一种AKT1蛋白的抑制性磷酸化位点及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，公开了一种AKT1蛋白的抑制性磷酸化位点及其应用，具体公开了AKT1蛋白Thr21位点磷酸化的应用。本发明专利技术首次发现AKT1蛋白的磷酸化位点Thr21可抑制AKT1蛋白的激酶活性，进而调控肿瘤细胞的增殖和正常细胞的恶性转化，并通过体内与体外实验进行验证，结果表明AKT1蛋白的第21位苏氨酸(Thr21)磷酸化可以抑制AKT1蛋白的激酶活性，进而抑制肿瘤的生长及正常细胞的恶性转化。提示了筛选及开发以AKT1蛋白的Thr21位点磷酸化为靶点的新药物在预防或治疗肿瘤方面的巨大潜力和应用前景。潜力和应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种AKT1蛋白的抑制性磷酸化位点及其应用


[0001]本专利技术属生物医药
，具体涉及一种AKT1蛋白的抑制性磷酸化位点及其应用。

技术介绍

[0002]肺癌是当今世界常见的恶性肿瘤，是导致全球癌症死亡的主要原因。由于肺癌发病隐匿，进展迅速，加之早期筛查诊断上的困难和临床治疗策略有限，在世界范围内，不同国家和地区的晚期肺癌患者五年生存率在4％～17％之间，整体处于较低水平。因此，作为高发病率及高病死率的癌种，肺癌的预防和治疗效果亟需提高。
[0003]PI3K/AKT1信号通路作为维持细胞生存、增殖、抗凋亡等生物学功能的重要信号转导通路之一，在肺癌的进展中发挥着关键的作用。在肺癌中，AKT1蛋白的过度活化是EGFR扩增或激活突变、PTEN缺失、PIK3CA的扩增或激活突变等一系列因素作用的结果。已有研究证实，AKT1蛋白的活性与肺癌的发生、恶性进展及放化疗耐药等表型密切相关，并可作为预测患者不良预后的独立因素。目前以AKT1为靶点的药物研发受到了人们的广泛关注，但由于靶向治疗药物的特异性和有效性较差，或毒副反应较强，AKT1抑制剂始终止步于肿瘤治疗的临床I期或II期阶段，仍未正式投入临床治疗。
[0004]关键蛋白质的翻译后修饰是细胞内部信号网络调控的重要靶点，参与了细胞正常的生理活动。但这些关键蛋白翻译后修饰调控机制的失衡也与包括肺癌在内的多种重大疾病的恶性进展有关。鉴于AKT1蛋白在肿瘤发生、发展中的重要作用，深入研究AKT1蛋白的翻译后修饰机制具有重大意义。目前关于AKT1磷酸化翻译后修饰的发现和研究主要集中于促进AKT1激活方面，关于AKT1抑制性磷酸化翻译后修饰的研究鲜有。

技术实现思路

[0005]本专利技术第一方面的目的，在于提供种AKT1蛋白Thr21位点磷酸化的应用。
[0006]本专利技术第二方面的目的，在于提供AKT1蛋白Thr21位点磷酸化促进剂在制备预防、干预、改善和/或治疗肿瘤的产品中的应用。
[0007]本专利技术第三方面的目的，在于提供AKT1蛋白Thr21位点作为靶点在筛选、开发和/或设计预防和/或治疗肿瘤产品中的应用。
[0008]本专利技术第四方面的目的，在于提供检测AKT1蛋白Thr21位点磷酸化的物质在制备预防、干预、改善和/或治疗肿瘤的产品中的应用。
[0009]本专利技术第五方面的目的，在于提供一种AKT1蛋白Thr21位点磷酸化的多肽。
[0010]本专利技术第六方面的目的，在于提供与本专利技术第四方面的多肽相关的生物材料。
[0011]本专利技术第七方面的目的，在于提供本专利技术第四方面的多肽或本专利技术第五方面的生物材料的应用。
[0012]本专利技术第八方面的目的，在于提供一种产品。
[0013]本专利技术第九方面的目的，在于提供一种预防、干预、改善和/或治疗肿瘤的药物的
筛选方法。
[0014]为了实现上述目的，本专利技术所采取的技术方案是：
[0015]本专利技术的第一个方面，提供AKT1蛋白Thr21位点磷酸化在制备肿瘤细胞增殖调控的产品。
[0016]优选地，所述肿瘤细胞增殖调控包括调控肿瘤细胞增殖和/或生长。
[0017]优选地，所述调控为促进AKT1蛋白的Thr21位点磷酸化，进而抑制肿瘤细胞的增殖和/或生长。
[0018]优选地，所述肿瘤细胞包括肺癌细胞、乳腺癌细胞、胃癌细胞、结直肠癌细胞和胰腺癌细胞中的至少一种。
[0019]AKT1蛋白Thr21位点磷酸化在制备正常细胞恶性转化调控的产品。
[0020]优选地，所述正常细胞恶性转化调控包括抑制正常细胞的恶性转化。
[0021]优选地，所述调控为促进AKT1蛋白的Thr21位点磷酸化，进而抑制正常细胞的恶性转化。
[0022]AKT1蛋白Thr21位点磷酸化在制备抑制AKT1蛋白激酶活性的产品。
[0023]AKT1蛋白Thr21位点磷酸化在抑制AKT1蛋白的激酶活性。
[0024]优选地，所述的第21位苏氨酸磷酸化的AKT1蛋白为AKT1蛋白的第21位苏氨酸(Thr21)磷酸化，或AKT1蛋白的第21位苏氨酸(Thr)突变为天冬氨酸(Asp)。
[0025]优选地，所述产品包括但不限于癌细胞体内外增殖和/或生长的模型、正常细胞恶性转化的模型、针对AKT1蛋白Thr21位点磷酸化制备的抗体、针对AKT1蛋白Thr21位点磷酸化制备重组载体和/或针对AKT1蛋白Thr21位点磷酸化制备的重组细胞系。
[0026]本专利技术的第二个方面，提供AKT1蛋白Thr21位点磷酸化促进剂在制备预防、干预、改善和/或治疗肿瘤的产品中的应用。
[0027]优选地，所述的肿瘤包含肺癌、乳腺癌、胃癌、结直肠癌、胰腺癌中的至少一种。
[0028]优选地，所述促进剂具有以下至少一种功能：
[0029](a1)促进或提高AKT1蛋白Thr21位点的磷酸化水平；
[0030](a2)促进或提高Thr21位点磷酸化的AKT1蛋白的表达或含量；
[0031]优选地，所述促进剂为核酸分子、碳水化合物、脂、小分子化合物、抗体、多肽、蛋白、基因编辑载体、慢病毒或肺相关病毒中的一种或多种。
[0032]优选地，所述促进剂为促进AKT1蛋白Thr21位点的磷酸化的物质或促进Thr21位点的磷酸化的AKT1蛋白的含量和/或活性的物质。
[0033]本专利技术的第三个方面，提供AKT1蛋白Thr21位点作为靶点在筛选、开发和/或设计预防和/或治疗肿瘤产品中的应用。
[0034]优选地，所述的肿瘤包含肺癌、乳腺癌、胃癌、结直肠癌、胰腺导管癌中的任意一种；进一步为肺癌。
[0035]本专利技术的第四个方面，提供检测AKT1蛋白Thr21位点磷酸化的物质在制备预防、干预、改善和/或治疗肿瘤的产品中的应用。
[0036]优选地，检测AKT1蛋白Thr21位点磷酸化的物质包含定量检测AKT1蛋白Thr21位点磷酸化的物质。
[0037]优选地，所述物质包括通过酶联免疫吸附试验、免疫荧光法、放射免疫测定法、免
疫共沉淀法、免疫印迹法、高效液相色谱法、毛细管凝胶电泳法、近红外光谱法、质谱法、免疫化学发光法、胶体金免疫技术、荧光免疫层析技术、表面等离子共振技术、免疫
‑
PCR技术、生物素
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亲和素技术、PCR或生物芯片法检测所述AKT1蛋白Thr21位点磷酸化表达量的物质。
[0038]优选地，所述检测AKT1蛋白Thr21位点磷酸化的物质选自：对AKT1蛋白Thr21位点磷酸化具有特异性的物质、AKT1蛋白Thr21位点磷酸化特异性的探针、基因芯片、PCR引物。
[0039]优选地，所述产品包括但不限于试剂、试剂盒、试纸、芯片。
[0040]优选地，所述产品的受试样品选自待测对象的体液、组织、细胞、排泄物中的至少一种。
[0041]本专利技术的第五个方面，提供一种AKT1蛋白Thr21位点磷本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.AKT1蛋白Thr21位点磷酸化在(1)～(4)中至少一项中的应用：(1)制备肿瘤细胞增殖调控的产品；(2)制备正常细胞恶性转化调控的产品；(3)制备抑制AKT1蛋白激酶活性的产品；(4)抑制AKT1蛋白的激酶活性。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，(1)中所述肿瘤细胞增殖调控包括调控肿瘤细胞增殖和/或生长；优选地，(2)中所述正常细胞恶性转化调控包括抑制正常细胞的恶性转化。3.AKT1蛋白Thr21位点磷酸化促进剂在制备预防、干预、改善和/或治疗肿瘤的产品中的应用。4.根据权利要求3所示的应用，所述促进剂具有以下至少一种功能：(a1)促进或提高AKT1蛋白Thr21位点的磷酸化水平；(a2)促进或提高Thr21位点磷酸化的AKT1蛋白的表达或含量；优选地，所述促进剂为核酸分子、碳水化合物、脂、小分子化合物、抗体、多肽、蛋白、基因编辑载体或慢病毒中的一种或多种。5.AKT1蛋白Thr21位点磷酸化作为靶点在筛选、开发和/或设计预防和/或治疗肿瘤产品中的应用；优选地，所述的肿瘤包含肺癌、乳腺癌、胃癌、结直肠癌、胰腺导管癌中的任意一种。6.检测AKT1蛋白Thr21位点磷酸化的物质在制备预防、干预、改善和/或治疗肿瘤的产品中的应用。7.一种AKT1蛋白Thr21位点磷酸化的多肽，其特征在于，所述多肽包括以AKT1蛋白Thr21位点为中心，N端毗邻五个AKT1氨基酸序列，C端连接三个AKT1氨基酸序列，其中Thr被磷酸化修饰；优选地，所述多肽为...

【专利技术属性】
技术研发人员：黎孟枫，蔡俊超，李旭，徐雪梅，吴珏珩，周婷，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：