【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，特别是涉及grem1作为预测非小细胞肺癌转移或不良预后的生物标志物及其应用。
技术介绍
1、肺癌可被分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，nsclc)两大类，约85％是nsclc。nsclc是一种高转移性的肿瘤，主要包括肺腺癌(lungadenocarcinoma，luad)、肺鳞癌(lung squamous cell carcinoma，lusc)和肺大细胞癌，luad是nsclc最常见的临床亚型。由于肺癌的临床表现具有多样性且缺乏有效诊断指标，大部分患者直至中晚期才被确诊，而此时肿瘤细胞已经具有浸润和转移的特征。深入探究肺癌发生转移和不良预后的生物标志物，探寻nsclc潜在的干预靶点显得尤为迫切。
2、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition，emt)是早期肿瘤转化成为晚期恶性肿瘤的关键事件。肿瘤细胞发生emt时，上皮细胞失去粘附、基底极性等特征演变成为原位癌，随着进一步的发展，肿瘤细胞进行原位侵袭和扩散，继而获得转移和侵入周围组织的能力。考虑到emt在肿瘤转移过程中的重要作用，因此有效地阻断或逆转emt的过程，是临床治疗肿瘤患者的重要方式。
3、gremlin是dan家族bmp拮抗剂的成员，可与bmp家族特异结合，进而抑制bmp配体与受体结合发挥拮抗作用，其编码的蛋白主要有三种形式，即grem1、grem2和grem3。grem1基因又名drm基因，最早由topol从大鼠成纤维细胞中筛选出
4、目前，grem1在肺癌尤其是nsclc中的作用等方面的研究报道相对缺乏，grem1是否参与nsclc的emt和转移进程，以及其在nsclc中扮演促癌角色还是抑癌角色仍尚属未知。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供grem1作为预测非小细胞肺癌转移或不良预后的生物标志物及其应用，以解决上述现有技术存在的问题，本专利技术研究发现grem1在非小细胞肺癌组织中高表达，其高表达与非小细胞肺癌转移和不良预后密切相关，因此grem1可作为预测非小细胞肺癌转移或不良预后的生物标志物。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
3、本专利技术提供一种预测非小细胞肺癌转移或不良预后的生物标志物，所述生物标志物为grem1基因。
4、本专利技术还提供检测grem1基因在肺组织中表达量的试剂在制备以下(1)或(2)所述的产品中的应用：
5、(1)预测非小细胞肺癌转移的产品；
6、(2)预测肺腺癌不良预后的产品。
7、进一步地，所述产品为试剂盒或试剂。
8、进一步地，所述试剂为pcr扩增引物对，其核苷酸序列如seq id no.1-2所示。
9、本专利技术还提供一种判断肺组织是否为非小细胞肺癌组织、预测非小细胞肺癌转移或预测肺腺癌不良预后的产品，包括检测grem1基因在肺组织中表达量的试剂。
10、进一步地，所述产品为试剂盒或试剂。
11、本专利技术还提供抑制grem1基因表达的试剂在制备以下(a)或(b)所述的药物中的应用：
12、(a)抑制非小细胞肺癌上皮间质转化的药物；
13、(b)抑制非小细胞肺癌细胞的迁移和侵袭能力的药物。
14、进一步地，所述试剂为sirna，其核苷酸序列如seq id no.4或seq id no.5所示。
15、本专利技术还提供一种抑制非小细胞肺癌上皮间质转化或抑制非小细胞肺癌细胞的迁移和侵袭能力的药物，包括抑制grem1基因表达的试剂。
16、进一步地，所述试剂为sirna，其核苷酸序列如seq id no.4或seq id no.5所示。
17、本专利技术公开了以下技术效果：
18、本专利技术利用生物信息学方法筛选出与nsclc关联的差异表达基因grem1，分析其在不同分期的nsclc组织中的表达水平，并分析其表达与患者生存期间的关系；进一步收集临床nsclc组织及其对应癌旁组织，应用qrt-pcr和western blot方法检测grem1在组织样本中的表达，验证生物信息学数据，结果显示grem1在nsclc组织中高表达，且在转移性nsclc组织中进一步高表达，且其高表达与nsclc(luad)患者的不良预后相关。
19、本专利技术还采用慢病毒感染技术建立稳定过表达grem1的nsclc稳转细胞株，利用sirnas干扰技术实现grem1基因的瞬时靶向敲降；运用western blot方法检测emt分子标志物(e-cadherin、vimentin和snail)及grem1蛋白的表达水平，评估grem1在nsclc细胞emt中的作用；运用划痕-愈合、transwell迁移和侵袭等实验手段检测nsclc细胞的迁移和侵袭能力，结果显示，过表达grem1能够显著促进nsclc细胞的emt、迁移和侵袭能力；而敲降grem1则显著抑制nsclc细胞的emt、迁移和侵袭能力；grem1异常高表达可能通过激活nsclc细胞emt进程，进而促进癌细胞的迁移和侵袭能力。本专利技术证明将grem1列为靶向治疗nsclc的潜在靶点具有一定的科学与应用价值。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种预测非小细胞肺癌转移或不良预后的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物为GREM1基因。
2.检测GREM1基因在肺组织中表达量的试剂在制备以下(1)或(2)所述的产品中的应用：
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品为试剂盒或试剂。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂为PCR扩增引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1-2所示。
5.一种预测非小细胞肺癌转移或预测肺腺癌不良预后的产品，其特征在于，包括检测GREM1基因在肺组织中表达量的试剂。
6.根据权利要求5所述的产品，其特征在于，所述产品为试剂盒或试剂。
7.抑制GREM1基因表达的试剂在制备以下(a)或(b)所述的药物中的应用：
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述试剂为siRNA，其核苷酸序列如SEQ IDNO.4或SEQ ID NO.5所示。
9.一种抑制非小细胞肺癌上皮间质转化或抑制非小细胞肺癌细胞的迁移和侵袭能力的药物，其特征在于，包括抑制GREM1基因表达的试剂。p>
10.根据权利要求9所述的药物，其特征在于，所述试剂为siRNA，其核苷酸序列如SEQID NO.4或SEQ ID NO.5所示。
...【技术特征摘要】
1.一种预测非小细胞肺癌转移或不良预后的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物为grem1基因。
2.检测grem1基因在肺组织中表达量的试剂在制备以下(1)或(2)所述的产品中的应用：
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品为试剂盒或试剂。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂为pcr扩增引物对，其核苷酸序列如seq id no.1-2所示。
5.一种预测非小细胞肺癌转移或预测肺腺癌不良预后的产品，其特征在于，包括检测grem1基因在肺组织中表达量的试剂。
6.根据权利要求5...
【专利技术属性】
技术研发人员：王胜洁，潘歆怡，郭肖肖，门燕娟，胡蝶，裴丽丽，宋冬，贾秉怡，曹悦，
申请(专利权)人：南京医科大学康达学院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。