CNN2-B探针在动脉粥样硬化斑块特异性识别中的应用制造技术

本发明专利技术提供CNN2

【技术实现步骤摘要】
CNN2
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B探针在动脉粥样硬化斑块特异性识别中的应用


[0001]本专利技术涉及荧光探针
，且特别涉及CNN2
‑
B探针在动脉粥样硬化斑块特异性识别中的应用。

技术介绍

[0002]动脉粥样硬化(AS)是致死性心血管病的重要病因。由于传统诊断成像技术的局限，目前，研究者们聚焦于研究动脉粥样硬化斑块的荧光成像新模式，因而需要开发针对斑块的特异性识别探针。
[0003]现有的可用于识别斑块的有机小分子探针通常依赖于脂质的标记，如油红O。然而，脂质探针对其他载脂细胞器和组织细胞没有选择性，例如不能区分泡沫细胞和脂肪细胞，因而动脉壁附近的脂肪组织会严重干扰斑块的检测，造成假阳性结果。因此，研究出一种针对斑块识别的高选择性荧光探针对于动脉粥样硬化斑块特异性识别具有重要意义。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供CNN2
‑
B探针在动脉粥样硬化斑块特异性识别中的应用，该CNN2
‑
B探针为ONOO
‑
/脂质双响应型的探针，且具有脂滴定位功能，将其用于动脉粥样硬化斑块的特异性识别中可更加精准的判断动脉粥样硬化斑块的位置。
[0005]本专利技术解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
[0006]本专利技术提出CNN2
‑
B探针在动脉粥样硬化斑块特异性识别中的应用，所述CNN2
‑
B探针的结构式为：
[0007][0008]本专利技术实施例的CNN2
‑
B探针在动脉粥样硬化斑块特异性识别中的应用的有益效果是：
[0009]本专利技术的CNN2
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B探针为ONOO
‑
/脂质双响应型的探针，其在ONOO
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单独存在的情况下，荧光非常微弱，只有在脂质及ONOO
‑
同时存在的情况下才能使荧光急剧增强，并具有脂滴定位功能。将该探针用于动脉粥样硬化斑块的特异性识别中可更加精准的判断动脉粥样硬化斑块的位置。
附图说明
[0010]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对
范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0011]图1A为本专利技术实施例1的CNN2
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B探针在不同响应体系中的荧光强度对比图；
[0012]图1B为反应时间对本专利技术实施例1的CNN2
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B探针的荧光强度影响的趋势图；
[0013]图2A为LDs mimics浓度变化对本专利技术实施例1的CNN2
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B的荧光强度影响的趋势图；
[0014]图2B为ONOO
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浓度变化对本专利技术实施例1的CNN2
‑
B的荧光强度影响的趋势图；
[0015]图3为本专利技术实施例1的CNN2
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B对有机生物活性分子和无机离子的选择性对比图；
[0016]图4A为本专利技术实施例1的CNN2
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B及其响应产物CNN2的荧光共定位图；
[0017]图4B为分别采用本专利技术实施例1的CNN2
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B和Mito
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Tracker对A549细胞进行染色后的荧光分布图；
[0018]图5为分别采用本专利技术实施例1的探针CNN2
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B和探针HPF对不同刺激下的小鼠巨噬细胞进行染色后的荧光分布图；
[0019]图6为本专利技术实施例1的CNN2
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B的荧光强度随时间的变化图；
[0020]图7为采用不同荧光探针对斑块进行染色后的荧光分布图。
具体实施方式
[0021]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0022]下面对本专利技术实施例的CNN2
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B探针在动脉粥样硬化斑块特异性识别中的应用进行具体说明。
[0023]本专利技术提出CNN2
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B探针在动脉粥样硬化斑块特异性识别中的应用，所述CNN2
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B探针的结构式为：
[0024][0025]进一步地，在本专利技术的较佳实施例中，所述CNN2
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B探针为脂质和ONOO
‑
双响应探针。现有的探针KC
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ONOO是一种可与过氧亚硝酸盐(ONOO
‑
)反应的探针，并被应用于药物性肝损伤的监测。本专利技术的专利技术人经研究发现探针KC
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ONOO是一种ONOO
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/脂质双响应型的探针而非单纯的ONOO
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响应探针，其在ONOO
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单独存在的情况下，荧光非常微弱，只有在脂质及ONOO
‑
同时存在的情况下才能使荧光急剧增强，并具有脂滴定位功能，因此可将其作为动脉粥样硬化斑块的特异性识别探针。
[0026]进一步地，在本专利技术的较佳实施例中，所述应用包括CNN2
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B探针体外测试、CNN2
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B探针细胞水平测试和CNN2
‑
B探针动物水平测试。
[0027]进一步地，在本专利技术的较佳实施例中，所述CNN2
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B探针体外测试的探针溶液选自CNN2
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B探针的PBS缓冲液，其中，所述CNN2
‑
B探针的PBS缓冲液还包含二甲基亚砜，所述CNN2
‑
B探针的PBS缓冲液中，所述CNN2
‑
B探针的浓度为9.5～10.5μmol/L，PBS缓冲液的pH＝7.4，所述二甲基亚砜的质量分数为0.08～0.12％。优选地，CNN2
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B探针的PBS缓冲液中，CNN2
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B探针的浓度为10μmol/L，PBS缓冲液的pH＝7.4，所述二甲基亚砜的质量分数为0.1％。
[0028]进一步地，在本专利技术的较佳实施例中，所述CNN2
‑
B探针细胞水平测试包括以下步骤：
[0029]将CNN2
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B探针溶液与细胞在培养基上共孵育50～70min，除去含有探针的所述培养基后，采用荧光显微镜进行观察。
[0030]进一步地，在本专利技术的较佳实施例中，所述CNN2
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B探针溶液的浓度为9.5～10.5μmol/L，所述荧光显微镜的激发通道选择λ
ex
＝488nm。优选地，CNN2
‑
B探针溶液的浓度本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.CNN2
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B探针在动脉粥样硬化斑块特异性识别中的应用，其特征在于，所述CNN2
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B探针的结构式为：2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述CNN2
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B探针为脂质和ONOO
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双响应探针。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用包括CNN2
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B探针体外测试、CNN2
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B探针细胞水平测试和CNN2
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B探针动物水平测试。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述CNN2
‑
B探针体外测试的探针溶液选自CNN2
‑
B探针的PBS缓冲液，其中，所述CNN2
‑
B探针的PBS缓冲液还包含二甲基亚砜，所述CNN2
‑
B探针的PBS缓冲液中，所述CNN2
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B探针的浓度为9.5～10.5μmol/L，PBS缓冲液的pH＝7.4，所述二甲基亚砜的质量分数为0.08～0.12％。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述CNN2
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B...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑锦荣，桑芒芒，戴翠莲，黄艺博，
申请(专利权)人：厦门大学附属心血管病医院，
类型：发明
国别省市：