香兰素在基因工程菌大肠杆菌中的合成与积累制造技术

本发明专利技术公开了香兰素在基因工程菌大肠杆菌中的合成与积累，属于微生物发酵技术领域。发明专利技术将拟无枝酸菌属来源的阿魏酰辅酶A合酶基因(Atfcs)和荧光假单孢菌来源的阿魏酰辅酶A水解酶/醛缩酶基因(Pfech)在大肠杆菌中异源表达，构建香兰素合成途径，并利用CRISPR CAS9技术敲除醛酮还原酶和/或香兰素氧化酶，减少了香兰素在大肠杆菌中的代谢，成功阻断了香兰素的降解途径，提高了底物阿魏酸的利用率，且上罐发酵11h产量可达10.8g/L，为进一步的香兰素生产重组大肠杆菌的优化奠定了基础，具有良好的工业化应用前景。好的工业化应用前景。好的工业化应用前景。

【技术实现步骤摘要】
香兰素在基因工程菌大肠杆菌中的合成与积累


[0001]本专利技术涉及香兰素在基因工程菌大肠杆菌中的合成与积累，属于微生物发酵


技术介绍

[0002]香兰素(Vanillin,VA)是阿魏酸(Ferulic acid,FA)的衍生物之一，是典型芳香醛，又名甲基原儿茶醛、香兰醛、香草醛，其化学名称为3
‑
甲氧基
‑
4羟基苯甲醛(3
‑
methoxy
‑4‑
hydrobenzaldehyde)，分子式为C8H8O3，相对分子质量为152.12。香兰素是一种应用十分广泛的带有酚羟基和醛基的典型芳香类物质，具有独特而浓郁的芳香气味。由于兼具酚羟基和醛基，既可进行醛基的氧化还原反应，又可发生酚羟基和芳环反应。香兰素用途十分广泛，是世界上最重要的香料之一，有“食品香料之王”的美誉，被广泛应用于化妆品、食品、医药、农业、塑料等多个领域。截止2019年，香兰素的全球年需求量达1.7万吨，并且还在不断增加，可见香兰素扮演着重要角色。目前，香兰素主要有从天然植物提取、化学合成以及生物转本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生产天然香兰素的重组菌，其特征在于，以大肠杆菌为宿主，游离表达阿魏酰辅酶A合酶fcs和烯酰辅酶A水合酶/醛缩酶ech，敲除或抑制醛酮还原酶基因；所述阿魏酰辅酶A合酶fcs来源于拟无枝酸菌属Amycolatopsissp.ATCC39116，所述烯酰辅酶A水合酶/醛缩酶ech来源于荧光假单孢菌Pseudomonasfluorescens。2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述重组菌还敲除或抑制香兰素氧化酶基因。3.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述醛酮还原酶基因选自yqhC，yqhD，dkgA，ahr，yahK中的一个或多个。4.根据权利要求2所述的重组菌，其特征在于，所述香兰素氧化酶基因选自paoC，aldA中的一个或多个。5.根据权利要求1～4任一所述的重组菌，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：张山，陈永丽，潘朝智，肖运柱，李志，
申请(专利权)人：深圳中科欣扬生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：