一种黄酮糖基转移酶及其编码基因与应用制造技术

本发明专利技术属于基因工程和酶工程技术领域，涉及一种甜叶菊来源的黄酮糖基转移酶及其编码基因与应用。本发明专利技术黄酮糖基转移酶来源于甜叶菊，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；其核苷酸序列如SEQ ID NO.2。本发明专利技术黄酮糖基转移酶SrUGT72B1能够催化黄酮类化合物糖基化的一个3

【技术实现步骤摘要】
一种黄酮糖基转移酶及其编码基因与应用


[0001]本专利技术涉及一种甜叶菊来源的黄酮糖基转移酶(UDP
‑
glycosyltransferases,UGT)及其编码基因与应用，属于基因工程和酶工程


技术介绍

[0002]黄酮类化合物是植物体内含量和种类丰富的一类次级代谢物，具有抗肿瘤、抗氧化、抑菌、改善糖和脂代谢、保护心脑血管系统等多种药理活性。糖基化是黄酮类化合物最常见的修饰方法之一，进一步提高了黄酮类化合物的丰富程度，为药物筛选提供了巨大物质基础。糖基化也可以改变黄酮类分子的亲疏水性、化学稳定性、亚细胞定位等特征，从而调节黄酮类分子在细胞及植物体内的转运和功能，参与植物的胁迫应答机制。在植物体内过表达某些黄酮糖基转移酶能够消除黄酮生物合成途径中的产物抑制，激活黄酮生物合成途径，累积更多次级代谢物，提高植物的胁迫响应能力。
[0003]黄酮糖苷类天然产物多是从植物中分离得到，但是复杂的植物提取工艺流程和高昂的分离纯化成本使得大规模制备受到限制。化学合成糖苷涉及冗长的基团保护和去保护步骤以便实现区域选择性和立本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种黄酮糖基转移酶，其特征在于：其氨基酸序列具有如下特征中的一种或二种以上：1)具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；2)具有如SEQ ID NO.1从氨基端开始第1
‑
424位氨基酸残基序列；3)对SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列进行一个或两个以上氨基酸取代和/或缺失和/或添加而形成的具有黄酮糖基转移酶活性的氨基酸序列；4)与SEQ ID NO.1具有至少80％同一性的氨基酸序列。2.一种黄酮糖基转移酶基因，其核苷酸序列具有如下特征中的一种或二种以上：1)具有SEQ ID NO.2所示的脱氧核糖核酸序列；2)编码SEQ ID NO.1氨基酸序列的脱氧核糖核酸序列；3)对SEQ ID NO.2的脱氧核糖核酸序列进行一个或两个以上核苷酸取代和/或缺失和/或添加而得到的编码具有黄酮糖基转移酶活性的核苷酸序列；4)与SEQ ID NO.2限定的脱氧核糖核酸序列的同源性达到80％及以上，且能编码黄酮糖基转移酶的脱氧核糖核酸序列。3.一种含有权利要求2所述的黄酮糖基转移酶基因的重组表达质粒。4.一种含有权利要求2所述的黄酮糖基转移酶基因的重组基因工程菌。5.一种黄酮糖基转移酶的制备方法，其特征在于：将权利要求2所述的黄酮糖基转移酶基因克隆入重组表达载体，导入宿主细胞，获得重组表达的黄酮糖基转移酶。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述的重组表达载体包括大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、枯草杆菌表达载体、乳酸菌表达载体、链霉菌表达载体、噬菌体载体、丝状真菌表达载体、植物表达载体、昆虫表达载体、或哺乳动物细胞表达载体中的一种或二种以上。所述宿主细胞包括大肠杆菌宿主细胞、酵母菌宿主细胞、枯草杆菌宿主细胞、乳酸菌宿主细胞、放线菌宿主细胞、丝状真菌宿主细胞、昆虫细胞，哺乳动物细胞中的一种。7.权利要求1所述的黄酮糖基转移酶在催化黄酮醇类、黄酮类、二氢黄酮类和二羟基查尔酮类化合物糖基化的应用；在制备黄酮醇糖苷类、黄酮糖苷类、二氢黄酮糖苷类和二羟基查尔酮糖苷类化合物的应用；在制备黄酮双糖苷化合物的应用；在制备黄酮三糖苷化合物的应用；优选地，所述应用的底物糖基化位点包括黄酮3位和/或5位和/或7位羟基。8.权利要求7所述应用，其特征在于，所述黄酮醇糖苷类化合物包括槲皮素
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O
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葡萄糖苷、槲皮素
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O
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葡萄糖苷、槲皮素
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葡萄糖苷、槲皮素
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3,7
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O
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双葡萄糖苷、槲皮素
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3,5
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双葡萄糖苷、槲皮素
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5,7
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O
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双葡萄糖苷、槲皮素
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3,5,...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹恒，王宇，朱理平，陈科材，徐良平，
申请(专利权)人：诸城市浩天药业有限公司，
类型：发明
国别省市：