用于检测肺癌的方法技术

本公开提供一种用于在具有来自患者的血细胞的样品中确定循环肿瘤细胞(CTC)水平的方法，包括从人类受试者获得测试样品；富集循环肿瘤细胞(CTC)；用与染色体DNA的区域杂交的标记核酸探针杂交所述样品中富集的细胞；通过检测来自细胞的荧光原位杂交评估所选细胞的信号模式；基于标记核酸探针与所选细胞的杂交模式检测CTC；和当每个样品的CTC数量高于预定的临界值时，鉴定所述受试者处于肺癌发展风险下。下。下。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于检测肺癌的方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年6月30日递交的美国临时申请第63/046,456号的优先权，其出于所有目的通过引用以其全部结合至本文中。
[0003]专利技术背景
[0004]计算机断层扫描为检测肺结节的标准方法，无论是偶然还是作为肺癌筛查计划的一部分。当需要活检时，进行的放射学特征和临床风险评估会指导临床医师。据估计，超过40％的可疑肺结节活检不是肺癌，并且因此没有必要。经胸活检经常导致并发症，包括感染、气胸、出血和甚至死亡。
[0005]本公开提供一种从外周血抽取中检测早期循环肿瘤细胞的4色荧光原位杂交测定。4色荧光原位杂交测定的一个非限制性实例为LungLB
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测定。在一些方面，4色荧光原位杂交测定助于对疑似肺癌的不确定结节患者进行临床评估。在一些方面，测定基于对肺癌发病早期转移过程活跃的观察。
[0006]进行了一项同时接受LungLB
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测定抽血与结节活检(n＝31例恶性，n＝15例良性结节)的46名受试者的盲法研究。使用接受者操作特征本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于鉴定处于肺癌发展风险下的受试者的方法，包括：(a)从人类受试者获得测试样品；(b)进行循环肿瘤细胞(CTC)富集步骤，包括：(i)从所述样品中去除血浆，(ii)从所述样品中去除红细胞，(iii)使所述样品与至少一种结合细胞表面标志物的生物素化亲和剂接触，和(iv)使所述样品与链霉亲和素包被的磁性颗粒接触并从所述样品中耗尽表达所述细胞表面标志物的细胞；(c)用与染色体DNA的区域杂交的标记核酸探针杂交所述样品中富集的细胞；(d)通过检测来自细胞的荧光原位杂交评估所选细胞的信号模式；(e)基于所述标记核酸探针与所述所选细胞的杂交模式检测CTC；和(f)当每个样品的CTC数量高于预定的临界值时，鉴定所述受试者处于肺癌发展的风险下。2.权利要求1的方法，其中所述测试样品为血液。3.权利要求1的方法，其中所述红细胞通过细胞裂解去除。4.权利要求3的方法，其中所述细胞裂解通过氯化铵裂解缓冲液进行。5.权利要求1的方法，其中所述血浆通过离心去除。6.权利要求1的方法，其中所述细胞表面标志物选自CD66b、CD14、CD3、CD4、CD8、CD17、CD56、CD19、CD20、CD25、IgM或IgD。7.权利要求1的方法，其中所述细胞表面标志物选自CD66b、CD3或CD14。8.权利要求1的方法，其中所述细胞表面标志物包含CD66b和CD14。9.权利要求1的方法，其中所述细胞表面标志物包含CD66b、CD14和CD3。10.权利要求1的方法，其中所述细胞表面标志物包含CD66b、CD14、CD3和CD56。11.权利要求1的方法，其中所述细胞表面标志物包含CD66b、CD14、CD3和CD19。12.权利要求1的方法，其中所述细胞表面标志物包含CD66b、CD14、CD3、CD56和CD19。13.权利要求1的方法，其中所述至少一种生物素化亲和剂包含抗CD66b、抗CD3、抗CD56、抗CD19或抗CD14抗体。14.权利要求13的方法，其中所述至少一种生物素化亲和剂包含抗CD66b抗体和抗CD14抗体。15.权利要求13的方法，其中所述至少一种生物素化亲和剂包含抗CD66b抗体、抗CD14抗体和抗CD3抗体。16.权利要求13的方法，其中所述至少一种生物素化亲和剂包含抗CD66b抗体、抗CD14抗体、抗CD3抗体和抗CD56抗体。17.权利要求13的方法，其中所述至少一种生物素化亲和剂包含抗CD66b抗体、抗CD14抗体、抗CD3抗体和抗CD19抗体。18.权利要求13的方法，其中所述至少一种生物素化亲和剂包含抗CD66b抗体、抗CD14抗体、抗CD3抗体、抗CD56抗体和抗CD19抗体。19.权利要求1的方法，其中所述耗尽细胞为中性粒细胞、单核细胞或淋巴细胞。20.权利要求1的方法，其中所述耗尽细胞为中性粒细胞和单核细胞。
21.权利要求1的方法，其中所述CTC富集步骤进一步包括：(i)使所述样品与至少一种结合细胞表面标志物的另外的生物素化亲和剂接触，和(iv)使所述样品与链霉亲和素包被的磁性颗粒接触并收集表达所述细胞表面标志物的细胞。22.权利要求21的方法，其中所述细胞表面标志物包含CD19、CD20、IgM或IgD中的至少一种。23.权利要求21的方法，其中所述至少一种另外的生物素化亲和剂包含抗CD19抗体、抗CD20抗体、抗IgM抗体或抗igD抗体中的至少一种。24.权利要求21的方法，其中所述收集的细胞包含淋巴细胞。25.权利要求24的方法，其中所...

【专利技术属性】
技术研发人员：P，
申请(专利权)人：健肺生命人工智能公司，
类型：发明
国别省市：