一种过表达ZXDC慢病毒载体的构建和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种过表达ZXDC慢病毒载体的构建和应用，属于分子生物学技术领域。本发明专利技术通过在pLCAG

【技术实现步骤摘要】
一种过表达ZXDC慢病毒载体的构建和应用


[0001]本专利技术涉及分子生物学
，特别涉及一种过表达ZXDC慢病毒载体的构建和应用。

技术介绍

[0002]ZXDC(zinc finger,X
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linked,duplicated family member C)是一个转录调控因子，含有十个锌指结构、一个相对有效的转录激活域和C端的CIITA结合域，其中转录激活域是转录调控所必需的，而锌指结构是非必需的。ZXDC能和ZXDA形成转录活性复合物后与CIITA相结合，并参与主要组织相容性复合体MHCII基因表达的调节，ZXDC与CIITA结构中含有富含亮氨酸重复序列的区域相互作用，ZXDC的过表达导致CIITA超激活，而ZXDC表达的沉默则降低了CIITA的转录活化能力。此外，ZXDC还调节参与髓细胞分化和炎症的基因，包括趋化因子CCL2等，过表达ZXDC在293细胞系中可显著改变多种基因的表达水平，这些基因控制着细胞周期、细胞增殖和分化等细胞行为，其中EGR2、BDNF、CDKN1C和IL5Ra基因显著上调，因此，ZXDC本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种过表达ZXDC慢病毒载体的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：S1：通过PCR扩增如SEQ ID NO.1所示的两端含有BamH1酶切位点和AgeI酶切位点的ZXDC转录激活域及CIITA结合区域得到PCR扩增产物；S2：双酶切pLCAG
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EGFP慢病毒空载体；S3：将步骤S1制得的扩增产物与步骤S2双酶切后的pLCAG
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EGFP慢病毒空载体进行连接后得到重组产物pLCAG
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ZXDC
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EGFP，重组产物pLCAG
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ZXDC
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EGFP再经转化、挑取单克隆扩增培养、提取质粒后测序验证；S4：验证步骤S3测序正确的重组产物pLCAG
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ZXDC
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EGFP的表达情况，验证正确的即为过表达ZXDC慢病毒载体。2.根据权利要求1所述的一种过表达ZXDC慢病毒载体的构建方法，其特征在于，所述步骤S2具体包括：用BamH1酶和AgeI酶对pLCAG
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EGFP慢病毒空载体进行双酶切。3.根据权利要求1所述的一种过表达ZXDC慢病毒载体的构建方法，其特征在于，所述步骤S3具体包括：S3.1：使用重组酶Exnase II将步骤S1的扩增产物和步骤S2双酶切后的pLCAG
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EGFP慢病毒空载体连接得到重组产物pLCAG
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ZXDC
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EGFP；S3.2：将重组产物pLCAG
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ZXDC
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【专利技术属性】
技术研发人员：何佳，王旭升，李新新，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：