征在于，包括检测如权利要求1所述的生物标志物表达水平的试剂。4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于，所述产品为试剂盒或试剂。5.一种抑制剂在制备预防和/或治疗非小细胞癌...

【专利技术属性】
技术研发人员：王胜洁，门燕娟，郭肖肖，张文远，陈尚宇，
申请(专利权)人：南京医科大学康达学院，
类型：发明
国别省市：