甘氨酸增强的一步法CRISPR反应及其在新型冠状病毒检测中的应用制造技术

本发明专利技术公开了甘氨酸增强的一步法CRISPR反应及其在新型冠状病毒检测中的应用。本发明专利技术涉及生物技术领域，具体涉及甘氨酸增强的一步法CRISPR反应及其在新型冠状病毒检测中的应用。本发明专利技术将甘氨酸应用在制备增强CRISPR/Cas13试剂检测核酸的灵敏度的产品中，其中CRISPR/Cas13试剂包含特异于待检测核酸的crRNA、Cas13蛋白和荧光报告探针。在针对新型冠状病毒N基因的检测中，相较于无甘氨酸的一步法CRISPR反应，甘氨酸增强一步法CRISPR反应的灵敏度提高了10倍，达到1拷贝/微升(5拷贝/反应)。本发明专利技术有望为CRISPR反应真正走向临床和现场检测应用提供有力技术支撑。和现场检测应用提供有力技术支撑。

【技术实现步骤摘要】
甘氨酸增强的一步法CRISPR反应及其在新型冠状病毒检测中的应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及甘氨酸增强的一步法CRISPR反应及其在新型冠状病毒检测中的应用。

技术介绍

[0002]新型冠状病毒(SARS
‑
CoV
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2)是一种传染性强、发病率高且易在人与人之间传播的呼吸道病毒。因此，快速准确的检测新型冠状病毒是限制疫情进一步扩散的最有效途径。
[0003]新型冠状病毒的主要检测方法包括核酸扩增检测、测序、免疫学检测。实时反转录聚合酶链式反应(real time reverse transcription PCR，rRT
‑
PCR)被认作是临床检验的金标准，但是RT
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PCR与基因测序都受制于昂贵精密的仪器设备、熟练掌握技能的操作人员以及较长的检测时间。免疫学检测技术也常用作病原微生物检测，例如酶联免疫吸附测定(enzyme
‑
linked immunosorbent assay，ELISA)，胶体金免疫层析、量子点免疫层析等本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.甘氨酸在制备增强CRISPR/Cas13试剂检测核酸的灵敏度的产品中的应用，所述CRISPR/Cas13试剂包含特异于待检测核酸的crRNA、Cas13蛋白和荧光报告探针，所述荧光报告探针是一端连有荧光基团，另一端连有淬灭基团的单链RNA。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述检测核酸通过一步法进行，所述一步法不包括将核酸扩增产物转移的步骤。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述CRISPR/Cas13试剂的检测样本来源于含有RNA的生物，所述CRISPR/Cas13试剂含有逆转录酶。4.根据权利要求1、2或3所述的应用，其特征在于：所述CRISPR/Cas13试剂含有甘氨酸，所述CRISPR/Cas13试剂中，crRNA和甘氨酸的配比为50nM crRNA:0.1g/mL甘氨酸。5.用于核酸检测的组合物，其特征在于，所述组合物...

【专利技术属性】
技术研发人员：王升启，荣振，王运祥，陈红，魏红娟，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：