用于结核分枝杆菌ESAT-6抗原检测的电化学适体传感器及检测方法技术

本发明专利技术提供了一种用于结核分枝杆菌ESAT

【技术实现步骤摘要】
用于结核分枝杆菌ESAT
‑
6抗原检测的电化学适体传感器及检测方法


[0001]本专利技术属于纳米技术、电化学适体传感器
，涉及一种用于结核分枝杆菌ESAT
‑
6抗原检测的电化学适体传感器及检测方法。

技术介绍

[0002]世界卫生组织(WHO)2021年全球结核病报告显示，结核病(Tuberculosis，TB)是传染病中的第二大死亡原因，严重威胁公共卫生安全。可靠的诊断工具可以帮助早期发现和治疗结核感染病例，从而在控制结核负担方面发挥重要作用。常规结核病诊断包括抗酸染色和细菌培养。抗酸染色常用于快速筛查活动性肺结核，但其低灵敏度限制了其发展；细菌培养具有敏感性和特异性高的优势，而结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，MTB)生长缓慢，无法满足快速结核病诊断的要求，通常导致治疗延误。结核血清学检测可以实现直接的现场结核诊断，无需长期培养或复杂的核酸扩增。此外，由于取样方便，该方法对排痰困难的儿童和成人有效。因此，使用结核分枝杆菌特异性抗原进行结核血清学检测是一种极具潜力的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于结核分枝杆菌ESAT
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6抗原检测的电化学适体传感器，其特征在于，所述用于结核分枝杆菌ESAT
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6抗原检测的电化学适体传感器的构建方法为：将N
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CNTs
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AuNPs溶液滴加至洁净的电极表面得到修饰的电极，在空气中晾干；在修饰电极表面滴加亲和素溶液，4
‑
5℃孵育10
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12h；将孵育后的电极用DEPC水洗干净后，滴加生物素修饰的ESAT
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6适体(Ap2)于电极表面，4
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5℃孵育1
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2h，然后超纯水冲洗干净后再滴加0.1％BSA，室温孵育20
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30min；再将孵育20
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30min后的电极用DEPC水洗干净，滴加ESAT
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6抗原于电极表面，室温孵育2
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3h，电极用DEPC水洗干净，滴加MXene@Hemin
‑
Au
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Ap2溶液于电极表面，室温孵育2
‑
3h，用DEPC水冲洗干净既得本发明用于结核分枝杆菌ESAT
‑
6抗原检测的电化学适体传感器；所述N
‑
CNTs
‑
AuNPs溶液的制备方法为：将HAuCl4(1wt％)添加到N
‑
CNTs溶液中，然后在室温下搅拌15
‑
20min，然后加入NaBH4，并持续搅拌40
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50min，再用超纯水反复洗涤和离心后，获得沉淀N
‑
CNTs
‑
Au，并将沉淀用超纯水重新分散形成N
‑
CNTs
‑
AuNPs溶液；所述MXene@Hemin
‑
Au
‑
Ap2溶液的制备方法为：将巯基修饰的ESAT
‑
6适配体2(Ap2)与MXene@Hemin
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Au溶液混合，连续搅拌10
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12小时，通过Au
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S键获得MXene@Hemin
‑
Au
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Ap2，然后离心，沉淀物水洗，用超纯水溶解形成MXene@Hemin
‑
Au
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Ap2溶液；所述MXene@Hemin
‑
Au溶液的制备方法为：将氯高铁血红素溶液滴入MXene溶液中，用超声波处理半小时，然后在室温下搅拌过夜得到MXene@Hemin，之后将获得的MXene@Hemin洗涤并离心，然后在超纯水中重新分散，随后将HAuCl4(1wt％)添加到MXene@Hemin中，持续搅拌60
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80分钟，离心得沉淀物，洗涤后将沉淀物重新分散在超纯水中，形成MXene@Hemin
‑
Au溶液。2.如权利要求1所述的电化学适体传感器，其特征在于：用N
‑
CNTs
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AuNPs溶液修饰电极之前，先用氧化铝抛光粉在麂皮上抛光玻碳电极，然后以超纯水、无水乙醇和超纯水的顺序超声清洗电极直至呈镜面。3.如权利要求1所述的电化学适体传感器，其特征在于，包括如下步骤：(1)用DEPC水溶解ESAT
‑
6重组蛋白分装于无酶管保存至
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80℃；用含TCEP的TES缓冲液...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭述良，白丽娟，陈雨晗，顾玥，易小娟，黄鹤，
申请(专利权)人：重庆医科大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：