热稳定肠道病毒A组71型病毒株及其筛选方法和应用技术

本发明专利技术提供一种热稳定肠道病毒A组71型病毒株及其筛选方法和应用，该热稳定肠道病毒A组71型病毒株的保藏编号为CCTCCNo.V202233，细胞表型为52℃热处理后在细胞上稳定生长，并且表现出高产、高免疫原性的特性。与野生株或热不稳定株相比，该热稳定病毒株的编码区共产生5个核苷酸突变，其中错义突变3个，同义突变2个，可应用于灭活疫苗株的筛选、改造以及疫苗生产等方面。生产等方面。生产等方面。

【技术实现步骤摘要】
热稳定肠道病毒A组71型病毒株及其筛选方法和应用


[0001]本专利技术涉及病毒学
，具体涉及一种热稳定肠道病毒A组71型病毒株及其筛选方法和应用。

技术介绍

[0002]手足口病(Hand、Foot and Mouth Disease，HFMD)是由多种肠道病毒引起的急性传染病，多发于5岁以下的儿童。其临床症状主要表现为手、足和口腔黏膜等处疱疹，部分患者伴随着发热，少数患者出现心肌炎、无菌性脑炎、心脏衰竭、肺炎、肺水肿和弛缓性麻痹等严重并发症，甚至导致死亡。
[0003]HFMD的致病原包括多种血清型的肠道病毒，最常见的病原为肠道病毒A组71型(EV
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A71)、柯萨奇病毒A组16型(CV
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A16)、柯萨奇病毒A组6型(CV
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A6)和柯萨奇病毒A组10型(CV
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A10)。
[0004]EV
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A71属于小RNA病毒科肠道病毒属，肠道病毒颗粒呈二十面体球形对称，直径约为27～30nm，基因组为约7400nt的单股正链RNA。EV本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种热稳定肠道病毒A组71型病毒株，细胞表型为经52℃热处理后能够在Vero细胞上稳定生长，变异的氨基酸位点如下：VP1蛋白第44位氨基酸为丙氨酸，第247位氨基酸为缬氨酸；2A蛋白第45位氨基酸为丙氨酸。2.根据权利要求1所述的热稳定肠道病毒A组71型病毒株，其特征在于，保藏编号为CCTCCNo.V202233。3.根据权利要求1所述的热稳定肠道病毒A组71型病毒株，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.21所示。4.根据权利要求1至3任一项所述的热稳定肠道病毒A组71型病毒株，其特征在于，其病毒母株为分离于2019年中国江苏省沛县手足口病患者0227号样品，经52℃热处理30分钟后不再具有感染性，在Vero细胞上不能生长，其VP1蛋白第44位氨基酸为缬氨酸，VP1蛋白第247位氨基酸为亮氨酸(L)，2A蛋白第45位氨基酸为苏氨酸。5.一种权利要求1至4任一项所述的热稳定肠道病毒A组71型病毒株的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：将病毒母株EV
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A71TS
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/JS PX/2019样品52℃条件下处理30min，立即4℃保存；经热处理的病毒母株冷却后，接种Vero细胞，置于37℃培养箱培养至细胞出现病变；反复冻融多次，并采用重复上述步骤的方式连续热处理继续多代培养，收获经热处理筛选的病毒液；将...

【专利技术属性】
技术研发人员：申硕，刘睿伦，钱莎莎，吕诗韵，杨祥，王泽鋆，郭靖，孟胜利，
申请(专利权)人：武汉生物制品研究所有限责任公司，
类型：发明
国别省市：