铜绿假单胞菌工程菌DUEC的构建方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种铜绿假单胞菌工程菌DUEC的构建方法及应用。本发明专利技术DUEC工程菌株构建方法为：感应激酶编码基因retS和鞘蛋白编码基因tssB2、tssB3敲除，H1

【技术实现步骤摘要】
铜绿假单胞菌工程菌DUEC的构建方法及应用


[0001]本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种铜绿假单胞菌工程菌DUEC的构建方法及应用，具体是一株能够作为物理接触感应器和蛋白质传递平台的工程菌株。

技术介绍

[0002]铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是一种非常重要的革兰氏阴性病原菌，是具有很高临床意义的ESCAPE病原菌(Enterococcus faecium，Staphylococcus aureus，Klebsiella pneumoniae，Acinetobacter baumannii，P.aeruginosa和Enterobacter spp.)中的一员，能够响应异源细胞或姐妹细胞来源的T6SS攻击、RP4接合转移或胞外DNA等引起的膜干扰信号，通过TagQRST
‑
PpkA
‑
Fha1
‑
PppA组成的苏氨酸磷酸化途径(threonine phosphorylation pathway，TPP)激活H1
‑
>T6SS组装。当铜本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种铜绿假单胞菌工程菌DUEC的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括如下步骤：在铜绿假单胞菌PAO1野生型中，首先敲除感应激酶编码基因retS和鞘蛋白编码基因tssB2、tssB3，随后对H1
‑
T6SS分泌效应蛋白Tse1
‑
Tse4、Tse6
‑
Tse8进行催化位点突变，Tse5编码基因进行敲除，即得所述铜绿假单胞菌工程菌DUEC；所述突变具体为：Tse1
C30A
：C30突变为丙氨酸；Tse2
VK
‑
AA
：V109和K110突变为丙氨酸；Tse3
E250Q
：E250突变为谷氨酰胺；Tse4
G176V
：G176突变为亮氨酸；Tse6
D396A
：D196突变为丙氨酸；Tse7
HH
‑
AA
：H229和H230突变为丙氨酸；Tse8
S186A
：S186突变为丙氨酸。2.一种如权利要求1所述的构建方法构建的铜绿假单胞菌工程菌DUEC。3.根据权利要求2所述的铜绿假单胞菌工程菌DUEC，其特征在于，所述铜绿假单胞菌工程菌株DUEC不仅能够组成性表达和组装H1
‑
T6SS，还能够响...

【专利技术属性】
技术研发人员：董涛，吴丽丽，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：